领域
本申请大体上涉及药物化学领域。具体地，本申请涉及egfr和/或egfr突变体抑制剂。
背景
egfr(epidermalgrowthfactorreceptor)是表皮生长因子受体(her)家族成员之一。该家族包括her1(erbb1，egfr)、her2(erbb2，neu)、her3(erbb3)及her4(erbb4)。her家族在细胞生理过程中发挥重要的调节作用。egfr是表皮生长因子(egf)细胞增殖和信号传导的受体，其突变或过表达一般会引发肿瘤。egfr是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，细胞膜贯通，分子量170kda。egfr位于细胞膜表面，靠与配体结合来激活，包括egf和tgfα(transforminggrowthfactorα)。激活后，egfr由单体转化为二聚体，尽管也有证据表明，激活前也存在二聚体。egfr还可能和erbb受体家族的其他成员聚合来激活，例如erbb2/her2/neu。
概述
一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
另一方面，本申请涉及制备式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐的方法：
其中，所述方法包括：
将式(ii)所示的化合物与丙烯酰氯进行反应得到式(i)所示的化合物：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
再一方面，本申请涉及药物组合物，其包含式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐以及药物可以接受的载体：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
又一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐在制备用于抑制表皮生长因子受体(her)的药物中的用途：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
另一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐在制备用于治疗癌症和/或肿瘤的药物中的用途：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
其他方面，本申请涉及治疗肿瘤和/或癌症的方法，其包括向需要所述方法的个体给予治疗有效量的式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐，或者给予治疗有效量的包含式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐以及药物可接受的载体的药物组合物，
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
详述
在以下的说明中，包括某些具体的细节以对各个公开的实施方案提供全面的理解。然而，相关领域的技术人员会认识到，不采用一个或多个这些具体的细节，而采用其它方法、部件、材料等的情况下仍实现实施方案。
除非本申请中另有要求，在整个说明书和所附的权利要求书中，词语“包括(comprise)”及其英文变体例如“包括(comprises)”和“包括(comprising)”应解释为开放式的、含括式的意义，即“包括但不限于”。
在整个本说明书中提到的“实施方案”、“实施方案”、“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”意指在至少一实施方案中包括与该实施方案所述的相关的具体参考要素、结构或特征。因此，在整个说明书中不同位置出现的短语“在一实施方案中”或“在实施方案中”或“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”不必全部指同一实施方案。此外，具体要素、结构或特征可以任何适当的方式在一个或多个实施方案中结合。
应当理解，在本申请说明书和所附的权利要求书中用到的单数形式的冠词“一”(对应于英文“a”、“an”和“the”)包括复数的对象，除非文中另外明确地规定。因此，例如提到的包括“催化剂”的反应包括一种催化剂，或两种或多种催化剂。还应当理解，术语“或”通常以其包括“和/或”的含义而使用，除非文中另外明确地规定。
定义
除非另有相反的说明，否则说明书和所附权利要求中所用的下列术语具有以下的意思：
本文所使用的术语“同位素”系指具有相同质子数，不同中子数的同一元素的不同核素。
本文所使用的术语“丰度”系指某一同位素在其所属的天然元素中占的原子数百分比。
本文所使用的术语“同位素天然丰度”或“天然丰度”系指自然界中存在的某一天然元素中各种同位素在该天然元素中占的原子数百分比。例如氢的同位素天然丰度：1h＝99.985％，2h＝0.015％。氧的同位素天然丰度：16o＝99.76％，17o＝0.04％，18o＝0.20％。
本文所使用的术语“同位素富集指数”系指某一同位素的丰度与该同位素天然丰度之比。例如，同位素富集指数为6000的氘原子系指丰度为90％的氘原子。
本文所使用的术语“氢”(“h”)系指由具有同位素天然丰度的1h(99.985％)和2h(0.015％)组成的氢。
本文所使用的术语“氘”(“d”和“d”)系指氢(h)的同位素，氘原子核中有一个质子和一个中子，其同位素天然丰度为0.015％。“dx-y”系指用x至y个氘原子进行的取代。例如，甲氧基-d3系指cd3o-。
本文所使用的术语“药物可接受的盐”包括酸加成的盐和碱加成的盐。
本文所使用的术语“药物可接受的酸加成盐”是指保持自由碱的生物有效性和性质的盐，其不会在生物学上或在其它方面是不期望的，并且其与无机酸类或有机酸类形成。能够用于本申请的示例性的无机酸类的实例包括但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。能够用于本申请的示例性的有机酸类的实例包括但不限于乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、褐藻酸、抗坏血酸、天门冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙烷磺酸、2-羟基乙烷磺酸、甲酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、顺丁烯二酸、苹果酸、丙二酸、苯基乙醇酸、甲烷磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、丙酸、焦谷氨酸、丙酮酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟醋酸、十一碳烯酸等。
