一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法
【专利摘要】本发明一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法包括罗汉果提取-浓缩成浸膏-乙醚、乙酸乙酯混合液两相液液萃取-乙醇、乙酸乙酯混合液／磷酸氢二钾双水相液液萃取-高分子聚合物聚丙烯酰胺反萃-有机溶剂正丁醇两相液液萃取-浓缩-干燥等工序，其中包括两相液液萃取、双水相液液萃取。
【专利说明】一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物提取物【技术领域】，涉及一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法。
【背景技术】
[0002]罗汉果为广西特色药食两用经济作物，果实中含有罗汉果甜甙，其热量为零，具有清热润肺镇咳、润肠通便之功效，对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。罗汉果甜甙中罗汉果甜甙V的甜度为蔗糖的300倍，罗汉果甜甙作为食品是安全无毒的，罗汉果甜可不限量用于各类食品。罗汉果提取物不仅应用于医药行业上，在食品等领域都有广泛的应用。现有的罗汉果甜甙的制备主要通过柱层析或膜过滤等方法得到，其生产周期长，成本较高，对环境的影响大。本发明涉及一个简单、效率高、得率高而且纯度高的双水相方法制备罗汉果甜甙，适宜工业化生产。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是公开一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法。
[0004]本发明的技术方案是:一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，以鲜罗汉果为原料，以乙醇和水混合液为溶剂制备罗汉果提取液，提取液浓缩得浸膏，浸膏溶于水，脂溶性有机溶剂两相萃取、加入有机溶剂混合液和盐形成双水相系统，通过双水相系统萃取纯化、水溶性高分子聚合物选择性的萃取分离、选择罗汉果甜甙亲和性好的有机溶剂富集罗汉果甜甙，完成从浸膏中分离分离纯化罗汉果总甜甙。
[0005]本发明一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法包括罗汉果提取-浓缩成浸膏-乙醚、乙酸乙酯混合液两相液液萃取-乙醇、乙酸乙酯混合液/磷酸氢二钾双水相液液萃取-高分子聚合物聚丙烯酰胺反萃-有机溶剂正丁醇两相液液萃取-浓缩-干燥等工序，其中包括两相液液萃取、双水相液液萃取。具体操作步骤如下:
[0006]1.水提:将罗汉果粉碎加入提取设备中，按原料与水重量比1:6的比例加入水，在90-100°C条件下提取三次，每次1-2小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏。
[0007]2.将步骤I得到的浸膏溶于水，加入同体积的乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3-4次，得到萃取后富集罗汉果甜甙的水溶液。
[0008]3.将步骤2所得罗汉果甜甙水溶液，加入水溶液重量10%磷酸氢二钾固体，加入同体积乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1 的混合液，萃取3-4次，合并萃取液，水溶液中的罗汉果甜甙富集到乙醇、乙酸乙酯混合液。
[0009]4.将步骤3所得乙醇、乙酸乙酯混合液与同体积的质量百分数为1% -1.5%的聚丙烯酰胺水溶液反萃取一次，乙醇、乙酸乙酯混合液减压蒸干，即得粗品罗汉果甜甙。
[0010]5.将步骤4所得粗品罗汉果甜甙溶于水，按水溶液:正丁醇体积比2:1加入正丁醇，萃取5-6次，收集正丁醇液减压蒸干，即得罗汉果总甜甙，纯度达到95%以上，罗汉果甜甙V，纯度达到65%以上。
[0011]以上步骤2中，加入同体积的乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3次。[0012]以上步骤4中，聚丙烯酰胺水溶液中聚丙烯酰胺质量百分数为I %。
[0013]以上步骤5中，水溶液:正丁醇体积比2:1，萃取6次。
[0014]本发明的特点为:
[0015]本发明的高纯度罗汉果甜甙的制备方法，利用乙醚和乙酸乙酯混合液进行两相萃取除去脂溶性物质；利用乙醇、乙酸乙酯混合液/磷酸氢二钾构成双水相萃取体系；利用具有选择性萃取的高分子聚合物聚丙烯酰胺反萃富集罗汉果甜甙；选择罗汉果甜甙亲和性好的有机溶剂正丁醇富集罗汉果甜甙，经过多次萃取和反萃取后得到重量含量95%以上高纯度罗汉果甜甙。该方法具有处理量大，工艺流程短，可进行连续操作、分离效率高的优点，而且为均相体系，易于连续生产操作。
具体实施方案
[0016]实施例一:
[0017]称取罗汉果鲜果500g，破碎，加入提取设备中，加入3000g反渗透水，在100°C条件下反复提取三次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏。浸膏溶于反渗透水中配成500ml水溶液，加入500ml乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3次，合并萃取液回收，萃取过后的水溶液中加入水溶液重量50g磷酸氢二钾，再加入500ml乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1的混合液，震荡，静置，形成双水相，得到上相为乙醇、乙酸乙酯混合萃取液，混合萃取液与500ml的质量百分数为I %的聚丙烯酰胺水溶液反萃取一次，乙醇、乙酸乙酯混合液减压蒸干，即得黄色粗品罗汉果甜甙，将所得粗品罗汉果甜甙溶于水，溶按水溶液:正丁醇体积比2:1加入正丁醇，萃取6次，收集正丁醇液减压蒸干，即得罗汉果总甜甙，用紫外分光光度法测定，罗汉果总甜甙重量含量为96%，用高效液相色谱法测定，罗汉果甜甙V重量含量为68%。
