专利名称：14α，15α-亚甲基雌二醇类化合物的口服有效的雌激素酯的制作方法
技术领域：
本发明涉及14α，15α-亚甲基雌二醇-酯，尤其在口服应用时，与乙炔基雌二醇或天然雌激素相比，该酯具有可确切定义的雌激素作用。
雌激素是包含在大多数性功能和许多新陈代谢功能调节过程中的激素物质。雌激素可由特定的前体在人体不同的器官和组织中合成。
成年妇女血液中循环的绝大部分雌激素来自卵巢。如果这种分泌停止，例如由于用药物抑制新卵泡的生成，或由于卵泡成熟的自发性中止，那么就会面临欠缺状态，这在部分情况下可引起疾病。
这涉及到状态紊乱、各种循环功能紊乱、由于动脉硬化症发展而致的血脂水平(Spiegel)的不利改变和骨骼的分解代谢过程乃至明显的骨质疏松症。
卵巢的激素生产结束时月经周期停止。如果由于采用激素制品防止受孕而抑制了排卵，则激素避孕药本身含有的雌激素就罅了雌激素缺乏现象的出现。
在出现更年期的雌激素缺乏现象时，通常采用天然雌激素来治疗这种紊乱。
该药物可以单独间歇使用，也可以与孕激素相结合使用以抑制子宫中增生过程。
雌激素对特定的性功能和代谢功能有很宽的作用范围。与以各种激素疗法形式使用雌激素有关的不利的作用范围也相当宽。与疾病对应的紊乱是各种各样的。在治疗的初始阶段常常会观察到出现恶心，在治疗过程中这种痛苦会消失。严重的紊乱可由各种代谢作用引起。使用雌激素会改变调节凝血的因素。相应的改变可能与各种其它因素(例如个体性情、手术、多梦、抽烟)一起共同作用，促进血栓栓塞过程。这种血栓事件可能导致严重的后果，例如心肌梗塞或中风发作。
所举实例表明，雌激素对于治疗雌激素缺乏状态是很有效的，绝大多数替代治疗的效果是毫无问题的。另一方面，激素避孕的已知副作用表明，治疗时引入的雌激素也可能引起危险。
所有观察到的副作用的原因在于在引入专业文献中已知的雌激素的情况下，难于看出在超过精确测定的生物活性物质含量时在生物体中将要达到的确定的最终效果。
例如，按照Goldzieher等人的观点(American Journal of Ostetrics and Gynecology，Vol.160/5，1260-64页，1989)，口服一定剂量的乙炔基雌二醇后，即使对试验的女性健康受检志愿者已严格统一了服药条件，各人也会出现不同的生物活性物质水平。
由确定随个体改变的血液中乙炔基雌二醇浓度(在其它药物动力学研究中也出现这种浓度)可能引出某些技术难题，减少这种难题正是本发明的主题。
为了达到血液中特定的乙炔基雌二醇水平，必须用不同剂量的这种雌激素对妇女进行治疗。但这在实际上是不可能的。合理的假定是，在激素避孕药中存在的剂量只对服用该药剂的特定一部分妇女是最佳的。对于大多数用药者来说，规定的剂量不是太高就是太低了。
用避孕药时经常看到的穿破性子宫出血和经间期出血证明了这样一种观点，即用药的相关妇女服用的雌激素剂量太低了。而另一方面，雌激素带来的副作用如恶心、胸闷和滞液则倾向于另一种假定，即在这些情况下达到的雌激素浓度超过了最佳水平。上述概况似乎是合理的，因为乙炔基雌二醇或其前药(Frodrug)激素避孕剂是唯一的雌激素，它们至今包含在合成的口服避孕药中。
对于在更年期替代疗法中所用的物质，由于其总体的口服生物有效性低而可变，同样存在难于精确地确定正确的治疗用剂量的困难。
本发明的任务在于，开发新的具有精确确定的雌激素效力的活性物质。
本发明的另一个任务在于，开发新的活性物质的口服给药的药品。
该任务可由以下技术方案完成，即制备14α，15α-亚甲基雌二醇-酯，其中17-羟基和/或3-羟基被酯化。
本发明的优选方案是下列的化合物通式Ⅰ的14α，15α-亚甲基雌二醇-酯， 其中R为-COR1，其中R1为烷基、环烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基，
或者R为-SO2R2，其中R2为烷基、环烷基、芳基、二烷基氨基或亚甲基亚氨基，以及R′为氢原子或-COR1，其中R1为烷基、环烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基。
本发明酯的制备可按下列方式进行1).使式Ⅱ所示的14α，15α-亚甲基-雌二醇 与烷烃-、环烷烃-、芳烃-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一种活性衍生物进行反应;
2).使通式Ⅰ所示的14α，15α-亚甲基-雌二醇的酯与烷基-、环烷基-、芳基-、二烷基氨基或亚甲基亚氨基磺酸的一种活性衍生物反应，其中式Ⅰ中R为氢原子和R′为-COR1，其中R1具有上述含义;
3).使通式Ⅲ所示的14α，15α-亚甲基-雌酮类的酯
式中R为-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有上述含义;
用一种还原剂转化成其中17-羟基和/或3-羟基被酯化的14α，15α-亚甲基-雌二醇类的酯，其中R为-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有上述含义，R′为氢原子;
并在必要时与烷烃-、环烷烃-、芳烃-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一种活性衍生物进行反应;和4).酯化反应是借助于相转移催化作用进行的。
14α，15α-亚甲基雌二醇-酯在用作口服避孕药和抗更年期症药品时具有特殊的优点。
例如，本发明的活性物质组合物优选以适于口服的盖伦氏制剂的剂型使用。作为口服的剂型，可以考虑例如片剂、糖衣药丸、丸剂或胶囊剂。可以本身已知的方式制备这些剂型，例如用“Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook，Hack Pub.Co.，N.Y.，USA”中所述的方法。
由于开发了14α，15α-亚甲基雌二醇-酯，本发明主要产生了以一优点-造成的穿破性出血和经间期出血及或轻或重的健康故障均低于含乙炔基雌二醇的传统避孕药，前提条件是有可能精确地确定正确的剂量;
