本发明涉及饲料添加剂技术领域，具体涉及一种阿魏酸衍生物饲料添加剂的制备方法及其应用，比如该饲料添加剂主要适用于罗非鱼、草鱼和团头鲂等淡水鱼。
背景技术：
近年来,我国水产动物高密度、集约化的发展趋势十分迅猛。同时,随着人民生活水平的不断提高,水产养殖业正面临着实施从追求产量增长转向以追求质量为主、高产优质高效并举的重大转折。为了降低饲料成本,提高经济效益和生态效益,生产高品位、低消耗的水产动物,饲料添加剂尤其是非营养性饲料添加剂的作用愈来愈被人们所重视。其中，天然植物提取物作为鱼类饲料添加剂安全环保，有效成分可量化控制，并具有非特异抗菌作用，能够调节机体免疫机能，有效改善养殖产品的肉质和风味，提高产品的商业价值。阿魏酸普遍存在于植物当中，具有较强的抗氧化、抗菌消炎、抗血栓、抗癌、止痛以及增强免疫能力等作用，因而其在医药、保健品、化妆品原料和食品添加剂等方面有着广泛的用途。在养殖领域，阿魏酸作为饲料添加剂可以提高猪、獭兔、肉鸡等的生长性能，改善肌肉品质。但阿魏酸的脂溶性较差，较难透过生物膜脂质双分子层，因此对阿魏酸的结构进行修饰，得到阿魏酸衍生物，有利于其作用效果的发挥。对天然产物的结构进行修饰是合理、安全、有效地利用活性天然产物的重要环节，常通过化学和生物学等方法对活性天然产物的结构进行衍生化、转化，从而达到降低毒性、提高活性和生物利用度的目的。
技术实现要素：
本发明针对现有技术的上述不足，提供一种具有良好的脂溶性，添加到饲料中可以提高饲料利用率，促进鱼的健康生长，提高鱼体的抗氧化能力，增强免疫力、方法简单、收率高的阿魏酸衍生物饲料添加剂的制备方法。
为了解决上述技术问题，具体的，本发明的阿魏酸衍生物饲料添加剂的制备方法，该方法的包括步骤：
(1)以阿魏酸为原料，将醋酸酐作为溶剂，浓硫酸为催化剂，室温搅拌，过滤得到乙酰阿魏酸；
(2)将乙酰阿魏酸置于反应容器中，以乙醇为溶剂，浓盐酸为催化剂，回流3-6小时，然后去除溶剂，再经柱层析得到目标产物。
本发明的阿魏酸衍生物饲料添加剂，其结构如下式(I)所示：
本发明上述步骤(1)中阿魏酸的与浓硫酸的摩尔比为20～50:1。
作为优选，步骤(1)中所述的阿魏酸与浓硫酸的摩尔比为50:1。
本发明上述步骤(1)中100mL醋酸酐中含有阿魏酸0.18mol。
本发明上述步骤(2)中所述的乙酰阿魏酸与浓盐酸的摩尔比为20～50:1。
作为优选，步骤(2)中所述的乙酰阿魏酸与浓盐酸的摩尔比为50:1。
本发明上述步骤(2)中柱层析是以硅胶为填充料，以石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂为淋洗剂，其中石油醚和乙酸乙酯的体积比为5:1。
本发明上述步骤(2)中100mL乙醇中含有乙酰阿魏酸0.15mol。
与现有技术相比，该制备方法具有以下特点：
1)本发明方法合成简单，成本低，产率高，产率85～90％。
2)本发明方法所使用的试剂毒性小，反应速度快，试剂用量小。
本发明所述的阿魏酸衍生物饲料添加剂的使用量为50～400mg/kg饲料(优选范围)。
进一步的，本发明所述饲料添加剂的使用量为50～200mg/kg饲料(最佳范围)。
更进一步的，本发明所述饲料添加剂的使用量为100mg/kg饲料(最佳具体点)。
本发明将所述饲料添加剂按照100mg/kg饲料的添加比例添加到饲料中，预混料须通过逐级扩大预混进入基础料。
本发明所述阿魏酸衍生物饲料添加剂进行如上使用量的优选：
1)饲料添加剂的使用量低于50mg/kg，对鱼类的促生长作用不明显。
2)饲料添加剂的使用量高于400mg/kg，显著增加了鱼饲料的成本。