[0018]实施例二:
[0019]称取罗汉果鲜果500g，破碎，加入提取设备中，加入3000g反渗透水，在100°C条件下反复提取三次，每次I小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏。浸膏溶于反渗透水中配成500ml水溶液，加入500ml乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取4次，合并萃取液回收，萃取过后的水溶液中加入水溶液重量50g磷酸氢二钾，再加入500ml乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1的混合液，震荡，静置，形成双水相，得到上相为乙醇、乙酸乙酯混合萃取液，混合萃取液与500ml的质量百分数为1.5%的聚丙烯酰胺水溶液反萃取一次，乙醇、乙酸乙酯混合液减压蒸干，即得黄色粗品罗汉果甜甙，将所得粗品罗汉果甜甙溶于水，溶按水溶液:正丁醇体积比2:1加入正丁醇，萃取5次，收集正丁醇液减压蒸干，即得罗汉果总甜甙，用紫外分光光度法测定，罗汉果总甜甙重量含量为95%，用高效液相色谱法测定，罗汉果甜甙V重量含量为65%。
[0020]实施例三:
[0021]称取罗汉果鲜果500g，破碎，加入提取设备中，加入3000g反渗透水，在100°C条件下反复提取三次，每次I小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏。浸膏溶于反渗透水中配成500ml水溶液，加入500ml乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3次，合并萃取液回收，萃取过后的水溶液中加入水溶液重量50g磷酸氢二钾，再加入500ml乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1的混合液，震荡，静置，形成双水相，得到上相为乙醇、乙酸乙酯混合萃取液，混合萃取液与500ml的质量百分数为1.5%的聚丙烯酰胺水溶液反萃取一次，乙醇、乙酸乙酯混合液减压蒸干，即得黄色粗品罗汉果甜甙，将所得粗品罗汉果甜甙溶于水，溶按水溶液:正丁醇体积比2:1加入正丁醇，萃取5次，收集正丁醇液减压蒸干，即得罗汉果总甜甙，用紫外分光光度法测定，罗汉果总甜甙重量含量为96%，用高效液相色谱法测定，罗汉果甜甙V重量含量为66%。`
【权利要求】
1.一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，其特征在于:生产工序包括罗汉果水提-浓缩成浸膏-乙醚、乙酸乙酯混合液两相液液萃取-乙醇、乙酸乙酯混合液/磷酸氢二钾双水相液液萃取-高分子聚合物聚丙烯酰胺反萃-有机溶剂正丁醇两相液液萃取-浓缩-干燥，其工艺操作过程为: 1)水提:将罗汉果粉碎加入提取设备中，按原料与水重量比1:6的比例加入水，在90-100°C条件能够下提取三次，每次1-2小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏。 2)将步骤1)得到的浸膏溶于水，加入同体积的乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3-4次，得到萃取后富集罗汉果甜甙的水溶液。 3)将步骤2)所得罗汉果甜甙水溶液，加入水溶液重量10%磷酸氢二钾固体，加入同体积乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1的混合液，萃取3-4次，合并萃取液，水溶液中的罗汉果甜甙富集到乙醇、乙酸乙酯混合液。 4)将步骤3)所得乙醇、乙酸乙酯混合液与同体积的质量百分数为1%-1.5%的聚丙烯酰胺水溶液反萃取一次，乙醇、乙酸乙酯混合液减压蒸干，即得粗品罗汉果甜甙。 5)将步骤4)所得粗品罗汉果甜甙溶于水，按水溶液:正丁醇体积比2:1加入正丁醇，萃取5-6次，收集正丁醇液减压蒸干，即得罗汉果总甜甙，纯度达到95 %以上，罗汉果甜甙V，纯度达到65%以上。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，其特征在于:步骤2)乙醚:乙酸乙酯混合液体积比为7:3，萃取3次。
3.根据权利要求1所述的一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，其特征在于:步骤3)乙醇:乙酸乙酯体积比为9:1的混合液，萃取3次。
4.根据权利要求1所述的一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，其特征在于:步骤4)聚丙烯酰胺水溶液中聚丙烯酰胺质量百分数为1 %，反萃I次。
5.根据权利要求1所述的一种高纯度罗汉果甜甙的制备方法，其特征在于:步骤5)水溶液:正丁醇体积比2:1，萃取6次。
【文档编号】C07J17/00GK103570789SQ201310563800
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2013年11月14日 优先权日:2013年11月14日
【发明者】罗亚东 申请人:南宁麦斯威生物科技有限公司