一种巨大戟醇单体的分离纯化方法
【专利摘要】本发明涉及一种巨大戟醇单体的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化【技术领域】。本发明是以大戟科大戟属传统中药千金子为原料，通过乙醇溶液提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析、甲醇溶解过滤、高效制备液相色谱分离、产品回收得到巨大戟醇单体产品。本发明通过最适宜的工艺及参数条件，使产品中巨大戟醇的含量达到98%以上；整个工艺过程稳定、操作简便、分离效率高，成本低廉，可高纯度分离制备巨大戟醇单体。
【专利说明】一种巨大戟醇单体的分离纯化方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物化合物单体的制备方法，尤其是从千金子中提取巨大戟醇单体的分离纯化方法，属于中药分离纯化【技术领域】。
【背景技术】
[0002]千金子为大戟科植物续随子EuphorbialathyrisL.的种子。又名千两金、菩萨豆(《日华子》)，续随子(《开宝本草》)，拒冬实(《本草图经》)，联步(《斗门方》)，拒冬子(《本草汇言》)，滩板救(《湖南药物志》)，看园老(《贵州草药》)，百药解、干金药解(《云南药用植物志》)，小巴豆(《山西中草药》)。原植物续随子又名:拒冬(《开宝本草》)，半枝莲(《纲目拾遗》)，降龙草(《陕西中药名录》)。具有逐水退肿，破血消症，解毒杀虫的功效。
[0003]
【权利要求】
1.一种巨大戟醇单体的分离纯化方法，其特征在于:以大戟科植物续随子的种子为原料，通过提取、萃取、硅胶柱层析、溶解过滤、高效制备液相色谱分离、产品回收得到巨大戟醇单体，具体包工艺步骤如下: 1)提取 将千金子药材粉碎成I~4mm的粗粉，按体积/质量加入6~10倍的乙醇溶液，提取3~4次，每次2~3小时，回收乙醇，合并过滤液，待下一步处理； 所述乙醇溶液的体积百分比浓度为80~95% ； 2)萃取 将步骤I)所得的过滤液，加入等体积的乙酸乙酯萃取3~4次，分取上层溶液，浓缩至干，得浓缩液，进行下一步处理； 3)硅胶柱层析 将步骤2)所得的浓缩液加入10倍重量的硅胶拌样，50°C干燥拌样硅胶，石油醚:乙酸乙酯=1:1的体积比洗脱产品，柱层析产品液50°C浓缩至干，得固体物，待下一步处理； 4)溶解过滤 按照固体物质量:溶剂体积=Ig:20~40ml，将步骤3)所得的固体物加甲醇溶解，过滤溶解液，过滤液即是制 备巨大戟醇单体的原料；
5)HPLC制备 色谱条件如下: 色谱柱填料为=C18填料； 流动相为:乙腈-水V/V=32:68 ； 取步骤4)所得的过滤液进样，进样量以过滤液所含的干品重量计为0.5~1.0g/针，在线紫外监测，检测波长为210nm，针对性收集目标化合物制备溶液，得巨大戟醇单体的HPLC制备液； 6)产品回收 将步骤5)所得的HPLC制备液，回收乙腈，剩余水溶液用等体积的乙酸乙酯萃取2次，45~65°C浓缩至干即得巨大戟醇单体产品。
2.根据权利要求1所述的一种巨大戟醇单体的分离纯化方法，其特征在于:在步骤5)进行高效液相色谱法HPLC制备前，通过液-质联用方法确定高效液相色谱中巨大戟醇单体的峰形，即取步骤4)所得过滤液进样，进行巨大戟醇单体的制备分离，根据质谱检测结果，确定巨大戟醇单体在液相色谱中对应的峰形。
3.根据权利要求2所述的一种巨大戟醇单体的分离纯化方法，其特征在于:所述液-质联用方法的色谱条件如下: 色谱柱填料为=C18填料； 流动相为:乙腈-水V/V=32:68。
4.根据权利要求1所述的一种巨大戟醇单体的分离纯化方法，其特征在于:利用反相分析型液相色谱RP-HPLC复检步骤6)所得产品纯度，其色谱条件如下:填料为C18，流动相为乙腈-水V/V=34:66，柱温为30°C，流速为1.0ml/min，检测波长为210 nm。
【文档编号】C07C49/727GK103694096SQ201310715149
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月23日 优先权日:2013年12月23日
【发明者】陈冲, 文焕松, 夏柯, 刘丁 申请人:成都普思生物科技有限公司