巨大戟二萜醇-3-酰化物iii和巨大戟二萜醇-3-氨基甲酸酯的制作方法
【专利说明】巨大戟二萜醇-3-酰化物I I I和巨大戟二萜醇-3-氨基甲 酸酯
[0001] 本申请为2011年12月22日提交的申请号为PCT/DK2011/000154、发明名称为"巨 大戟二萜醇-3-酰化物III和巨大戟二萜醇-3-氨基甲酸酯"的国际申请的分案申请，该国 际申请于2013年8月21日进入中国国家阶段，申请号为201180068162. 3。 发明领域
[0002] 本发明涉及新的3-0-酰基-巨大戟二萜醇和3-0-氨基甲酰基-巨大戟二萜醇的 衍生物及其衍生物以及它们用作药物和在治疗中的用途。本发明还提供了包含所述化合物 的药物组合物以及用所述化合物治疗疾病的方法。
[0003] 发明背景
[0004] 巨大戟二萜醇-3-当归酸酯（PEP005,巨大戟二萜醇甲基丁烯酸酯）是分离自各 种大戟属物种、特别是南欧大戟（Euphorbia peplus)的巨大戟二猫醇家族的二猫醋。该化 合物目前正在进行临床开发，用于治疗光化性角化病和非黑色素瘤皮肤癌。
[0005] W099/08994描述了从大戟属植物分离化合物以及这些化合物在癌症和其它肿瘤 疾病及光化性角化病或日光性角化病中的应用。
[0006] 已从各种大戟属物种中分离出了巨大戟二萜醇-3-酰化物，主要是长链 的饱和和不饱和脂族脂肪酸[H. Gotta, Z. Naturforschung, (1984)，39b, 683-94 ; K. Abo, Fitoterapia, (1988) , 244-46, S. Zayed, J. Cancer Res. Clin. Oncol. (2001)，127,40-47]。此外，通过半合成制备了少数几种巨大戟二萜醇-3-酰化物 (B. Sorg 等，Z. Naturforsch.，（1982)，37b, 748-56)。已经对这些巨大戟二萜醇衍生物 中的一些进行了描述，并且经测试为强烈的刺激剂和强烈的肿瘤促进剂[B. Sorg等，Z. Naturforsch.，（1982)，37b，748-56 ;B. Sorg 等，Carcinogenesis, (1987)，8, 1-4] 〇
[0007] 除了脂族巨大戟二萜醇脂之外，巨大戟二萜醇的芳族脂也是已知的。已描述了铁 海棠碱（Milliamine) C(巨大戟二猫醇-3-邻氨基苯甲酸醋衍生物）（Marston, A. Planta Medica, (1983) ,47, 141-47)。还描述了巨大戟二猫醇 _3_ 苯甲酸醋（Sorg, B. ;Z Naturfor schung, (1982)，37b, 748-56)。
[0008] 杂芳族或杂环3-0-酰基巨大戟二萜醇衍生物以前尚未公开。
[0009] 巨大戟二萜醇-3-氨基甲酸酯以前尚未公开。在US5955501、US5891906、 US5891870和W09202484中提到了不同取代的巨大戟二萜醇氨基甲酸酯。
[0010] 当归酸和当归酸酯（存在于巨大戟二萜醇-3-当归酸酯中）很容易发生 双键的异构化而形成惕各酸醋，特别是在碱性pH下[Beeby, P. , Tetrahedron Lett. (1977), 38, 3379-3382, Hoskins, ff. Μ. , J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, (1977), 538-544, Boh lmann, F.等，Chem. Ber. (1970)，103, 561-563]。
[0011] 此外，已知巨大戟二萜醇-3-酰化物是不稳定的，因为它们会重排生成巨大戟二 猫醇-5-酰化物和巨大戟二猫醇-20-酰化物[Sorg, 等，Z. NaturforscL，（1982)，3 7B,748-756]〇
