一种黄芪多糖的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种黄芪多糖的提取方法，其包括下列步骤：（1）将黄芪药材经超微粉碎机粉碎；（2）加入无水乙醇回流，离心后保留药材粉末；（3）药材粉末挥干乙醇后在水中搅拌提取，提取温度为65~85℃；（4）收集提取液，过滤，浓缩，加无水乙醇取得沉淀；（5）将该取得的沉淀离心干燥即制得本发明黄芪多糖。本发明采用超微粉碎技术将药材粉碎，用无水乙醇除去药材中脂溶性成分。利用本方法制备的黄芪多糖纯度能达到80%以上，提取率达20%，且本发明的方法设备及环境要求低，步骤简单、选择性高、人力消耗、能耗低，利于推广、开发和应用。
【专利说明】一种黄芪多糖的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物多糖的制备方法，尤其涉及从一种天然植物黄芪中分离制备黄芪多糖的方法。
【背景技术】
[0002]黄苗(RadixAstragalus)是豆科植物，蒙古黄苗(Astragalus membranaceus (Fisch)Bge Varmongholicus (Bge)Hsiao)或膜荚黄苗(Astragalus membranaceus (Fisch)Bge)的干燥根，性甘，微温，归脾、肺经，中医古籍大多把它归为补益药中的补气药，具有补气升阳、益卫固表、利水消肿、托疮生机之功效。
[0003]现代研究表明黄芪中含有多种有效成分包括:多糖、皂甙、黄酮、氨基酸及多种微量元素等，其中黄苗多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是含量最多的一种。其主要生物活性表现为增强免疫功能、脾脏增大、抗流感、抗肿瘤、防衰老及抗辐射，对急梗犬心有改善心肌收缩性能、缩小梗塞面积、减轻心肌损伤等作用。由于黄芪多糖的多种生物活性及良好的临床效果，多年来在国内外已成为中药提取及中草药现代化研究的焦点之一。
[0004]现有的黄芪多糖提取技术主要有水煮法、碱水提取法、碱醇提取法、微波辅助萃取技术、超声波法、纤维素酶法等。碱提取法主要缺点是时间长、提取率较低，高温还可能引起多糖的分解、氧化等现象发生；微波、超声波、纤维素酶法虽说能一定程度上提高黄芪多糖的得率，但也有可能对多糖的高级结构产生一定的影响，从而降低黄芪多糖的生物活性。纵观现有的黄芪多糖提取方法，中药材前处理方法粗糙，没有深入的进行研究。超微粉碎技术提取多糖的相关方法，对中 药材粉末的粒径没有严格的要求，超微粉并不是说药材粉末的颗粒越细越好，药材粉末太细经水浸泡后粘性太大，给提取液的后处理带来很大的问题，影响提取效率，同时药材粉末越细对设备的要求越高，大大的增加了生产成本。鉴于此，创立一种标准明确的药材前处理方法来提高黄芪多糖的得率是黄芪多糖研究的当务之急。
【发明内容】
[0005]本发明提供一种提高从黄芪中提取多糖的方法。
[0006]本发明制备黄芪多糖的方法，有以下步骤组成:
[0007](I)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为10-25μπι，加入黄芪粉重量2~3倍量的无水乙醇，100°c水浴回流提取3(T60min，3000r/min离心5min，收集药材粉末，并挥干粉末中的乙醇；
[0008](2)加入黄芪粉重量6~8倍量水，在65~85°C的水浴中保温、搅拌I~2h，3000r/min离心5min，分离沉淀与提取液备用；
[0009](3)往上述沉淀中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0010](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0011](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为65%~85%，搅拌l(Tl5min，离心，将沉淀
真空冷冻干燥即得黄芪多糖产品。[0012]上述制备黄芪多糖的方法中，步骤(1)所述药材粉末直径为15~25μπι。
[0013]上述制备黄芪多糖的方法中，步骤(1)所述加入的无水乙醇的量优选为药材重量的3倍，回流时间优选为45min。
[0014]上述制备黄芪多糖的方法中，步骤(2)所述加水量优选为8倍，水温优选为70°C。
[0015]上述制备黄芪多糖的方法中，步骤(5)所述浓缩液中乙醇的浓度优选为75%。
[0016]利用本发明提出的制备黄芪多糖的方法，可以将黄芪多糖的得率提高到20%以上，纯度能达到80%以上，从根本上解决了多糖得率与纯度的不能同时保持在高水平上的问题。本发明主要优化了黄芪药材超微粉颗粒的粒径(15~25 μ m)，超微粉粒径不是越小越好，当粒径为10 μ m及以下时，不仅在设备上要求更高，而且随着粒径的减小，粘性不断的增大，对药渣与药液 的分离带来很大的不便影响了整体提取工艺的效率，同时在此条件下提取分离出的多糖溶水性相对变差。且本发明的方法设备及环境要求低步骤简单、选择性高、人力消耗、能耗低，利于推广、开发和应用。
【具体实施方式】
[0017]实施例1:
[0018](I)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为IOym以下，精密称取黄芪粉末2kg，以黄芪粉重量的2~3倍的量加入无水乙醇，100°C水浴回流60min，10000r/min离心20min，收集药材粉末，并挥干粉末中的乙醇；
[0019](2)以黄芪粉重量的6~8倍量加入水，在65°C的水浴中保温、搅拌f 2h，1000Or/min离心两次,每次20min,分离沉淀与提取液备用；
[0020](3)往上述沉淀中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0021](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0022](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇浓度为85%，搅拌l(Tl5min，离心，真空冷冻干燥得黄芪多糖400.8g，产率为20.04%，经硫酸-苯酚法测得其纯度为80.16%。
[0023]实施例2:
