专利名称：寡核糖核苷酸的嵌段合成的制作方法
技术领域：
本发明涉及寡核苷酸、尤其是寡核糖核苷酸的化学合成。在另一个方面，本发明涉及使用二-和三-核糖核苷酸结构单元来化学合成寡核糖核苷酸。
背景技术：
由于基因组测序、功能基因组学、和基于PCR的检测方法消耗大量的DNA寡核苷酸，对于合成寡核苷酸的需求已呈指数级增长。作为潜在疗法的RNA干扰(RNAi)代表一种全新方式来治疗人类疾病[Manoharan, Curr.0pin.Che.Biol.8，570-579 (2004)]。然而，在 RNAi 技术的开发中，实现目标组织和细胞递送、在体内稳定、以及RNA的成本有效的大规模合成是显著瓶颈。基于主流RNAi的疗法的现实正快速接近并且对这些化合物的大规模的需求可以很快超过制造商的能力。因此，需要开发能够快速和高纯度地合成RNA低聚物的合成策略。用于DNA和RNA合成的目前方法依赖于在固体载体上逐步添加单体亚磷酰胺单元[Caruthers, M.H.et al.Methods in Enzymology154, 287-313(1987);Alvarado-Urbina, G.et al.Science214，270-274 (1981)]。从3’-至5’端的链延伸是优选的，这是通过将具有3’-磷(III)基团(以其活化形式)的核苷单元偶联于另一个核苷单元的游离5’-羟基上来实现。作为固体载体，可以使用500至1000A受控的多孔玻璃(CPG)载体或有机聚合物载体，如引物聚苯乙烯载体PS200。通过用有机酸来切割5’-O-二甲氧基三苯甲基开始链延伸，因而释放亲核性5’ -羟基。然后在活化剂存在下将这种末端亲核体偶联至受保护的核苷3’-O-亚磷酰胺单体。在RNA合成的情况下，需要2’-羟基的适当保护(见下文)。在称作’加帽’的过程中，将任何未反应的5’-羟基乙酰化。为此目的使用的最常用的基团是乙酰酯。因此，用乙酸酐’加帽’来酯化任何未反应的5’-羟基并停止副产物的积累。然后将新产生的亚磷酸三酯3’，5’ -键氧化以提供所期望的和更稳定的磷酸三酯。重复此过程直到获得具有所期望的长度和序列的低聚物。从固体载体切割低聚物并且从糖、磷酸酯和核酸碱基去除保护基团可以提供所期望的目标低聚物，然后通过离子交换高压液相层析(HPLC)、离子对反相HPLC、或聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将其从更短的失败序列(failuresequence)中分离。然后通过质谱法来表征全长低聚物。同时，在DNA微阵列或〃基因芯片〃上可以平行合成大量的 DNA 低聚物[Ramsay G., Nature Biotechnology 16，40-44 (1998)]。相同的叠代法可以应用于在溶液中DNA和RNA寡核苷酸的合成，例如如最近由Donga等人描述的，利用离子水溶性载体[例如，Donga, R.A.et al.，J.0rg.Chem.71，7907-7910 (2006) ; Donga, R.A.et al.，Can.J.Che m.85，274-282 (2007)]。离子可溶性载体的使用允许在寡核苷酸合成循环中使用的所有其他试剂上，选择性地沉淀不断增长的寡核苷酸。已描述了用于装配寡核苷酸链的不同化学方法，例如，亚磷酰胺方法(上文描述的)、磷酸三酯法、H-膦酸酯法、和磷酸二酯法[Nucleic acids in chemistry andbiology(Edited by C.Michael Blackburn and Michael J.Gait);Oxford and NewYork:Oxford University Press, 1996]。虽然在磷酸三酯和磷酸二酯法中，活性磷基团处于氧化态+V，按照亚磷酰胺和H-膦酸酯方法在偶联反应中使用更加活性的磷+III衍生物。亚磷酰胺和H-膦酸酯法均需要将P (III)氧化成P (V)以产生稳定的P (V)衍生物；然而，在H-膦酸酯方法中，仅在已装配整个寡核苷酸链以后才进行氧化步骤。不考虑所使用的偶联化学方法，与目前的DNA合成相关的一个问题是由于使用化学合成的寡核苷酸，导致高频率的序列错误。由于固定的DNA序列重复暴露于去封闭试剂，目标寡核苷酸序列越长，存在越多的缺陷。例如，在装配DNA链期间除去5’-O-二甲氧基三苯甲基保护基团所需要的重复的酸性处理导致核酸碱基的丧失(脱嘌呤作用)；因此，这种方法仅对于制备核苷酸的相对较短序列是实用的。对于用于生物应用的足够量的DNA寡核苷酸，固相亚磷酰胺方法的目前实际限制是约200nt。