[0012] 巨大戟二萜醇-3-当归酸酯被认为具有双重作用模式：1)通过直接的细胞毒 性或诱导细胞凋亡来诱导细胞死亡，和2)以中性粒细胞的募集和活化为主导的免疫刺 激作用（R〇sen，R.H·，等，J Am Acad Derm(2011),电子出版Nov 2011;Ersvaer，E·， 等，Toxins，（2010)，2, 174-194)。纳摩尔浓度的活性剂引起蛋白激酶C(PKC)的经典的 和新同工型的活化和调节，特别重要的是PKCS。通过活化PKCS，该活性剂诱导易感 细胞的凋亡（Hampson, P.，等，Blood, (2005)，106, 1362-1368 ;Cozzi, S. J.，等，Cancer Res，（2006)，66, 10083-10091)。在高的微摩尔浓度下，观察到对癌细胞的快速细胞毒 性作用（Ogbourne, S. M.，等，Cancer Res (2004)，64, 2833-2839)。通过活化各种 PKC 同工型，该活性剂还诱导促炎效应，包括促炎介质的释放（Challacombe, J. M.，等，J Tmmunol (2006)，177, 8123-8132)、血管内皮的活化（Hampson, P.，等，Cancer Tmmunol Immunother，（2008),57, 1241-1251);通过诱导角质形成细胞中的白介素8产生中性粒 细胞的趋化作用以及通过佐剂特性在动物模型中产生⑶8+细胞的特异性抗癌免疫应答 (Le，T. T.，等，Vacccine, (2009)，27, 3053-3062) 〇
[0013] 通过直接的细胞毒性或诱导细胞凋亡来诱导细胞死亡和通过涉及中性粒细胞的 募集和活化的免疫刺激作用而发挥双重作用模式的化合物可用于治疗与增生或肿瘤有关 的状况。通过原发性和/或继发性坏死诱导细胞死亡的化合物和表现出促凋亡作用的化合 物可减少不需要的细胞生长并除去不需要的细胞，此外，先天免疫反应的刺激和佐剂效应 可增加对异常或转化细胞的生物学反应。
[0014] 通过原发性和/或继发性坏死诱导细胞死亡的化合物可用于治疗美容状况，因为 这些化合物可杀死或除去不需要的组织或细胞。
[0015] 需要发现可通过细胞毒性或凋亡诱导细胞死亡和/或诱导免疫刺激作用的新的 巨大戟二萜醇衍生物。
[0016] 本发明提供了杂环3-0-酰基巨大戟二萜醇衍生物和3-0-氨基甲酰基巨大戟二萜 醇衍生物，其可用于治疗与巨大戟二萜醇-3-当归酸酯的使用有关的状况，或用于治疗受 通过细胞毒性或诱导细胞凋亡而诱导细胞死亡的影响和/或受免疫刺激作用影响的状况。
[0017] 本发明化合物可刺激中性粒细胞的氧化爆发，它是先天免疫反应的一部分。
[0018] 本发明化合物可刺激角质形成细胞IL-8的释放，由此诱导免疫刺激作用。
[0019] 某些本发明化合物可诱导快速坏死。
[0020] 某些本发明化合物在B16小鼠黑色素瘤模型中表现出活性，这表示该化合物具有 抗肿瘤活性并且能杀死肿瘤和转化的细胞。
[0021] 某些本发明化合物表现出良好的稳定性。
[0022] 发明概述
[0023] 在一个实施方案中，本发明提供了通式I化合物及其可药用盐、前药、水合物和溶 剂化物：
[0024]
【主权项】
1.通式I化合物及其可药用盐 其中：
R 是- NR11R12 ; 其中Rll和Rl2独立地代表氢， 或者 其中Rll和R12独立地代表（C「C6)烷基、（C2-C6)链烯基或（C 2-C6)炔基、（C3-C8)环 烷基、（C3-C8)环烯基、芳基、杂芳基、杂环烷基、杂环烯基、（C3-C 8)环烷基-(C1-C4)烷基、 (C3-C 8)环烯基_(C「C4)烷基、芳基_(C「C4)烷基、杂芳基_(C「C 4)烷基、杂环烷基_(C「C4) 烷基、杂环烯基-(C1-C 4)烷基、（C1-C4)烷基-(C3-C8)环烷基、（C 1-C4)烷基-(C3-C8)环烯基、 (C 1-C4)烷基-芳基、（C1-C4)烷基-杂芳基或（C 1-C4)烷基-杂环烷基，其中芳基代表苯基、 二氢化茚基或四氢化萘基，杂芳基代表异P恶1唑基、吡唑基、吡啶基或噻唑基并且杂环烷基 代表哌啶基或四氢吡喃基，其中所述的（C 1-C6)烷基、（C2-C6)链烯基或（C2-C 6)炔基、（C3-C8) 环烷基、（C3-C 8)环烯基、芳基、杂芳基、杂环烷基、杂环烯基、（C3-C8)环烷基-(C 1-C4)烷基、 (C3-C8)环烯基-(c「c 4)烷基、芳基-(c「c4)烷基、杂芳基-(c「c4)烷基、杂环烷基-(c「c 4) 烷基、杂环烯基-(C1-C4)烷基、（C1-C 4)烷基-(C3-C8)环烷基、（C1-C4)烷基-(C 3-C8)环烯基、 (C1-C4)烷基芳基、（C 1-C4)烷基杂芳基或（C1-C4)烷基杂环烷基任选地被一个或多个独立地 选自R13的取代基所取代； Rl3代表卤素、氰基或羟基， 或者R13代表（C1-C4)烷基、（C2