本文所使用的术语“药物可接受的碱加成盐”是指保持自由酸的生物有效性与性质的盐，其不会在生物学上或在其它方面是不期望的。这些盐通过在自由酸中添加无机碱或有机碱而制备。能够用于本申请的示例性的衍生自无机碱的盐的实例包括但不限于钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、辞、铜、锰、铝盐等。在某些实施方案中，无机盐为铵、钠、钾、钙和镁盐。能够用于本申请的示例性的衍生自有机碱的盐的实例包括但不限于以下的盐：伯、仲和叔胺，包括天然取代胺在内的取代胺、环状胺类及碱性离子交换树脂，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、苯乙苄胺、苄星、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、三乙醇胺、氨基丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、n-乙基哌啶、聚胺树脂等。在某些实施方案中，有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺、胆碱和咖啡因。
本文所使用的术语“药物组合物”是指本申请中的化合物与本领域中通常接受的用于传递生物活性化合物至哺乳动物例如人的介质的制剂。所述介质包括所有供其使用的药物可接受的载体。药物组合物有利于化合物向生物体的给药。在本领域中存在多种方法对化合物进行给药，其包括但不限于口服给药、注射给药、气雾剂给药、肠胃外给药以及局部给药。通过化合物与诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对苯甲磺酸、水杨酸等无机酸或有机酸反应也可以得到药物组合物。
本文所使用的术语“载体”定义为有利于将化合物引入细胞或组织的化合物。例如二甲亚砜(dmso)通常用作载体，这是因为它易于将某些有机化合物引入生物体的细胞或组织中。
本文所使用的术语“肿瘤(tumour)”系指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物(neogrowth)。根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类。
本文所使用的术语“癌症(cancer)”系指恶性肿瘤的总称。
本文所使用的术语“治疗有效量”指当对哺乳动物，优选对人类给药时，本申请的化合物足以有效治疗(如下定义)哺乳动物的，优选人类的肿瘤和/或癌症的量。根据化合物、疾病状态及其严重性、和待治疗哺乳动物的年龄，构成“治疗有效量”的本申请的化合物的量将会不同，但是本领域的技术人员根据其自身的知识以及本公开可以依惯例确定本申请的化合物的量
本文所用的术语“进行治疗”或“治疗”涵盖患有相关疾病或病症的哺乳动物，优选人类中治疗相关的疾病或疾病状态，并且包括：
(i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中发生，尤其是当该哺乳动物易感于所述疾病状态，但尚未被诊断出患有这种疾病状态时；
(ii)抑制疾病或疾病状态，即阻止其发生；或者
(iii)缓解疾病或疾病状态，即使疾病或疾病状态消退。
正如本文所用的那样，术语“疾病”和“疾病状态”可以相互交换使用，或者可以是不同的，因为特殊的疾病或疾病状态可能并没有已知的致病因子(因此不能用病因学解释)，因此其不被公认为是疾病，而是被认为是不期望的疾病状态或病症，其中临床医生已经鉴定出或多或少的特定系列的症状。
在整个治疗过程中，体内给药可以以单次给药、连续或间歇给药(例如以分割的剂量以适宜的间隔给药)的方式来进行。测定最有效的给药方式和剂量的方法是本领域技术人员公知的，并随着治疗所用的制剂、治疗的目的、所治疗的靶细胞以及所治疗的个体而改变。可以进行单次或多次给药，剂量水平和模式由主治医师进行选择。
具体实施方式
在本领域中，由于氘修饰对药物活性的影响和对药物代谢特性的影响具有不可预测性，所以本领域所属的技术人员通常会质疑乃至放弃氘修饰作为可行的药物设计策略的想法。
一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
在某些实施方案中，r1选自-ch2d、-chd2或-cd3。
在某些实施方案中，r2选自-ch2d、-chd2或-cd3。
在某些实施方案中，r3选自-chd-或-cd2-。
在某些实施方案中，r4选自-chd-或-cd2-。
在某些实施方案中，r5选自-ch2d、-chd2或-cd3。
在某些实施方案中，r6选自-ch2d、-chd2或-cd3。
在某些实施方案中，r1为-cd3。
在某些实施方案中，r2为-cd3。
在某些实施方案中，r3为-cd2-。
在某些实施方案中，r4为-cd2-。
在某些实施方案中，r5或r6为-cd3。
在某些实施方案中，r5和r6均为-cd3。
在某些实施方案中，r1为-cd3，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-cd3，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-cd3，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-cd3，并且r6为-cd3。
在某些实施方案中，r1为-cd3，r2为-cd3，r3为-cd2-，r4为-cd2-，r5为-cd3，并且r6为-cd3。
在某些实施方案中，r1为-ch3，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-ch2d，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-ch3，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-chd2，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-ch2d，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-cd3，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-chd2，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-ch2-，r5为-cd3，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-cd3，r2为-ch3，r3为-chd-，r4为-ch2-，r5为-cd3，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，r1为-cd3，r2为-ch3，r3为-ch2-，r4为-chd-，r5为-cd3，并且r6为-ch3。