对于在固体载体上的RNA合成，上述限制看来是大约100nt，但 是出于不同的原因，S卩，RNA3’-亚磷酰胺单体的逐步偶联效率小于(96-99%) DNA亚磷酰胺偶联(98-100%)。这主要是由于由掩蔽RNA结构单元的2’ -羟基的保护基团所产生的空间效应。更加快速地装配寡核苷酸链的一种替代方法是通过〃嵌段〃缩合反应，如由Khorana等人早期工作作为举例说明，通过磷酸二酯中间体来合成基因片段[Kossel，H.et al., J.Am.Chem.Soc.89, 2185 (1967) ; Ohtsuka E.and Khorana, H.G.J.Am.Chem.Soc.89，2195 (1967)]。这项工作最终导致用于从酵母中丙氨酸转移核糖核酸的结构基因的总合成[Khorana, G.B.et al.J.Mol.Biol.72，209-217 (1972)]。在溶液中制备短寡核苷酸片段，纯化，然后通过特异性退火加以连接，并酶促连接，以产生更长的双链体和丙胺酸tRNA基因序列。他们的最初方法涉及在溶液中在被保护的二 _、三_、和四核苷酸的"嵌段〃(携带5’ -磷酸单酯)和不断增长的完全保护的寡核苷酸链的3’ -羟基端之间的依次缩合。在每个步骤中，通过阴离子交换层析来分离产物，然后在去除保护基团以后通过纸层析法来验证纯度。甚至当使用大量过量的"嵌段"时，产率也随链长度的增加而降低。仍然，这种方法证明了嵌段偶联超过单体偶联的两个优点:嵌段偶联可以减少合成步骤的数目并且在起始和产物寡核苷酸链之间产生更明显的差异。例如，在分离期望的全长DNA序列中，糖-磷酸盐主链的长度和总净电荷是最重要的特征。一旦选择的偶联方法变成亚磷酰胺方法，研究人员寻找合成用于各种应用的嵌段DNA亚磷酰胺的方法，包括通过置换合成基因中的整个密码子来进行蛋白质的随机诱变。合成子变成可缩合的DNA 二聚体和三聚体单元,其与自动合成仪相容[Kumar, G.and Poonian, M.S.J.0rg.Chem., 49, 4905-4912 (1984) ; Virnekas, B.et al.NucleicAcids Research22, 5600-5607(1994);Ono, A.et al.Nucleic Acids Research23, 4677-4682 (1995);Kayushin, A.L.et al.Nucleic Acids Research24, 3748-3755(1996);Zehl,A.et al.Chemical Communications(Cambridge)2677-2678(1996);Neuner, P.etal.Nucleic Acids Research,26,1223-1227(1998);Eleuteri, A.et al.Nucleosides&NucIeotides18，475-483(1999);Kayushin,A.et al.Nucleosides, Nucleotides&Nucleic Acidsl9, 1967-1976(2000), -Yagodkin, A.et al.Nucleosides, Nucleotides&NucleicAcids26,473-497(2007)]。在最近几年，研究DNA嵌段合成的主要驱动力是寡核苷酸作为治疗剂的前景。Reese和Yan在他们的Vitravene合成中证明了，利用不常见的H-膦酸酯法在溶液中嵌段缩聚三聚体单元是可实现的目标[Reese, C.B.and Yan, H.Journal of theChemical Society, Perkin Transactionsl:Organic and Bio-Organic Chemistrypp.2619-33(2002)]。到目前为止，已经有许多尝试来设计保护基团和方法，其具体化为构造高质量寡核糖核苷酸所需要的条件[关于述评，参见Beaucage, S.L.Curr.0pin.Drug Discov.Devel.11, 203-16 (2008) ;Reese, C.B.0rganic&BiomolecularChemistry3，3851-3868 (2005)]。事实上，多年以来，RNA合成一直被认为比DNA合成要复杂得多，因为难以找到相容的2’-保护基团，其(a)提供较高的逐步偶联产量，(b)在整个链装配中是稳定的，以及(c)在合成结束时可以选择性地除去而没有磷酸二酯键异构化或降解。最广泛使用的2’ -保护基团是2’ -O-叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)[Ogilvie, K..et al.Tetrahedron Lettersl5, 2861-2867 (1974)]。