[0024](I)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为10-?8μπι，精密称取黄芪粉末2kg，以黄芪粉重量的2~3倍的量加入无水乙醇，100 V水浴回流30min，3000r/min离心5min,收集药材粉末,并挥干粉末中的乙醇；
[0025](2)以黄芪粉重量的61倍的量加入水，在80°C的水浴中保温、搅拌f 2h，3000r/min离心5min,分离沉淀与提取液备用；
[0026](3)往上述沉淀中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0027](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0028](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为65%，搅拌l(Tl5min，离心，真空冷冻干燥得黄芪多糖409.64g，产率为20.48%，经硫酸-苯酚法测得其纯度为81.23%。
[0029]实施例3:
[0030](I)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为18~25 μ m，精密称取黄芪粉末2kg，以黄芪粉重量的2~3倍的量加入无水乙醇，100 0C水浴回流45min，3000r/min离心5min,收集药材粉末,并挥干粉末中的乙醇；
[0031](2)以黄芪粉重量的6~8倍的量加入水，在70°C的水浴中保温、搅拌l~2h，3000r/min离心5min,分离沉淀与提取液备用；
[0032](3)往上述沉淀中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0033](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0034](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为75%，搅拌l(Tl5min，离心，真空冷冻干燥得黄芪多糖470.21g，产率为23.51%，经硫酸-苯酚法测得其纯度为83.63%。
[0035]实施例4 (传统的水煮醇沉法):
[0036](I)精密称取黄芪饮片2kg，以药材重量的2~3倍的量加入无水乙醇，回流45min ；
[0037](2)以黄芪重量的61倍的量加入水，100°C回流提取f2h，抽滤分离药渣与提取液备用；
[0038](3)往上述药渣中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0039](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0040](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为75%，搅拌l(Tl5min，离心，真空冷冻干燥得黄芪多糖156.42g，产率为7.82%，经硫酸-苯酚法测得其纯度为58.73%。
[0041]实施例5(碱提法):
[0042](I)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为18~25 μ m，精密称取黄芪粉末2kg，以黄芪粉重量的2~3倍的量加入无水乙醇，100 0C水浴回流45min，3000r/min离心5min,收集药材粉末,并挥干粉末中的乙醇；
[0043](2)以黄芪粉重量的10-12倍的量加入pH为12的NaOH水溶液，100°C回流提取2h, 3000r/min离心5min,分离沉淀与提取液备用；
[0044](3)往上述沉淀中加入4飞倍量的水，同步骤(2)操作；
[0045](4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，调pH为中性，减压浓缩至原体积的1/5 ；
[0046](5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为75%，搅拌l(Tl5min，离心，真空冷冻干燥得黄芪多糖515.3g，产率为25.75%，经硫酸-苯酚法测得其纯度为50.04%。
[0047]实施例6:
[0048]观察多糖粉末颜色，比较例1、2、3、4、5制取黄芪多糖的得率及纯度；精密称取各多糖1.00g，分别溶于IOml纯化水中，观察溶液的颜色，以及各个多糖的溶解性。
[0049]实验结果:用本发明提供的提取方法(例3)制取的黄芪多糖不论在色泽、纯度上，还是在其水溶性以及溶解后溶液颜色方面都优于其他提取方法；在产率上仅仅只比碱提法(例5)略低，但黄芪多糖的纯度却远远高于碱提法。结果见表1
[0050]表1.外观色泽、水溶性、溶解性等比较
[0051]
【权利要求】
1.一种黄芪多糖的提取方法，由下述步骤组成: (1)将黄芪药材用超微粉碎机粉碎至颗粒直径为10-25μ m，加入黄芪粉重量2-3倍量的无水乙醇，100°c水浴回流提取30-60min, 3000r/min离心5min,收集药材粉末,并挥干粉末中的乙醇； (2)加入黄芪粉重量6-8倍量水，在65-85°C的水浴中保温、搅拌l_2h，3000r/min离心5min,分离沉淀与提取液备用； (3)往上述沉淀中加入4-6倍量的水，同步骤(2)操作； (4)合并(2)、(3)步骤所得滤液，减压浓缩至原体积的1/5； (5)向浓缩液加入无水乙醇至乙醇溶度为65%-85%，搅拌10-15min，离心，将沉淀真空冷冻干燥即得黄芪多糖产品。
2.如权利要求1所述制备黄芪多糖的方法，其特征是，步骤(1)所述药材粉末直径为15-25 μ m0
3.如权利要求1所述制备黄芪多糖的方法，其特征是，步骤(1)所述加入的无水乙醇的量是药材重量的3倍，回流时间是45-60min。
4.如权利要求1所述制备黄芪多糖的方法，其特征是，步骤(2)所述加水量为8倍，水温保持在70-80°C。
5.如权利要求1所述制备黄芪多糖的方法，其特征是，步骤(5)所述浓缩液中加入乙醇至浓度为70%-80%。
【文档编号】C08B37/00GK103848918SQ201210507547
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2012年11月30日 优先权日:2012年11月30日
【发明者】彭江宁, 李欣, 叶玉琴 申请人:瑞普（天津）生物药业有限公司