基于血清exosomalmicroRNAs的结直肠癌转移检测的引物和试剂盒的制作方法

文档序号:11838334阅读:来源:国知局
技术总结
本发明公开了一种基于血清exosomal microRNAs的结直肠癌转移检测的引物和试剂盒及,利用二代高通量测序技术对淋巴结转移结直肠癌患者和未发生淋巴结转移结直肠癌患者血清exosomal microRNAs差异表达谱进行筛选,随后分别选取上调表达最明显的miR‑483‑5p和下调表达最明显的miR‑451a进行大样本验证,发现miR‑483‑5p、miR‑451a具有较好的结直肠癌淋巴结转移的鉴别诊断效能。同时,本发明使用了miR‑191‑5p、U6组合作为内参基因,对标本中的miR‑483‑5p、miR‑451a进行相对定量分析,提高了数据准确性。本发明根据公式E=10(‑1/Slope)‑1,计算扩增效率(E),根据公式Q=(E+1)‑△Cq计算miR‑483‑5p、miR‑451a相对miR‑191‑5p、U6的表达量,避免了传统2‑△△Cq法必须要求PCR扩增效率为100%的限制,使结果分析更加可靠。

技术研发人员:张欣;王传新;张义
受保护的技术使用者:山东大学齐鲁医院
文档号码:201610473609
技术研发日:2016.06.24
技术公布日:2016.11.16

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