在氟化物离子存在下，在RNA链装配结束时除去上述保护基团。针对核苷保护描述的基于其他甲硅烷基醚的保护基团是三异丙基甲硅烷基(TIPS)、甲基二异丙基甲硅烷基(MDIPS)、环状烷基甲硅烷基和其他甲娃烧基[Ogilvie, K.K.et al.J.0f Carbohydrates, Nucleosides, Nucleotides3,197-227 (1976);Damha M.J, Ogilvie Κ.K.(1993),Oligoribonucleotide synthesis: thesi Iyl-phosphoramidite method.1n: Protocols for Oligonucleorides andAnalogs: Synthesis and Properties, Methods in Molecular Biology(Agrawal S,ed.)Vol.20.Totowa, NJ: The Humana Press Inc.pp.81-114] 其中，TIPS 保护已被描述主要用于5’ -O-单甲氧基三苯甲基N2-异丁酰基鸟苷衍生物，因为通过硅胶层析可以更容易地彼此分离 2’ 和 3’-0-TIPS 异构体[Damha M.J, Ogilvie K.K.(1993), Oligoribonucleotidesynthesis:the silyl-ph·osphoramidite method.1n:Protocols for Oligonucleotidesand Analogs: Synthesis and Properties, Methods in Molecular Biology(AgrawalS, ed.) Vol.20.Totowa, NJ: The Humana Press Inc.pp.81-114; Damha, M.J.etal.Tetrahedron Letters45, 6739-6742 (1992)]。相对于 TIPS、TBDPS 和其他体积更大的甲硅烷基醚，TBDMS基团的较小空间体积将有利于TBDMS保护基团，和用于RNA合成的其他保护基团相比，其已被最多使用。与亚磷酰胺缩合程序结合，2’ -O-TBDMS单体已允许寡核糖核苷酸的高效合成[Ogilvie, K.K.et al.Proc.Natl.Acad.Science (USA)，85，5764-5768 (1988) ; Usman, N.et al.J.Am.Chem.Soc.109, 7845-7854 (1987)]。用于保护2’-羟基的甲硅烷基醚的潜在缺点在于在质子溶剂、亲核性催化剂、或碱性条件的影响下它们的广泛公认的经历2’-至-3’异构化的能力。例如，在甲醇、咪唑、吡啶/水、或氨水存在下，TBDMS基团从02’迁移到03’位置(反之亦然)，从而产生核苷02’和03’甲娃烧基区域异构体的混合物[Ogilvie, K.K.and Entwistle, D.ff.Carbohydrate Res.89,203-210 (1981);Ogilvie, Κ.K.(1983)Proceedings of the5thInternational Round Table on Nucleosides, Nucleotides and Their BiologicalApplications, (Rideout, J.L.et al.eds.), Academic, London, pp.209-256) ;DamhaM.J, Ogilvie Κ.K.(1993), Oligoribonucleotide synthesis: the silyl-phosphoramiditemethod.1n:Protoco Is for Oligonucleotides and Analogs:Synthesis andProperties, Methods in Molecular Biology(Agrawal S, ed.) Vol.20.Totowa, NJ: TheHumana Press Inc.pp.81-114]。甲硅烷基异构化是其他0-甲硅烷基醚保护基团的特点。在甲醇中，尿苷和
7-脱氮杂鸟苷的O-TIPS衍生物也经历异构化，虽然比它们的O-TBDMS对应物更缓慢[Ogilvie, K.K.et al.J.0r Carbohydrates, Nucleosides, Nucleotides3, 197-227 (1976)