-由于在更年期替代治疗中可以精确地调节替代剂量，因而具有比在替代疗法中广泛应用的雌二醇更好确定的雌激素作用;
-有助于决定性地改进雌激素疗法;
-与迄今为止不太可能调节在血液中确定的药物水平相比，该药在应用中可以使更大范围的应用者满意。
借助于下列化合物证明本发明酯的优秀的雌激素作用17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯(代码J821)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环已烷羧酸酯(代码J883)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环戊烷羧酸酯(代码J884)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯(代码J885)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二环已烷羧酸酯(代码J886)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯(代码J893)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯(代码J918)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯(代码J921)
17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯(代码J922)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯(代码J923)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯(代码J925)17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基异丙烯氧基羧酸酯(代码J953)
图1至6均表示本发明化合物的剂量-作用曲线。
图1和2以乙炔基雌二醇(EE)和14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇(代码J824)为对比物，图3至6以乙炔基雌二醇、14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇和雌二醇(E2)作对比物。
通过测量一次口服药物后的子宫湿物质及药物的剂量-作用分析来测定雌激素作用。
图1至6表明，基本结构J824的酯化可强化口服雌激素作用。另外，J824的雌激素作用明显优于EE(图1和2)及EE和E2(图3至6)。
在图1、3和5中，用“对比(Kontr.)”所代表的矩形图，正象在图2、4和6中用OVX所代表的曲线图那样表示了未处理的、施行了阉割术(kastrierter)的鼠的剂量-作用曲线。
由于本发明化合物被解释成J824的药物前质，由其释放J824作为活性成分，所得到的与起始物质相比的优越性只能通过药物动力学影响程度的改变来解释。与起始物质和乙炔基雌二醇相比(图1至6)以及有时也与雌二醇(图3至6)相比，统计数字确切地证明了本发明化合物的优越性。尤其引人注意的是本发明化合物与乙炔基雌二醇相比(图2)以及与乙炔基雌二醇和雌二醇相比(图4和6)，具有更为陡峭的剂量-作用曲线。
乙炔基雌二醇平坦的剂量-作用曲线对应于在人体中药物动力学参数随个体变化这一已知现象。这说明在很宽的剂量范围内都存在反应和不反应的个体。
要求保护的14α，15α-亚甲基雌二醇类的酯类化合物在口服有效性方面都明显地优于乙炔基雌二醇和天然雌激素。
观察到的药理学行为表明，所述类型的酯在口服施用时比乙炔基雌二醇更容易确定生物利用度和雌激素有效性，同样，所述酯类具有口服雌激素疗法(避孕和更年期替代疗法)的优点。
下面用实施例进一步说明本发明。
实施例117β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯a)在搅拌下，向由2g(7.03mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml氯仿中所形成的悬浮液中先后加入2ml水、1.5ml(12.92mmol)苯甲酰氯和0.33ml(2.38mmol)三乙胺。
添加1ml90%的氢氧化钾溶液后，在20°至25℃下继续搅拌15分钟，此后处理沉积物。
为此将水相和有机相分开，再用5ml氯仿萃取。合并有机相，依次用稀盐酸、水、饱和碳酸氢钠水溶液和水洗至中性，此后在真空下浓缩至干。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化所得到的粗产物。用1∶1的甲苯和氯仿的混合液洗脱后并紧接着用丙酮重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯，熔点为180至183℃。20D+97°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)231(18765)，甲醇。
b)向由0.5g(1.28mmol)14α，15α-亚甲基-17-氧代-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯在80ml甲醇中形成的溶液中加入一种由0.154g(3.85mmol)硼氢化钠在1ml水中形成的溶液，在20°至25℃总共搅拌5小时。尔后用100ml水稀释反应沉积物，用醋酸酸化并用氯仿萃取数次。合并有机相，用水洗涤至中性，用硫酸钠干燥，然后在真空下浓缩至干。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化得到的粗产物，用7∶3环已烷/醋酸乙酯洗脱并用丙酮重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯，熔点为179至182℃。