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为200，即作为取代基的氘原子的丰度为3％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为400，即作为取代基的氘原子的丰度为6％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为666.67，即作为取代基的氘原子的丰度为10％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为1000，即作为取代基的氘原子的丰度为15％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为2000，即作为取代基的氘原子的丰度为30％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为3333.33，即作为取代基的氘原子的丰度为50％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为4000，即作为取代基的氘原子的丰度为60％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为5000，即作为取代基的氘原子的丰度为75％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6000，即作为取代基的氘原子的丰度为90％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6333.33，即作为取代基的氘原子的丰度为95％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6466.67，即作为取代基的氘原子的丰度为97％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6533.33，即作为取代基的氘原子的丰度为98％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6566.67，即作为取代基的氘原子的丰度为98.5％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6600，即作为取代基的氘原子的丰度为99％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6633.33，即作为取代基的氘原子的丰度为99.5％。
在某些实施方案中，作为取代基的氘原子，其同位素富集指数为6660，即作为取代基的氘原子的丰度为99.9％。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为60％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为75％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为90％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为95％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为97％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为98％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为98.5％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为99％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐中，作为取代基的氘原子的丰度至少为99.5％，而其他同位素具有其天然丰度。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物选自：
n-(2-{2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二(甲基-d3)氨基乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基乙基-甲氨基]-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基乙基-(甲基-d3)氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；以及
n-(2-[2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的药效学特性。
在某些方面，本申请的化合物具有表皮生长因子受体抑制活性。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的药代动力学特性。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的体内代谢特性。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的体内肿瘤抑制活性。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的安全性。
在某些方面，本申请的化合物具有改进的耐受性。
在某些实施方案中，本申请的化合物尤其指下列化合物：
n-(2-{2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二(甲基-d3)氨基乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基乙基-甲氨基]-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基乙基-(甲基-d3)氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；
n-(2-[2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺；以及
n-(2-[2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺。
另一方面，本申请涉及制备式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐的方法：
其中，所述方法包括：
将式(ii)所示的化合物与丙烯酰氯进行反应得到式(i)所示的化合物：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
在某些实施方案中，式(ii)所示的化合物与丙烯酰氯在强碱的存在下进行反应得到式(i)所示的化合物。
