专利名称：一种何首乌多糖的提取纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种以何首乌为原料提取纯化何首乌多糖的方法。
背景技术：
何首乌多糖是从何首乌中提取而得的一种水溶性多糖，具有抗衰老、免疫调节等作用，是何首乌延缓肾组织衰老重要功效成分，何首乌具有补肝肾等作用，是成药尿毒清胶囊重要味药之一，何首乌多糖在慢性肾功能衰竭等疾病治疗方面具有广阔的前景。市售何首乌多糖因含色素等杂质致何首乌多糖色泽较深且不稳定。常规活性碳吸附方法无法除尽色素，过氧化氢法易致何首乌多糖氧化而影响何首乌多糖功效，何首乌多糖成分提取纯化脱色方法的研究显得尤为重要
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够提高何首乌多糖提取物中何首乌多糖纯度，有效脱去色素的方法。为了达到上述目的，本发明的技术方案为一种能够提高何首乌多糖提取物中何首乌多糖纯度，有效脱去色素的方法，其包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的何首乌原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得何首乌多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化。所述的加水进行水浴回流提取，所加的水的质量为经过预处理的何首乌原料的6 10倍。所述的加水进行水浴回流提取的次数为2 5次，提取时间为每次I 3小时，每次提取完后将提取液趁热过滤。所述的预处理的何首乌原料可由下列方法制得将何首乌药材用石油醚(60 900C )按质量体积比为I : 8，在70 90°C恒温下水浴回流提取0. 5 2小时，重复2 4次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在75 90°C恒温下水浴回流提取I 3小时，重复3 6次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂。所述的将提取液浓缩，醇沉得何首乌多糖粗提物包括下列步骤将提取液减压浓缩至原体积的1/3，冷却后加入6倍体积的无水乙醇，4 8°C静置过夜，以转速为3000 5000r/min离心10 30分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物。所述的用大孔树脂脱色纯化包括下列步骤将何首乌多糖粗取物配制成5 15g/I的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0. I I 0. 3 I的比例混匀，置于往复振荡器上振摇4 8小时后过滤得多糖水溶液再以HP20大孔吸附树脂4 8倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥。本发明提供的何首乌多糖提取方法是以经石油醚进行脱脂，乙醇溶液预处理的何首乌原料用水提醇沉法来提取何首乌多糖，并利用HP20大孔吸附树脂将何首乌多糖脱色纯化。该方法能够在不损害何首乌多糖的结构和活性的前提下，除去何首乌多糖中存在的大部分色素，提高何首乌多糖的纯度。
具体实施例方式实施例一本发明提供的以何首乌为原料提取纯化何首乌多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的何首乌粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 8，在90°C恒温下水浴回流提取0. 5小时，重复2次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在90°C恒温下水浴回流提取I小时，重复4次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的何首乌原料；在上述经预处理的何首乌原料中加入6倍质量的水，水浴回流提取4次，每次2. 5小时并趁热过滤提取液；将提取液减压
浓缩至原体积的1/3,冷却后加入6倍体积的无水乙醇，8°C静置过夜，以转速为5000r/min离心10分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物；将何首乌多糖粗取物配制成15g/l的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0.1 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇4小时后过滤得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附树脂4倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得何首乌多糖提取物。实施例二本发明提供的以何首乌为原料提取纯化何首乌多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的何首乌粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 8，在70°C恒温下水浴回流提取2小时，重复4次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在75°C恒温下水浴回流提取3小时，重复6次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的何首乌原料；在上述经预处理的何首乌原料中加入10倍质量的水，水浴回流提取2次，每次3小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/3，冷却后加入6倍体积的无水乙醇，4°C静置过夜，以转速为3000r/min离心30分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物；将何首乌多糖粗取物配制成5g/l的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0.3 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇8小时后过滤得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附树脂8倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得何首乌多糖提取物。实施例三本发明提供的以何首乌为原料提取纯化何首乌多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的何首乌粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 8，在80°C恒温下水浴回流提取I小时，重复3次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在80°C恒温下水浴回流提取2小时，重复5次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的何首乌原料；在上述经预处理的何首乌原料中加入7倍质量的水，水浴回流提取5次，每次I小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/3，冷却后加入6倍体积的无水乙醇，5°C静置过夜，以转速为4000r/min离心20分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物；将何首乌多糖粗取物配制成10g/l的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0.2 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇6小时后过滤得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附树脂6倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得何首乌多糖提取物。实施例四本发明提供的以何首乌为原料提取纯化何首乌多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的何首乌粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 8，在85°C恒温下水浴回流提取I. 5小时，重复2次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在85°C恒温下 水浴回流提取2. 5小时，重复3次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的何首乌原料；在上述经预处理的何首乌原料中加入8倍质量的水，水浴回流提取3次，每次2小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/3,冷却后加入6倍体积的无水乙醇，6°C静置过夜，以转速为4000r/min离心25分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物；将何首乌多糖粗取物配制成12g/l的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0.15 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇5小时后过滤得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附树脂5倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得何首乌多糖提取物。
权利要求
1.一种能够提高何首乌多糖提取物申何首乌多糖纯度，有效脱去色素的方法，其包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的何首乌原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得何首乌多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化。
2.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的加水进行水浴回流提取，所加的水质量为经过预处理的何首乌原料的6 10倍。
3.如权利要求I所述的的制备方法，其特征在于所述的加水进行水浴回流提取的次数为2 5次，提取时间为每次I 3小时，每次提取完后将提取液趁热过滤。
4.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的预处理的何首乌原料可由下列方法制得将何首乌药材用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 8，在70 90°C恒温下水浴回流提取0. 5 2小时，重复2 4次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用80% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 8，在75 90°C恒温下水浴回流提取I 3小时，重复3 6次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂。
5.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的将提取液浓缩，醇沉得何首乌多糖粗提物包括下列步骤将提取液减压浓缩至原体积的1/3，冷却后加入6倍体积的无水乙醇，4 8°C静置过夜，以转速为4000 6000r/min离心10 30分钟，取沉淀即得何首乌多糖粗取物。
6.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的用大孔树脂脱色纯化包括下列步骤将何首乌多糖粗取物配制成5 15g/l的水溶液，以何首乌多糖粗取物和HP20大孔吸附树脂质量比按0.1 I 0.3 I的比例混匀，置于往复振荡器上振摇4 8小时后过滤得多糖水溶液；再以HP20大孔吸附树脂4 8倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥。
7.如权利要求I 6任一项所述的制备方法制得的何首乌多糖提取物。
全文摘要
本发明公开了一种何首乌多糖提取纯化方法，该制备方法包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的何首乌原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得何首乌多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化得何首乌多糖提取物。本发明能够在不损害何首乌多糖的结构和活性的前提下，除去何首乌多糖申存在的大部分色素等杂质，提高何首乌多糖的纯度。
文档编号C08B37/00GK102731667SQ20111009265
公开日2012年10月17日 申请日期2011年4月12日 优先权日2011年4月12日
发明者杨大玮, 谭智丽, 马麟 申请人:杨大玮, 谭智丽, 马麟