实施例217β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环戊烷羧酸酯在搅拌条件下向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml氯仿中形成的悬浮液中先后掺入1ml水、1.6ml(13.16mmol)环戊烷羧酰氯、0.17ml(1.19mmol)三乙胺和1.7ml90%的氢氧化钾溶液。在20°至25℃继续搅拌沉积物，用薄层色谱法监视反应过程。起始原料完全反应后，在实施例1a的条件下处理。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脱并接着在甲醇中结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环戊烷羧酸酯，熔点为130至134℃;[α]20D+108°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(799);276(780)，甲醇。
实施例317β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环已烷羧酸酯a)将1.5g(5.27mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇悬浮于15ml氯仿中，在搅拌条件下先后向其中掺入1.5ml水、1.32ml(9.70mmol)环已烷羧酰氯、0.25ml(1.78mmol)三乙胺和0.75ml90%的氢氧化钾溶液。在20°至25℃下继续搅拌沉积物，并用薄层色谱法监视反应过程。完全反应后在实施例1a的条件下处理。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脱后，用甲醇重结晶得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环已烷羧酸酯。
熔点179至181℃;[α]25D+98°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(789);276(789)，甲醇。
b)向由0.8g(2.04mmol)14α，15α-亚甲基-17-氧代-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环已烷羧酸酯在100ml甲醇中形成的溶液中加入在1ml水中的0.246g(6.15mmol)硼氢化钠，并在20°至25℃共搅拌4小时。
然后用水稀释反应沉积物，用醋酸酸化，并用氯仿萃取。如实施例1b所述进一步处理和色谱分离后，用甲醇重结晶即得17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基环已烷羧酸酯，熔点为180至182℃。
实施例417β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯在搅拌条件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的悬浮液中先后掺入2ml水、0.084g(0.368mmol)氯化三乙基苄基铵(TEBAC)和0.67ml(5.75mmol)戊酰氯。添加1ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃下继续搅拌沉积物，并用薄层色谱法监视反应过程。原料完全反应后，在如实施例1a所述条件下处理。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脱并接着用丙酮/正已烷结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯，熔点为78至82℃。[α]25D+104°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)269(811);275(811)，甲醇。
实施例517β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯在搅拌条件下使1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇与50ml氯仿及4.86ml(35.2mmol)三乙胺混合。向得到的清液中先后加入0.214g(1.75mmol)4-(二甲基氨基)-吡啶和3.22ml(35.2mmol)二甲基氨基甲酰氯，接着在20至25℃搅拌三小时。反应时间过后用30ml水稀释该反应沉积物，分出有机相，先后用5%盐酸、水饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤至中性。接着在真空下浓缩至干。粗产物用甲醇重结晶，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯，熔点193至196℃;[α]20D+109°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)269(818);276(782)，甲醇。
实施例614α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二环已烷羧酸酯将1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇悬浮于10ml氯仿中，在搅拌条件下先后掺入2ml水、1.76ml(12.93mmol)环已烷羧酰氯、0.33ml(2.35mmol)三乙胺和1ml 90%的氢氧化钾溶液。在20至25℃继续搅拌沉积物4小时，并用薄层色谱法监视反应过程。反应完成后，在实施例1a条件下处理。