;Seela, F.and Mersmann, K., Helvetica Chimica Acta, 76，1435-1449 (1993)]。在乙醇氨水条件下，5’ -O-单甲氧基三苯甲基-N2-异丁酰基-2’ -O-TIPS鸟苷经历异构化从而产生2’/3’-TIPS区域异构 体的混合物，其可以通过层析法加以分离。这可以提供方法来将更多的不需要的3’-异构体转化(再循环)成更有用的2’-异构体[Damha M.J, OgilvieK.K.(1993), Oligoribonucleotide synthesis: the silyl-phosphoramidite method.1n:Protocols for Oligonucleotides and Analogs: Synthesis and Properties, Methodsin Molecular Biology(Agrawal S, ed.) Vol.20.Totowa, NJ: The Humana Press Inc.pp.81-114]。在干燥的非质子溶剂中，2’-0-甲硅烷基通常并不迁移到03’。当严格遵守这些条件时，有可能以区域异构(regiosomerically)纯形式来制备2’ -O-甲娃烧基化核糖核苷-3’ -O-亚憐酸胺衍生物[Milecki, J.et al.Nucleosides&Nucleotides, 8, 463-474 (1989) ; Scaringe, S.A.et al.Nucleic Acids Res., 18, 5433-5341 (1990)]。这显然是重要的要求，因为甚至微量的3’ -O-甲硅烷基区域异构体的存在也将影响所期望的RNA序列的质量和生物活性。用于2’ -羟基位置的许多其他保护基团已用于RNA的合成[评述于Beaucage，S.L.Curr.0pin.Drug Discov.Devel.11,203-16 (2008);Reese, C.B.0rganic&BiomolecularChemistry3, 3851-3868 (2005)]。已报道利用包含2’ -三异丙基甲硅烷氧基甲基(Τ0Μ)、2’ -乙缩醛-乙酰丙酰基(2’ -acetal-levulinyl)、和2’ -O- 二(2-乙酰氧基乙氧基)甲基(ACE)基团的单体来进行RNA合成，从而产生较高的偶联效率，因为这些保护基团显示比2’ -TBDMS基团更低的空间位阻[关于比较研究，参见Lackey, J.G.et al.J.Am.Chem.Soc.131,8496-8502(2009)]。如同TBDMS基团一样，利用氟化物来除去TOM保护基团。在所有的情况下，寡核糖核苷酸的合成是复杂的多步骤过程，其涉及通常由单体亚磷酰胺结构单元(例如，5’-O-二甲氧基三苯甲基-N-保护的-2’-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-核苷_3’ -O-亚磷酰胺)来装配寡核苷酸链，碱不稳定的核酸碱基保护基团(例如，苯甲酰基、异丁酰基、乙酰基、苯氧基乙酰基、乙酰丙酰基(Ievulinyl)等)的去保护，由载体切割(例如，玻璃珠或聚苯乙烯)，接着2’ -羟基保护基团的去除。寡核糖核苷酸嵌段的产生是更加困难的，这是由于2’-羟基的存在以及它需要保护，因此此研究路线已远远落后于DNA嵌段的研究路线。仍然，已有描述了通过嵌段偶联缩合反应来合成RNA的数个报告。利用磷酸三酯法，Ikehara和同事偶联RNA三聚体和四聚体，以在数天以后给出 30% 产率[Ohtsuka, E.et al.J.Am.Chem.Soc.100,8210(1978)]。Werstiuk和Nielson报道了，偶联RNA四聚体和RNA五聚体，以在16天以后提供产率为50%的所期望的九核苷酸 RNA 序列[fferstiuk, E.S.，Neilson, T.Can.J.Chem.54，2689 (1976)]。Van Boom和同事在3.5天反应中以58%的产率缩合RNA四聚体和RNA十聚体[van Boom, J.H.et al.Trav.Chim.Pays-Bas, 97, 73 (1978) ] Ogilvie 和同事描述了 5’_0_ 单甲氧基三苯甲基-2’ -O-叔丁基二甲基甲硅烷基_3’ -O-乙酰丙酰基核糖核苷单体的合成以及它们在十六尿苷酸装配中的应用(经由二氯亚磷酸酯(phosphodichloridite)程序)[Nemer, M.J, and Ogilvie, K.K.，Can.J.Chem.58，1389-1397 (1980)]。几乎完全利用单体亚磷酰胺合成子来进行固相RNA合成。鉴于亚磷酰胺化学方法的效率，非常可取的是，可以利用嵌段(二聚体和三聚体)亚磷酰胺进行RNA合成，因为在链装配期间在每个步骤这些将允许更长的链延长，从而显著缩短合成所需要的时间。