能够用于本申请的示例性的强碱的实例包括但不限于氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、乙醇钾和叔丁醇钠。
在某些实施方案中，式(ii)所示的化合物与丙烯酰氯在极性溶剂的存在下进行反应得到式(i)所示的化合物。
能够用于本申请的示例性的极性溶剂的实例包括但不限于水、甲酰胺、三氟乙酸、二甲基亚砜(dmso)、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、六甲基磷酰胺、甲醇、乙醇、乙酸、异丙醇、吡啶、四甲基乙二胺、丙酮、三乙胺、正丁醇、二氧六环和四氢呋喃(thf)。
再一方面，本申请涉及药物组合物，其包含治疗有效量的式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐以及药物可以接受的载体：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
能够用于本申请的示例性的“药物可接受的载体”的实例包括但不限于任何被国家药品管理机构批准为可接受用于人或家畜的佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等张剂、溶剂或乳化剂。
又一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐在制备用于抑制表皮生长因子受体(her)的药物中的用途：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
在某些实施方案中，表皮生长因子受体(her)为egfr(her1)。
在某些实施方案中，egfr(her1)为野生型。
在某些实施方案中，egfr(her1)为突变体。
在某些实施方案中，egfr(her1)为单突变体或双突变体。
在某些实施方案中，式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐对l858regfr突变体、t790megfr突变体和exon19缺失激活突变体具有抑制活性。
另一方面，本申请涉及式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐在制备用于治疗癌症和/或肿瘤的药物中的用途：
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
由于本申请的式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐对l858regfr突变体、t790megfr突变体和exon19缺失激活突变体具有抑制活性，其可用于由egfr突变体活性介导的疾病或疾病状态如癌症的治疗。
在某些实施方案中，本申请的式(i)所示的化合物及其药物可接受的盐用于治疗由l858regfr突变体和/或t790megfr突变体和/或exon19缺失激活突变体介导的疾病或疾病状态如癌症的治疗。
在某些实施方案中，癌症选自卵巢癌、宫颈癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃癌、胃肠道间质瘤(gist)、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、肾癌、间变性大细胞淋巴瘤、急性髓细胞白血病(aml)、多发性骨髓瘤、黑色素瘤和间皮瘤。
在某些实施方案中，肺癌选自小细胞肺癌(sclc)和非小细胞肺癌(nsclc)。
其他方面，本申请涉及治疗肿瘤和/或癌症的方法，其包括向需要所述方法的个体给予治疗有效量的式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐，或者给予治疗有效量的包含式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐以及药物可接受的载体的药物组合物，
其中：
r1选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r2选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
r3选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r4选自亚甲基或被1至2个氘原子取代的亚甲基；
r5选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；以及
r6选自甲基或被1至3个氘原子取代的甲基；
条件是r1至r6中至少含有一个氘原子。
在某些实施方案中，个体是哺乳动物。
在某些实施方案中，个体是人类。
在某些实施方案中，向需要治疗肿瘤和/或癌症的个体给予式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐的单位剂量为0.1mg-1000mg。
在某些实施方案中，向需要治疗肿瘤和/或癌症的个体给予式(i)所示的化合物或其药物可接受的盐的单位剂量为1mg-1000mg。
实施例
虽然任何本领域技术人员能够依据上述公开的一般技术来制备本申请的化合物，但为方便起见，本说明书中的其它地方提供更加详细的本申请化合物的合成技术。另外，本领域技术人员已知合成中所使用的所有试剂及反应条件并且可以由普通的商品来源获得。例如，实施例中所使用的包括氘代试剂在内的各种试剂皆可从sigma-aldrichcompanyltd购得。实施例中所使用的各种细胞系皆可例如从中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库购得。
除非另有说明，1hnmr是使用氘代二甲基亚砜以400或500mhz频率下于约20-30℃下测定。使用标准nmr缩写：s＝单峰；d＝双峰；dd＝双峰的双峰；t＝三重峰；q＝四重峰；p＝五重峰；m＝多重峰；br＝宽带。
制备实施例
中间体1
n1-(2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1，2，4-三胺
将n’-(2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1,4-二胺(中间体6，44g)、铁(31g)和nh4cl(1.9g)在乙醇(120ml)和水(40ml)中的混合物加热回流3.5小时。通过使用scx柱的离子交换层析法对该粗混合物进行纯化。用甲醇-氨从柱中洗脱，进行真空浓缩，得米黄色标题化合物(90％)。m/z:434
中间体2
n1-(2-[二(甲基-d3)氨基]乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺
将n’-(2-[二(甲基-d3)氨基]乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1,4-二胺(中间体7，44g)、铁(31g)和nh4cl(1.9g)在乙醇(120ml)和水(40ml)中的混合物加热回流3.5小时。通过使用scx柱的离子交换层析法对该粗混合物进行纯化。用甲醇-氨从柱中洗脱，进行真空浓缩，得米黄色标题化合物(95％)。m/z:437
中间体3
n1-(2-二甲基氨基乙基)-5-(甲氧基-d3)-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1，2，4-三胺
将n’-(2-二甲基氨基乙基)-2-(甲氧基-d3)-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1,4-二胺(中间体8，44g)、铁(31g)和nh4cl(1.9g)在乙醇(120ml)和水(40ml)中的混合物加热回流3.5小时。通过使用scx柱的离子交换层析法对该粗混合物进行纯化。用甲醇-氨从柱中洗脱，进行真空浓缩，得米黄色标题化合物(86％)。m/z:434
中间体4
n1-(2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺
将n’-(2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1,4-二胺(中间体9，220mg，0.46mmol)、铁(155mg，2.78mmol)和nh4cl(17.32mg，0.32mmol)在乙醇(12ml)和水(4ml)中的混合物加热回流2小时。通过使用scx柱的离子交换层析法对该粗混合物进行纯化。用7m甲醇-氨从柱中洗脱出期望产物，将适当的级分合并，在硅胶上进行真空浓缩。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-5％的7n甲醇-氨进行洗脱，获得作为米黄色泡沫的标题化合物(175mg，85％)。m/z:433
中间体5
n1-(2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1，2，4-三胺
将n’-(2-二甲氨基-2,2-氘代乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1,4-二胺(中间体10，220mg，0.46mmol)、铁(155mg，2.78mmol)和nh4cl(17.32mg，0.32mmol)在乙醇(12ml)和水(4ml)中的混合物加热回流2小时。通过使用scx柱的离子交换层析法对该粗混合物进行纯化。用7m甲醇-氨从柱中洗脱出期望产物，将适当的级分合并，在硅胶上进行真空浓缩。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-5％的7n甲醇-氨进行洗脱，获得作为米黄色泡沫的标题化合物(175mg，85％)。m/z:433
中间体6
n’-(2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺
500ml三口瓶中，加入190mldma，16.9gn,n’-二甲基-n’-(甲基-d3)-乙烷，23.1gdipea，于室温搅拌30分钟后，加入47gn-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(中间体11)，然后将此固液悬浮物升温至85℃反应2-3小时，tlc和质谱监控反应完全后，趁热过滤。滤液中加入300ml乙腈(包括洗涤滤饼的乙腈量)，降温至5℃左右后，此时会有大量红色产品析出，过滤，在50℃减压烘干，得到51g产品，收率90％，无需纯化，直接用于下步反应。m/z:464
中间体7
n’-(2-[二(甲基-d3)氨基]乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺
500ml三口瓶中，加入190mldma，16.9gn-甲基-n’,n’-(甲基-d3)-乙烷，23.1gdipea，于室温搅拌30分钟后，加入47gn-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(中间体11)，然后将此固液悬浮物升温至85℃反应2-3小时，tlc和质谱监控反应完全后，趁热过滤。滤液中加入300ml乙腈(包括洗涤滤饼的乙腈量)，降温至5℃左右后，此时会有大量红色产品析出，过滤，在50℃减压烘干，得到51g产品，收率90％，无需纯化，直接用于下步反应。m/z:467
中间体8
n’-(2-二甲氨基-乙基)-2-(甲氧基-d3)-n’-甲基-n-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺
500ml三口瓶中，加入190mldma，16.9gn,n’,n’-三甲基乙烷，23.1gdipea，于室温搅拌30分钟后，加入47gn-(4-氟-2-(甲氧基-d3)-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(中间体12)，然后将此固液悬浮物升温至85℃反应2-3小时，tlc和质谱监控反应完全后，趁热过滤。滤液中加入300ml乙腈(包括洗涤滤饼的乙腈量)，降温至5℃左右后，此时会有大量红色产品析出，过滤，在50℃减压烘干，得到51g产品，收率90％，无需纯化，直接用于下步反应。m/z:464
中间体9
n’-(2-二甲氨基-1，1-氘代乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺
将n1,n1,n2-三甲基-2,2-二氘代乙烷-1,2-二胺(80mg，0.79mmol)添加到n-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(中间体11，350mg，0.79mmol)和dipea(0.342ml，1.97mmol)在2,2,2-三氟乙醇(5ml)中的悬浮液。将该混合物在微波中于140℃下加热1小时。通过使用scx柱的离子交换层析法将冷却的反应混合物纯化。用7m甲醇-氨从柱中洗脱出期望产物，将适当的级分合并，在硅胶上进行真空浓缩。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-4％7n甲醇-氨进行洗脱，获得作为橙色固体的标题化合物(230mg，62％)。m/z:463
中间体10
n’-(2-二甲氨基-2,2-氘代乙基)-2-甲氧基-n’-甲基-n-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺
