专利名称：一种酒饼簕碱的分离纯化方法
技术领域：
本发明属于植物有效成分提取技术领域，涉及一种酒饼簕碱的分离纯化方法。
背景技术：
酒饼簕碱(Atalaphyllinine),分子式为C23H23NO4,分子量为 377.44,mp. 205-207 °C,是从单叶酒饼簕monophylla的根中提取分离的一种口丫唳酮类生物碱。实验研究表明，酒饼簕碱具有抗疟活性体外IOy g/ml时，对约尔疟原虫(Plasmodium yoelii)的抑制率为94±4%(同氯喹二磷酸盐)；小鼠腹腔注射50mg/kg时，对痕原虫(P. berghei和P. vinckei)有明显预防作用。酒饼簕碱还具有抗癌作用，能抑制鼠白血病细胞L1210的生长，ED5tl为1.0iig/ml。目前，国内尚未见酒饼簕碱的提取纯化方法方面的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种酒饼簕碱的分离纯化方法，该方法能够提取分离得到高含量的酒饼簕碱晶体，方法简单可行、晶型好。本发明的分离纯化技术方案如下
(1)单叶酒饼簕根用5-12倍90%乙醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取20-120min,提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物；
(2)乙醇提取物用pH2-3的酸水溶解，过滤；
(3)滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调PH9-11，用氯仿萃取；
(4)萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，得到酒饼簕碱产品。所述步骤(I)中超声频率为30-80KHZ。所述步骤(2)中酸水为盐酸水溶液。所述步骤(4)中制备液相的流动相为乙腈-0. 05%乙二胺水溶液，体积比为43 :57，紫外检测波长为347nm。本发明的有益效果是本发明采用连续逆流超声提取，低温提取且提取率高，显著减少了溶剂用量，同时连续化作业；采用制备型高效液相色谱法，分离效果好，上样量大，生产周期短。
具体实施例方式下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入12倍90%乙醇溶液，55°C下进行连续逆流超声提取20min，超声频率为80KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH2的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调PH11，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43 57的乙腈-0. 05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱576mg，含量95. 7%。
实施例2:
将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入5倍90%乙醇溶液，25°C下进行连续逆流超声提取120min，超声频率为30KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调PH9，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43 57的乙腈-0. 05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱543mg，含量97. 3%。实施例3:
将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍90%乙醇溶液，45°C下进行连续逆流超声提取80min，超声频率为50KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调PH10，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43 57的乙腈-0. 05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱572mg，含量95. 9%。实施例4:
将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入8倍90%乙醇溶液，40°C下进行连续逆流超声提取lOOmin，超声频率为40KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pHIO，用氯仿萃取，萃取液浓缩,注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43 57的乙腈-0. 05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm,收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱557mg，含量96. 3%。
权利要求
1.一种酒饼簕碱的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤 (1)单叶酒饼簕根用5-12倍90%乙醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取.20-120min,提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物； (2)乙醇提取物用pH2-3的酸水溶解，过滤； (3)滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调PH9-11，用氯仿萃取； (4)萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，得到酒饼簕碱产品。
2.根据权利要求I所述的一种酒饼簕碱的分离纯化方法，其特征在于所述步骤(I)中超声频率为30-80KHz。
3.根据权利要求I所述的一种酒饼簕碱的分离纯化方法，其特征在于所述步骤(2)中酸水为盐酸水溶液。
4.根据权利要求I所述的一种酒饼簕碱的分离纯化方法，其特征在于所述步骤(4)中制备液相的流动相为乙腈-O. 05%乙二胺水溶液，体积比为43 :57，紫外检测波长为347nm。
全文摘要
本发明涉及植物有效成分提取技术领域，具体涉及一种酒饼簕碱的分离纯化方法。本发明的技术方案包括以下步骤(1)单叶酒饼簕根用90%乙醇溶液进行连续逆流超声提取，得到乙醇提取物；(2)乙醇提取物用pH2-3的酸水溶解，过滤；(3)滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH9-11，用有机溶剂萃取；(4)萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，得到酒饼簕碱产品。本发明可从原料中提取分离出纯度达95%以上的产品，实现酒饼簕碱的有效分离。
文档编号C07D491/052GK102627651SQ201210119269
公开日2012年8月8日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司