发明内容
本文描述了用于合成嵌段聚体(blockmer) (二聚体、三聚体、四聚体等)核糖核苷酸的方法，其已用于通过嵌段偶联反应的RNA合成。在RNA合成的每个偶联阶段这些结构单元允许更长的链延长，从而显著减少合成目标RNA低聚物所需要的步骤总数。另外，本文披露的嵌段偶联策略产生粗制RNA低聚物，其更容易与更短的失败序列分离。通过UpU、ApA、和UpUpU嵌段的合成以及它们在寡核糖核苷酸链的装配(经由亚磷酰胺偶联方法)中的应用来说明上述程序。所披露的化合物和方法有益于siRNA制备的两个关键方面:速度、和目标低聚物的纯度。更具体地，在一个方面，提供了化学式(II)的化合物:
权利要求
1.一种化学式(II)的化合物:
2.根据权利要求1所述的化合物，其中，η选自1、2、或3。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中，R3是
4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中:R1 是
5.根据权利要求1或2所述的化合物，其中，R3是保护基团。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中，所述保护基团是乙酰丙酰基(Lev)基团。
7.根据权利要求5所述的化合物，其中，所述保护基团是一种离子标记。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中，所述离子标记选自:
9.根据权利要求5至8中任一项所述的化合物，其中:R1 是 TBDMS ； R5选自DMTr或MMTr ;并且 B是在至少一个氮上通过适当的N-保护基团保护的核酸碱基， 优选地，所述N-保护基团选自乙酰丙酰基、乙酰基、二氟乙酰基、三氟乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基、9-芴基甲氧基羰基、苯氧基乙酰基、二甲基甲脒、或N，N-二苯基氨基甲酸酯基。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中，R5是DMTr，并且Rp是甲基。
11.一种用于制备化学式(II)的化合物的方法:
12.根据权利要求11所述的方法，其中，R3是H。
13.根据权利要求11所述的方法，其中，R3是保护基团，所述方法进一步包括 d)去除所述R3保护基团。
14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述保护基团是乙酰丙酰基(Lev)基团。
15.根据权利要求13所述的方法，其中，所述保护基团是一种离子标记。
16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述离子标记选自
17.根据权利要求12所述的方法，进一步包括步骤(b)或(c)的产物的亚磷酸酯化以形成化学式(IIa)的化合物
18.根据权利要求13至16中任一项所述的方法，进一步包括步骤(d)的产物的亚磷酸酯化以形成化学式(IIa)的化合物
19.根据权利要求11至18中任一项所述的方法，其中R1 是 TBDMS ；R5 选自 DMTr 或 MMTr ； Rp选自甲基(Me)、2-氰基乙基(CNEt)、邻-氯苯基(o_ClPh)、或对-氯苯基(p-ClPh)； R选自异丙基、甲基、或乙基；并且 B是在至少一个氮上通过适当的N-保护基团保护的核酸碱基， 优选地，所述N-保护基团选自乙酰丙酰基、乙酰基、二氟乙酰基、三氟乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基、9-芴基甲氧基羰基、苯氧基乙酰基、二甲基甲脒、或N，N-二苯基氨基甲酸酯基。
20.根据权利要求19所述的方法，其中R5 是 DMTr ； Rp是甲基；并且 R 是 iPr。
21.一种用于制备化学式(V)的化合物的方法
22.根据权利要求21所述的方法，其中，R3是H。
23.根据权利要求21所述的方法，其中，R3是保护基团，所述方法进一步包括c)去除所述R3保护基团。
24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述保护基团是乙酰丙酰基(Lev)基团。