将n1,n1,n2-三甲基-1,1-二氘代乙烷-1,2-二胺(80mg，0.79mmol)添加到n-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(中间体11，350mg，0.79mmol)和dipea(0.342ml，1.97mmol)在2,2,2-三氟乙醇(5ml)中的悬浮液。将该混合物在微波中于140℃下加热1小时。通过使用scx柱的离子交换层析法将冷却的反应混合物纯化。用7m甲醇-氨从柱中洗脱出期望产物，将适当的级分合并，在硅胶上进行真空浓缩。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-4％7n甲醇-氨进行洗脱，获得作为橙色固体的标题化合物(230mg，62％)。m/z:463
中间体11
n-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺
将对甲苯磺酸水合物(22.73g，119.5mmol)一次性地添加到3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-h-吲哚(中间体13，24.27g，99.58mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(中间体14，18.54g，99.58mmol)在2-戊醇(500ml)中的混合物中。将所得混合物于105℃下搅拌2.5小时。然后冷却到室温。通过过滤收集所得沉淀物，用2-戊醇(50ml)清洗，在真空下干燥，获得一些作为黄色固体的期望产物。将滤液冷却，通过过滤收集所得沉淀物，用2-戊醇(10ml)清洗。将这两批产物合并，用ch3cn进行研磨，获得固体，通过过滤收集该固体，在真空下干燥，获得作为黄色固体的标题化合物(37.4g，95％)。m/z:379
中间体12
n-(4-氟-2-(甲氧基-d3)-5-硝基苯基)-4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺
将对甲苯磺酸水合物(22.73g，119.5mmol)一次性地添加到3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-h-吲哚(中间体13，24.27g，99.58mmol)和4-氟-2-(甲氧基-d3)-5-硝基苯胺(中间体15，18.54g，99.58mmol)在2-戊醇(500ml)中的混合物中。将所得混合物于105℃下搅拌2.5小时。然后冷却到室温。通过过滤收集所得沉淀物，用2-戊醇(50ml)清洗，在真空下干燥，获得一些作为黄色固体的期望产物。将滤液冷却，通过过滤收集所得沉淀物，用2-戊醇(10ml)清洗。将这两批产物合并，用ch3cn进行研磨，获得固体，通过过滤收集该固体，在真空下干燥，获得作为黄色固体的标题化合物(37.4g，95％)。m/z:382
中间体13
3-(2-氯嘧啶-4-基)-1h-吲哚
在10分钟的时间内于0℃下在n2气氛中，将ch3mgbr(3m，在乙醚中，22.68ml，68.03mmol)逐滴添加到1-h-吲哚(7.97g，68.03mmol)在1,2-二氯乙烷(250ml)中的搅拌溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性地添加2,4-二氯嘧啶(15.00g，100.69mmol)。让所得溶液升温至室温，再搅拌16小时。通过添加ch3oh(25ml)淬灭反应，然后将该混合物进行真空浓缩，使其吸附到硅胶上。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-20％的ch3oh进行洗脱，获得作为黄色固体的标题化合物(7.17g，46％)。m/z:229
中间体14
4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺
将4-氟-2-甲氧基苯胺(2.4g，17.00mmol)分批添加到在冰/水浴中冷却的浓h2so4(15ml)中，在添加期间将温度保持在低于15℃。将该混合物搅拌直到所有所形成的固体都已溶解。分批添加kno3(0.815ml，17.00mmol)，以便将温度保持在低于10℃。将该混合物搅拌过夜，然后倒入冰/水上。将该混合物用浓nh4oh碱化。将所得固体滤出，然后溶解于ch2cl2，用水清洗，干燥(na2so4)，在硅胶上浓缩。利用fcc进行纯化，用50-0％在ch2cl2中的庚烷进行洗脱，获得作为黄色结晶固体标题化合物(2.450g，77％)。m/z:186
中间体15
4-氟-2-(甲氧基-d3)-5-硝基苯胺
将4-氟-2-(甲氧基-d3)苯胺(2.4g，17.00mmol)分批添加到在冰/水浴中冷却的浓h2so4(15ml)中，在添加期间将温度保持在低于15℃。将该混合物搅拌直到所有所形成的固体都已溶解。分批添加kno3(0.815ml，17.00mmol)，以便将温度保持在低于10℃。将该混合物搅拌过夜，然后倒入冰/水上。将该混合物用浓nh4oh碱化。将所得固体滤出，然后溶解于ch2cl2，用水清洗，干燥(na2so4)，在硅胶上浓缩。利用fcc进行纯化，用50-0％在ch2cl2中的庚烷进行洗脱，获得作为黄色结晶固体标题化合物(2.450g，77％)。m/z:189
实施例1
n-(2-{2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
冰浴条件下向n1-(2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(中间体1，20g)在thf(200ml)和水(20ml)中加入6.9g氢氧化钠。经搅拌溶液中添加丙烯酰氯4.05g，室温搅拌30分钟，将该混合物于室温下搅拌1小时。tlc检测反应结束后，反应液加入200ml水和20ml氨水，固体析出，过滤。收集所得固体，用水清洗，于50℃下干燥8小时，得标题化合物(收率86％)。
1hnmr:2.23(3h,s),2.28(2h,t),2.71(3h,s),2.89(2h,t),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+488
n-(2-{2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺甲磺酸盐
将上步得到的n-(2-{2-[甲基(甲基-d3)氨基]乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺20.5g(1.0eq)加入到500ml三口瓶中，溶于120ml乙醇和80ml乙酸乙酯，室温下滴加4.1g甲磺酸(1.05eq)+40ml乙酸乙酯，约1小时滴完，滴完后于该温度保温1.5-2小时，然后缓慢冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯/乙醇溶液(2:1，v/v)洗涤1次后，过滤，烘干，得到18.0g产品，收率83％。
实施例2
n-(2-{2-二(甲基-d3)氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
