专利名称：生产鸡白细胞干扰素用预处理剂及生产方法
技术领域：
本发明属于兽药生产领域。尤其涉及一种可显著提高鸡白细胞干扰素产量的生产鸡白细胞干扰素用预处理剂及生产方法。
背景技术：
干扰素为一类细胞因子,具有抗病毒和免疫调节作用，已广泛应用于抗病毒治疗和提高机体免疫力。人或动物的白细胞在病毒或诱导剂的作用下，可产生干扰素，但所产生干扰素的种类或产量随不同病毒或诱导剂而发生变化。例如用PHA诱导T淋巴细胞，则主要产生Y干扰素(IFN — Y)，而以短小棒状杆菌诱导T淋巴细胞，则主要产生α-干扰素。
F系新城疫病毒诱导干扰素的能力较强，所产生的干扰素99%为α-干扰素(IFN — α)，但是其产量并不理想。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可显著提高鸡白细胞干扰素产量的生产鸡白细胞干扰素用预处理剂及生产方法。本发明的技术解决方案是一种生产鸡白细胞干扰素用预处理剂，其特征在于由猪白细胞干扰素、左旋咪唑、有机锗及去离子水构成，各组分的含量为猪白细胞干扰素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有机锗I 2mg/ml。一种上述生产鸡白细胞干扰素用预处理剂的生产方法，其特征在于按如下步骤进行
a.用5 IOml去离子水溶解100^200mg左旋咪唑，作为A液；
b.用5 IOml去离子水溶解100^200 mg有机锗，作为B液；
c.用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素300(T30000IU，作为C液；
d.将A液与B液混合，加入ImlC液，作为D液；
e.将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤，即为生产白细胞干扰素用预处理剂。本发明对白细胞进行预处理，可显著增加干扰素产量，较单独使用新城疫病毒诱导干扰素的产量增加10 100倍，-20°c冷冻保存，可保存12个月。
具体实施例方式实施例I :
按如下步骤进行
a.用5ml去离子水溶解IOOmg左旋咪唑，作为A液；
b.用5ml去离子水溶解IOOmg有机锗(Ge-123)(羧乙基锗倍半氧化物)，作为B液；
c.用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素3000IU，作为C液；
d.将A液与B液混合，加入ImlC液，作为D液；
e.将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤，即为生产白细胞干扰素用预处理剂，各组分的含量为猪白细胞干扰素10IU/ml、左旋咪唑lmg/ml及有机锗lmg/ml，_20°C冷冻保存。所用原料来源如下
左旋咪唑购自山东济南百纳兽药有限公司；
有机锗(Ge-123)(羧乙基锗倍半氧化物)购自阿拉丁试剂(上海)有限公司；
冻干猪白细胞干扰素购自四川世红生物技术有限公司。实验
先取Iml本发明实施例1，加入100mlRPMI-1640完全培养基中(含IO6 IO7鸡白细胞中/ml)，37°C摇动培养12小时；再按100 200血凝单位/ml加入F系新城疫病毒，继续培养24小时；收获培养液，4000转/分钟，离心10分钟，取上清，即为鸡白细胞干扰素粗 制液。用细胞病变抑制方法检测，其中含有IO4a-干扰素(IFN — α)，比单独使用新城疫病毒诱导干扰素的产量增加10倍。实施例2
按如下步骤进行
a.用8ml去离子水溶解150mg左旋咪唑，作为A液；
b.用8ml去离子水溶解150mg有机锗，作为B液；
c.用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素12000IU，作为C液；
d.将A液与B液混合，加入ImlC液，作为D液；
e.将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤，即为生产白细胞干扰素用预处理剂，各组分的含量为猪白细胞干扰素40U/ml、左旋咪唑I. 5mg/ml及有机锗I. 5mg/ml，_20°C冷冻保存。
原料来源同实施例I。实验
先取Iml本发明实施例2，加入100mlRPMI-1640完全培养基中(含IO6 IO7鸡白细胞中/ml)，37°C摇动培养12小时；再按100 200血凝单位/ml加入F系新城疫病毒，继续培养24小时；收获培养液，4000转/分钟，离心10分钟，取上清，即为鸡白细胞干扰素粗制液。用细胞病变抑制方法检测，其中含有8*104α-干扰素(IFN — α )，比单独使用新城疫病毒诱导干扰素的产量增加80倍。实施例3:
按如下步骤进行
a.用IOml去离子水溶解200mg左旋咪唑，作为A液；
b.用IOml去离子水溶解200mg有机锗，作为B液；
c.用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素30000IU，作为C液；
d.将A液与B液混合，加入ImlC液，作为D液；
e.将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤，即为生产白细胞干扰素用预处理剂，各组分的含量为猪白细胞干扰素100U/ml、左旋咪唑2mg/ml及有机锗2mg/ml，_20°C冷冻保存。原料来源同实施例I。实验
先取Iml本发明实施例3，加入100mlRPMI-1640完全培养基中(含IO6 IO7鸡白细胞中/ml)，37°C摇动培养12小时；再按100 200血凝单位/ml加入F系新城疫病毒，继续培养24小时；收获培养液，4000转/分钟，离心10分钟，取上清，即为鸡白细胞干扰素粗制液。用细胞病变抑制方法检测，其中含有IO5a-干扰素(IFN — α)，比单独使用新城疫 病毒诱导干扰素的产量增加100倍。
权利要求
1.一种生产鸡白细胞干扰素用预处理剂，其特征在于由猪白细胞干扰素、左旋咪唑、有机锗及去离子水构成，各组分的含量为猪白细胞干扰素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有机锗I 2mg/ml。
2.一种如权利要求I所述生产鸡白细胞干扰素用预处理剂的生产方法，其特征在于按如下步骤进行 a.用5 IOml去离子水溶解100^200mg左旋咪唑，作为A液； b.用5 IOml去离子水溶解100^200 mg有机锗，作为B液； c.用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素300(T30000IU，作为C液； d.将A液与B液混合，加入ImlC液，作为D液； e.将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤，即为生产白细胞干扰素用预处理剂。
全文摘要
本发明公开一种生产鸡白细胞干扰素用预处理剂，各组分的含量为猪白细胞干扰素10～100IU/ml、左旋咪唑1～2mg/ml及有机锗1～2mg/ml，生产方法是按如下步骤进行用5～10ml去离子水溶解100~200mg左旋咪唑，作为A液；用5～10ml去离子水溶解100~200mg有机锗，作为B液；用3ml去离子水溶解冻干猪白细胞干扰素3000~30000IU，作为C液；将A液与B液混合，加入1mlC液，作为D液；将D液定容至100ml，用除菌滤器过滤。本发明对白细胞进行预处理，可显著增加干扰素产量，较单独使用新城疫病毒诱导干扰素的产量增加10～100倍，-20℃冷冻保存，可保存12个月。
文档编号C07K14/555GK102838670SQ201210360228
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月25日 优先权日2012年9月25日
发明者江国托, 常维山 申请人:大连三仪动物药品有限公司