使得到的粗产物溶于甲醇/氯仿混合液中，浓缩至开始结晶。得到14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二环已烷羧酸酯，熔点为164至168℃;[α]25D+60°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)275(808)，甲醇。
实施例717β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基丙烷-2-磺酸酯在搅拌条件下，向由1.2g(4.22mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在6ml二氯甲烷中形成的悬浮液中先后掺入1.2ml水、0.95g(4.19mmol)TEBAC和0.7ml(6.23mmol)丙烷-2-磺酰氯。添加1.2ml 40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃继续搅拌沉积物，并用薄层色谱法监视反应过程。原料完全反应后，在如实施例1a的条件下处理。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物，用4∶6的醋酸乙酯/正已烷洗脱，随后用甲醇重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基丙烷-2-磺酸酯，熔点为74至79℃;[α]22D+99°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(705)，甲醇。
实施例817β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯将1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇悬浮在10ml二氯甲烷中，在搅拌下先后掺入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.67ml(7.03mmol)氯代蚁酸酯。添加1ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃再搅拌沉积物30分钟。此后原料就完全反应了。接着将水相与有机相分开，用二氯甲烷萃取两次，每次用5ml。合并有机相，用水洗涤至中性，经硫酸钠干燥，此后在真空下浓缩至干。所得粗产物用两酮/正已烷重结晶，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯，熔点99至100℃;[α]20D+111°(二噁烷;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(784);275(749)，乙醇。
实施例917β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml四氢呋喃中形成的溶液中先后加入0.7g(5.09mmol)无水碳酸钾、3.68g(16.86mmol)连二碳酸二叔丁基酯和0.8g(3.03mmol)18-冠醚-6，并在室温下搅拌2小时。此后滤出碳酸钾，用二氯甲烷稀释滤液，接着用水、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤有机相。此后干燥有机提取物并在真空下浓缩至干。
用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化所得粗产物，用7∶3的环已烷/醋酸乙酯洗脱，并接着用甲醇/水重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯，熔点为111至113℃。[α]22D+74°(吡啶;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(745)，275(745)，甲醇。
实施例1017β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯在搅拌条件下先后向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml二氯甲烷中形成的悬浮液中加入4ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.98g(7.17mmol)氯代蚁酸仲丁酯(在4.95ml甲苯中)。添加2ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃继续搅拌沉积物，并用薄层色谱法监视反应过程。原料完全反应后，从有机相中分离出水相，用二氯甲烷萃取。合并有机相，用水洗涤至中性，干燥并在40℃真空条件下浓缩至干。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物并用7∶3的环已烷/醋酸乙酯洗脱，随后用丙酮/正已烷重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯，熔点93至95℃;[α]20D+105°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(807)，275(769)，甲醇。
实施例1117β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯将1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇悬浮在10ml二氯甲烷中，在搅拌条件下向其中先后加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC、0.73ml(5.62mmol)氯代蚁酸异丁酯和1ml40%的氢氧化钠溶液。在20至25℃再搅拌1.5小时。尔后用水稀释反应沉积物，分离有机相，并用二氯甲烷萃取。合并有机相，用水洗涤至中性，干燥并在真空下浓缩。残留物用丙酮/正已烷重结晶，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯。熔点129至130℃;[α]20D+105°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(769)，275(769)，甲醇。