冰浴条件下向n1-(2-[二(甲基-d3)氨基]乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(中间体2，20g)在thf(200ml)和水(20ml)中加入6.9g氢氧化钠。经搅拌溶液中添加丙烯酰氯4.05g，室温搅拌30min，将该混合物于室温下搅拌1小时。tlc检测反应结束后，反应液加入200ml水和20ml氨水，固体析出，过滤。收集所得固体，用水清洗，于50℃下干燥8小时，得标题化合物(收率88％)。
1hnmr:2.28(2h,t),2.71(3h,s),2.89(2h,t),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+491
n-(2-{2-二(甲基-d3)氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺甲磺酸盐
将上步得到的n-(2-{2-二(甲基-d3)氨基乙基-甲氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺20.5g(1.0eq)加入到500ml三口瓶中，溶于120ml乙醇和80ml乙酸乙酯，室温下滴加4.1g甲磺酸(1.05eq)+40ml乙酸乙酯，约1小时滴完，滴完后于该温度保温1.5-2小时，然后缓慢冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯/乙醇溶液(2:1，v/v)洗涤1次后，过滤，烘干，得到黄色固体，收率85％。
实施例3
n-(2-[2-二甲氨基乙基-甲氨基]-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
于冰浴条件下向n1-(2-二甲基氨基乙基)-5-(甲氧基-d3)-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(中间体3，20g)在thf(200ml)和水(20ml)中加入6.9g氢氧化钠。经搅拌溶液中添加丙烯酰氯4.05g，室温搅拌30min，将该混合物于室温下搅拌1小时。tlc检测反应结束后，反应液加入200ml水和20ml氨水，固体析出，过滤。收集所得固体，用水清洗，于50℃下干燥8小时，得标题化合物(收率85％)。
1hnmr:2.23(6h,s),2.28(2h,t),2.71(3h,s),2.89(2h,t),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+488
n-(2-{2-二甲氨基乙基-甲氨基}-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺甲磺酸盐
将上步得到的n-(2-{2-二甲氨基乙基-甲氨基}-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)-2-烯酰胺20.5g(1.0eq)加入到500ml三口瓶中，溶于120ml乙醇和80ml乙酸乙酯，室温下滴加4.1g甲磺酸(1.05eq)+40ml乙酸乙酯，约1小时滴完，滴完后于该温度保温1.5-2小时，然后缓慢冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯/乙醇溶液(2:1，v/v)洗涤1次后，过滤，烘干，得到黄色固体，收率88％。
实施例4
n-(2-{2-二甲氨基乙基-(甲基-d3)氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
制备方法与n-(2-{2-二甲氨基乙基-甲氨基}-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺相同，使用n1-(2-二甲基氨基乙基)-5-(甲氧基)-n1-(甲基-d3)-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺替换n1-(2-二甲基氨基乙基)-5-(甲氧基-d3)-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺，收率70％。
1hnmr:2.23(6h,s),2.28(2h,t),2.89(2h,t),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+488
n-(2-{2-二甲氨基乙基-(甲基-d3)氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺甲磺酸盐
制备方法与n-(2-{2-二甲氨基乙基-甲氨基}-4-(甲氧基-d3)-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺甲磺酸盐相同，黄色固体，收率79％。
实施例5
n-(2-[2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
冰浴条件下向n1-(2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(中间体4，10g，21.32mmol)在thf(95ml)和水(9.5ml)中的经搅拌溶液中添加氯丙酰氯(3.28g,25.59mmol)。将该混合物于室温下搅拌15分钟，然后添加naoh(3.48g，85.28mmol)。将所得混合物加热到65℃并维持10小时。然后将该混合物冷却到室温，添加ch3oh(40ml)和水(70ml)。将所得混合物搅拌过夜。通过过滤收集所得固体，用水(25ml)清洗，于50℃下干燥12小时，获得标题化合物(7.0g，94％)。
1hnmr:2.23(6h,s),2.28(2h,t),2.71(3h,s),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+487
于50℃下向n-(2-[2-二甲氨基-1,1-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺(4.44g，9.11mmol)在丙酮(45.5ml)和水(4.55ml)中的经搅拌溶液中添加在丙酮(4.55ml)中的甲磺酸(0.893g，9.11mmol)溶液。将所得混合物搅拌1.5小时。通过过滤收集所得固体，于80℃下真空干燥过夜，获得固体形式的标题盐(4.9g，94％)。
实施例6
n-(2-[2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺
冰浴条件下向n1-(2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基)-5-甲氧基-n1-甲基-n4-[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(中间体5，10g，21.32mmol)在thf(95ml)和水(9.5ml)中的经搅拌溶液中添加氯丙酰氯(3.28g,25.59mmol)。将该混合物于室温下搅拌15分钟，然后添加naoh(3.48g，85.28mmol)。将所得混合物加热到65℃并维持10小时。然后将该混合物冷却到室温，添加ch3oh(40ml)和水(70ml)。将所得混合物搅拌过夜。通过过滤收集所得固体，用水(25ml)清洗，于50℃下干燥12小时，获得标题化合物(7.0g，94％)。