25.根据权利要求23所述的方法，其中，所述保护基团是一种离子标记。
26.根据权利要求25所述的方法，其中，所述离子标记选自
27.根据权利要求22所述的方法，进一步包括步骤(b)的产物的亚磷酸酯化以形成化学式(Va)的化合物
28.根据权利要求23至26中任一项所述的方法，进一步包括步骤(C)的产物的亚磷酸酯化以形成化学式(Va)的化合物
29.根据权利要求21至28中任一项所述的方法，其中R1 是 TBDMS ；R5 选自 DMTr 或 MMTr ； Rp选自甲基(Me)、2-氰基乙基(CNEt)、邻-氯苯基(o_ClPh)、或对-氯苯基(p-ClPh)； R选自异丙基、甲基、或乙基；并且 B是在至少一个氮上通过适当的N-保护基团保护的核酸碱基； 优选地，所述N-保护基团选自乙酰丙酰基、乙酰基、二氟乙酰基、三氟乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基、9-芴基甲氧基羰基、苯氧基乙酰基、二甲基甲脒、或N，N-二苯基氨基甲酸酯基。
30.根据权利要求29所述的方法，其中R5 是 DMTr ； Rp是甲基；并且 R 是 iPr。
31.一种用于制备N-聚体寡核苷酸的方法,所述方法包括 a)缩合化学式(IIa)的亚磷酰胺
32.根据权利要求31所述的方法，其中，η选自0、1、2、或3。
33.根据权利要求31或32所述的方法，其中:R1 是 TBDMS ；R5 选自 DMTr 或 MMTr ； Rp选自甲基(Me)、2-氰基乙基(CNEt)、邻-氯苯基(o_ClPh)、或对-氯苯基(p-ClPh)； R选自异丙基、甲基、或乙基；并且 B是在至少一个氮上通过适当的N-保护基团保护的核酸碱基， 优选地，所述N-保护基团选自乙酰丙酰基、乙酰基、二氟乙酰基、三氟乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基、9-芴基甲氧基羰基、苯氧基乙酰基、二甲基甲脒、或N，N-二苯基氨基甲酸酯基。
34.根据权利要求33所述的方法，其中:R5 是 DMTr ； Rp是甲基；并且 R 是 iPr。
35.根据权利要求31至34中任一项所述的方法，进一步包括完全去保护步骤(b)或(c)的产物以产生游离的N-聚体寡核苷酸。
36.根据权利要求31至35中任一项所述的方法，其中，所述N-聚体寡核苷酸具有4-100个核苷酸的长度。
37.根据权利要求31至36中任一项所述的方法，其中，y是I并且N是核苷。
38.根据 权利要求31至37中任一项所述的方法，其中
39.根据权利要求31至37中任一项所述的方法，其中
40.一种通过根据权利要求31至39中任一项所述的方法制备的寡核苷酸。
41.一种用于制备N-聚体寡核苷酸的方法,所述方法包括a)缩合化学式(IIb)的化合物
42.根据权利要求41所述的方法，其中，η选自0、1、2、或3。
43.根据权利要求41或42所述的方法，其中，
44.根据权利要求41至43中任一项所述的方法，其中R1 是 TBDMS ；R5 选自 DMTr 或 MMTr ； Rp选自甲基(Me)、2-氰基乙基(CNEt)、邻-氯苯基(o_ClPh)、或对-氯苯基(p-ClPh)； R选自异丙基、甲基、或乙基；并且 B是在至少一个氮上通过适当的N-保护基团保护的核酸碱基， 优选地，所述N-保护基团选自乙酰丙酰基、乙酰基、二氟乙酰基、三氟乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基、9-芴基甲氧基羰基、苯氧基乙酰基、二甲基甲脒、或N，N-二苯基氨基甲酸酯基。
45.根据权利要求44所述的方法，其中R5 是 DMTr ； Rp是甲基；并且 R 是 iPr。
46.根据权利要求41至45中任一项所述的方法，进一步包括完全去保护步骤(c)的产物以产生游离的N-聚体寡核苷酸。
47.根据权利要求41至46中任一项所述的方法，其中，所述N-聚体寡核苷酸具有4-100个核苷酸的长度。
48.一种通过根据权利要求41至47中任一项所述的方法制备的寡核苷酸。
全文摘要
本发明涉及寡核糖核苷酸的化学合成。在另一个方面，本发明涉及化学式(II)的化合物用于制备这些化合物的方法，以及其在寡核糖核苷酸的化学合成中的应用。
文档编号C07H21/00GK103237805SQ201180050374
公开日2013年8月7日 申请日期2011年8月23日 优先权日2010年8月23日
发明者马萨德·J·达姆哈, 马修·哈斯勒, 陈德恒, N·马利卡尔琼纳·雷迪, 罗伯特·亚历山大·东加 申请人:皇家学习促进学会/麦吉尔大学