实施例1217β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯氧基羧酸酯在搅拌条件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的悬浮液中依次加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC、0.71ml(5.62mmol)氯代蚁酸苯酯。添加1ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃再搅拌2小时。此后用水稀释，分离有机相，并用二氯甲烷萃取。合并有机相，用水洗涤至中性，干燥并在真空下浓缩。
用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化粗产物并用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脱然后用丙酮/正已烷重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯氧基羧酸酯，熔点187至189℃;[α]20D+98°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)267(884)，275(731)，甲醇。
实施例1317β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯使2g(7.04mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇与100ml甲苯、1.1ml(10.09mmol)异氰酸苯基酯和0.292ml(2.1mmol)三乙胺混合，并在搅拌条件下于1小时内加热至内部温度为80℃。然后使反应溶液在真空下浓缩至干，用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化残余物。用3∶1的四氯化碳/丙酮洗脱并接着用丙酮/正已烷重结晶，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯，熔点209至212℃;[α]20D+70°(吡啶;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)237(26631)，甲醇。
实施例1417β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基异丙烯氧基羧酸酯在搅拌条件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的悬浮液中先后加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.758ml(7.02mmol)氯代蚁酸异丙烯酯。
添加1ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃再搅拌沉积物60分钟。此后用水稀释，分离有机相，并用二氯甲烷萃取。
合并有机相，用水洗涤至中性，干燥并在40℃真空下浓缩至干。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法纯化并用7∶3的环已烷/醋酸乙酯洗脱，随后用丙酮/正已烷重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基异丙烯氧基羧酸酯。熔点145至146℃;[α]20D+110°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(744)，275(755)，甲醇。
实施例1517β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基磺酸酯在搅拌条件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在30ml二氯甲烷中形成的悬浮液中先后加入3ml水、0.240g(1.05mmol)TEBAC和3.6ml(33.5mmol)N，N-二甲基氨基磺酰氯。添加6ml40%的氢氧化钠溶液后，在20至25℃再搅拌3小时。然后分离有机相，用二氯甲烷萃取水相。合并有机相，用稀盐酸、水、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤至中性，干燥并在真空下浓缩。用硅胶(粒度0.063至0.2mm)色谱法提纯所得粗产物并用9∶1的氯仿/醋酸乙酯洗脱，用丙酮重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基磺酸酯。熔点193至196℃;[α]20D+108°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(710)，276(665)，甲醇。
实施例1617β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二乙基氨基磺酸酯在搅拌条件下，于4小时内将3g(7.04mmol)14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇、30ml甲苯、2ml水、0.160g(0.7mmol)TEBAC、1.47ml(10.5mmol)N，N-二乙基氨基磺酰氯和2ml40%氢氧化钠溶液形成的混合物加热至内部温度为80℃。冷却后分离有机相，用甲苯萃取。合并有机相，用稀盐酸、水、饱和碳酸氢钠溶液及水洗涤至中性，干燥并在真空下浓缩。