1hnmr:2.23(6h,s),2.71(3h,s),2.89(2h,t),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+487
于50℃下向n-(2-[2-二甲氨基-2,2-二氘代乙基-甲氨基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基}丙-2-烯酰胺(4.44g，9.11mmol)在丙酮(45.5ml)和水(4.55ml)中的经搅拌溶液中添加在丙酮(4.55ml)中的甲磺酸(0.893g，9.11mmol)溶液。将所得混合物搅拌1.5小时。通过过滤收集所得固体，于80℃下真空干燥过夜，获得固体形式的标题盐(4.9g，94％)。
实施例7
n-(2-[2-二甲氨基乙基-甲氨基]-5-{[4-(1h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}-4-甲氧基苯基)丙-2-烯酰胺
将丙烯酰氯(0.584ml，1m在ch2cl2中，0.58mmol)的溶液逐滴添加到n1-(2-二甲氨基乙基)-n4-[4-(1h-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-n1-甲基苯-1,2,4-三胺(252mg，0.58mmol)在ch2cl2(10ml)中的溶液中，然后将该混合物于-5℃下搅拌1小时。然后将该混合物用ch2cl2(100ml)稀释，将所得溶液用饱和nahco3(25ml)、水(25ml)、然后用饱和盐水(25ml)清洗，然后进行真空浓缩。利用fcc进行纯化，用在ch2cl2中的0-30％ch3oh洗脱，获得白色固体的标题化合物(76mg，27％)。
1hnmr:2.23(6h,s),2.28(2h,t),2.71(3h,s),2.89(2h,t),3.88(3h,s),5.75(1h,dd),6.25(1h,dd),6.46(1h,dd),7.03(1h,s),7.12(1h,t),7.21-7.28(2h,m),7.55(1h,d),7.90(1h,s),8.24(1h,d),8.35(1h,d),8.65(1h,s),9.15(1h,s),10.24(1h,s)
m/z:es+mh+485
生物学实施例
实施例1
将calu3(wt)、calu6(wt)、nci-h1975(t790m/l858r)和pc9(ex19del)pc9vanr(ex19del/t790m)细胞系接种在384孔板上，每孔500-1000个细胞(取决于细胞系)，每孔加入70μl含10％胎牛血清、2mml-谷氨酰胺以及1％青霉素/链霉素的rpmi培养基。同时以每个细胞系双行的形式制备第0天的培养板。细胞在37℃，5％co2下贴壁过夜。次日使用echoliquidhandler向测定板中加入滴定的供试化合物，处理后的细胞在37℃，5％co2下再孵育72小时。各化合物均按11点剂量反应测定，最高浓度为10μm，1:3稀释。与给药测定板平行的第0天培养板使用sytoxgreen和皂苷处理，并测定各孔中的活细胞数。在将化合物处理的培养板孵育72小时后，每孔加入5μl2μm的sytoxgreen，并将培养板在室温下孵育1小时。每孔的荧光细胞数用acumen测定。每孔加入10μl0.25％的皂苷，将培养板在室温下孵育过夜。每孔中的荧光细胞总数在acumen上读取。从细胞总数中减去死亡细胞数计算活细胞数。将各化合物获得的数据输入合适的软件包以执行曲线拟合分析。基于此数据通过计算获得50％效果所需的化合物浓度来确定ic50值。
表1结果显示，实施例1-6的化合物与实施例7的化合物(对照组)对表达野生型egfr的细胞系和表达突变型egfr(ex19del、l858r和/或t790megfr)的细胞系的增殖抑制作用相当。
表1测试化合物对表达突变型或野生型egfr的一组nsclc细胞系增殖的抑制作用(ic50μm)
实施例2
募集8名男性健康志愿者进行单次给药药代动力学对比研究。将受试者随机分为2组，实施例7的化合物(对照组)和实施例1-6的化合物组分别4名受试者。7天清洗期后重新分组对其他实施例化合物进行试验。受试者禁食10小时后，次日早上进食统一标准餐后开始口服给予受试物，剂量均为0.4mg/kg(此剂量约为动物急性毒性剂量1/50，因此对受试者没有潜在的毒副作用)。整个研究期间，受试者需要在设定的9个时间点(给药前、给药后30分钟、给药后1、2、3、6、12、24、48、72小时)采集血样，用于测定血浆中的药物浓度。在每个采样点分别采集约5ml静脉全血置干燥的肝素或edta试管内，4℃放置2小时后进行4℃离心(6000rpm，10min)分离血清，血清转移至样品冻存管中，-20℃冰箱保存至测定。采用反相高效液相色谱(hplc)加turboion
研究结果如下表2所示，实施例1-6的化合物的auc0-t与实施例7的化合物(对照化合物)相比增加了46-84％，t1/2与对照化合物相比增加了54-88％。
表2健康受试者单次给药药代对比研究结果
实施例3
实验方法：裸小鼠(balb/c裸小鼠，6-8周龄，20-22g)皮下接种人类细胞系h1975(l858r/t790m)，待肿瘤生长至100-300mm3后，将动物随机分为5组，其中受试样品每组8只，溶剂组12只，雌性。分别为实施例1-6的化合物2.5、5、10mg/kg/d3个剂量组，实施例7的化合物5mg/kg/d剂量组及溶剂对照组。以上各组连续灌胃给予共21天。实验中每周测2-3次瘤体积，称瘤重。肿瘤体积(tv)、相对肿瘤体积(rtv)、肿瘤生长抑制率(tgi)、肿瘤增殖率(t/c)公式如下：
tv＝1/2a×b2(其中a和b分别表示肿瘤的长径和短径)
rtv＝tvdt/tvd0
相对肿瘤增殖率(t/c％)＝rtv治疗组/rtv对照组×100％
肿瘤生长抑制率(tgi％)＝100％×(1-(tvdt(治疗组)-tvd0(治疗组))/(tvdt(对照组)-tvd0(对照组)))
实验结果：实施例1-6的化合物均明显抑制人肺癌h1975裸小鼠移植瘤的生长，导致部分小鼠肿瘤消退。实施例7的化合物对h1975也有疗效。在同等剂量下，实施例1-6的化合物的疗效明显优于实施例7的化合物，约增加19-43％。荷瘤小鼠对以上化合物均能较好耐受。
表3实施例1-7的化合物对人细胞系h1975裸小鼠移植瘤的疗效
本说明书中所引用的所有专利、专利申请公开、专利申请及非专利出版物，均以其全文并入本文供参考。
自前文可以理解，虽然为了说明的目的在本文中描述了本发明的具体实施方案，但可在不偏离本发明的精神与范围下进行各种修正。因此，本发明的范围应当仅受所附的权利要求的限定。