用硅胶(粒度0.062至0.2mm)色谱法提纯所得粗产物并用9∶1的氯仿/醋酸乙酯洗脱，用甲醇重结晶后，得到17β-羟基-14α，15α-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二乙基氨基磺酸酯。
熔点69至73℃;[α]20D+98°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(713)，276(713)，甲醇。
14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯的生物有效性研究方法学切除卵巢的大鼠不仅子宫而且阴道都随雌激素的剂量而增加重量。这可归因于粘膜增生、蛋白质合成提高以及积水等原因。
作为本发明基础的试验使用成年的切除卵巢的大鼠。在一项对比研究中，测试了14α，15α-亚甲基-雌二醇类的酯与乙炔基雌二醇(EE)和14α，15α-亚甲基雌二醇(J824)相比较的口服时的雌激素作用。给出的剂量与分子的类甾醇核有关。一次性口服测试物质。在试验的第4天，测定子宫重量(湿重量)作为雌激素作用的参数。
试验用动物将试验开始时体重200～240g的雌性大鼠[种BORWISW(SPF/Cpb)]切除卵巢，手术后10天随机地安排试验组。然后使之一次性口服(第1天)测试物质。服药后第4天对试验动物进行解剖。
每组动物数n＝7动物喂养在惯常条件下(室温21℃±2℃;光照方式12小时亮，12小时暗)喂养动物。大鼠和小鼠得到的动物喂养食品来自Fa.Altromin，饮用水随使。
测试物质使乙炔基雌二醇(EE)、J824、J821、J883、J884、J885、J886和J893悬浮在MyrjR中。
在3μg/动物、10μg/动物、30μg/动物和100μg/动物剂量下进行测试。剂量数据与所称重物质量的类甾醇部分有关。对比组阉割后一次性施用药物载体MyrjR。
评价参数用一次口服药物后测出的子宫湿重量作为评价雌激素作用的标志。
-测出子宫重量，并由此算出相对于载体对比组的雌激素效率%。
-对所述物质作剂量-作用分析。
权利要求
1.14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯，其中，17-羟基和/或3-羟基被酯化。
2.通式Ⅰ的14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯， 其中R为-COR1，其中R1为烷基、环烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基，或者R为-SO2R2，其中R2为烷基、环烷基、芳基、二烷基氨基或亚甲基亚氨基，以及R′为氢原子或-COR1，其中R1为烷基、环烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基。
3.权利要求1所述14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯的制备方法，其特征在于，使式Ⅱ所示的14α，15α-亚甲基-雌二醇 与烷烃-、环烷烃-、芳烃-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一种活性衍生物进行反应。
4.权利要求1或2所述的14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯的制备方法，其特征在于，使通式Ⅰ所示的14α，15α-亚甲基-雌二醇的酯与烷基-、环烷基-、芳基-、二烷基氨基或亚甲基亚氨基磺酸的一种活性衍生物反应，其中式Ⅰ中R为氢原子和R′为-COR1，其中R1含义与权利要求2中所给出的含义相同。
5.权利要求1或2所述的14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯的制备方法，其特征在于，使通式Ⅲ所示的14α，15α-亚甲基-雌酮类的酯 式中R为-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有同权利要求2中所给出的含义，用一种还原剂转化成权利要求1所述14α，15α-亚甲基-雌二醇类的酯，其中R为-COR1或-SO2R2，其中R1和R2与权利要求1中所给出的含义相同，R′为氢原子;并在必要时与烷烃-、环烷烃-、芳烃-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一种活性衍生物进行反应。
6.权利要求1至4中任意一项所述14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯的制备方法，其特征在于，酯化反应是借助于相转移催化作用进行的。
7.权利要求1的14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯作为口服药物的应用。
8.权利要求1和7中任意一项的14α，15α-亚甲基-雌二醇-酯作为避孕药和抗更年期症药的应用。
全文摘要
本发明涉及14α，15α-亚甲基雌二醇-酯，其中17-羟基和/或3-羟基被酯化。该酯可与药物助剂相结合用作药品，尤其是用作避孕药或抗更年期症药，与乙炔基雌二醇或天然雌激素相比，该酯显示了准确定义的雌激素作用，尤其是采取口服形式效果更好。因此，不仅降低了传统避孕药的副作用，也决定性地改善了雌激素替代疗法。
文档编号C07J53/00GK1102830SQ94108120
公开日1995年5月24日 申请日期1994年7月2日 优先权日1993年7月3日
发明者S·许瓦兹, H·J·塞曼, K·庞索尔德, H·亨凯尔, S·弗里克, M·M·迪特根, G·考夫曼, M·厄特尔, W·施特尔茨纳, B·施奈德, W·艾尔格 申请人:耶拿制药有限公司