3)饲料添加剂的最佳添加量100mg/kg，既不显著增加成本，又能有效发挥添加剂对鱼类的生物活性作用。
本发明的阿魏酸衍生物饲料添加剂可以用于畜牧、家禽以及其他水产动物，特别是水产动物比如罗非鱼、草鱼和团头鲂等。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
本发明显著提高了阿魏酸衍生物的脂溶性，添加到饲料中有效的提高了罗非鱼、草鱼和团头鲂的健康、生长速度、抗氧化状态以及免疫能力，一方面提高了养殖生产者的经济效益，另一方面也有效缓解了因疾病大量使用抗生素的问题。此外，该添加剂还可以用于畜牧、家禽以及其他水产动物。
具体实施方式
下面通过实施例进一步详细描述本发明，但本发明不仅仅局限于以下实施例，任何依据本发明技术方案的合理变换，均认为落入本发明的保护范围内。
实施例
(1)以阿魏酸为原料，将醋酸酐作为溶剂，浓硫酸为催化剂，室温搅拌，过滤得到乙酰阿魏酸；所述的阿魏酸与浓硫酸的摩尔比为50:1，醋酸酐为溶剂、100mL醋酸酐中含有阿魏酸0.18mol；经过核磁检测，具体检测结果为：1H NMR(DMSO-d6,TMS,300MHz):δ＝12.39(s,1H),7.58-7.47(m,2H),7.26-7.23(d,1H),7.11-7.09(d,1H),6.60-6.54(d,1H),3.80(s,3H),2.24ppm(s,3H).13C NMR(DMSO-d6,TMS,75MHz):168.8,168.0,151.5,143.7,141.2,133.6,123.5,121.7,119.9,112.2,56.3,20.7.IR:1750cm-1,2500-3500cm-1,COOH；证实本发明此步骤获得的产物即为乙酰阿魏酸。
(2)将乙酰阿魏酸置于反应容器中，以乙醇为溶剂、100mL乙醇中含有乙酰阿魏酸0.15mol，浓盐酸为催化剂，回流5小时，然后去除溶剂，再经柱层析得到目标产物；所述的乙酰阿魏酸与浓盐酸的摩尔比为50:1，柱层析是以硅胶为填充料，以石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂为淋洗剂，其中石油醚和乙酸乙酯的体积比为5:1；经过核磁检测，具体检测结果为：1H NMR(CDCl3,TMS,300MHz):δ＝7.64(s,1H),7.59(s,1H),7.08-7.03(m,2H),6.93-6.90(d,1H),6.31-6.26(d,1H),5.88(s,1H),4.29-4.22(m,2H),3.92(s,3H),1.61(s,1H),1.36-1.31ppm(m,3H).13C NMR(CDCl3,TMS,75MHz):δ167.5,148.1,146.9,144.9,127.1,123.2,115.7,114.9,109.5,60.5,56.1,14.5.IR:1730-1740cm-1,C＝O,1200cm-1,C-O-C；证实本发明获得的产物即为本发明的目标产物。
应用效果测试：
(1)一种阿魏酸衍生物饲料添加剂在罗非鱼饲料中的应用效果。在基础饲料中添加阿魏酸及所述阿魏酸衍生物添加剂，共3个处理组，每个处理组设3个平行，每个平行放养25尾罗非鱼幼鱼。在室内循环水养殖系统中养殖8周后，测定了罗非鱼的生长指标、部分血清指标以及血清和肝脏的抗氧化酶活性。
表1阿魏酸和阿魏酸衍生物对罗非鱼生长性能的影响
表2阿魏酸和阿魏酸衍生物对罗非鱼肝脏和血清抗氧化酶的影响
表3阿魏酸和阿魏酸衍生物对罗非鱼血清指标的影响
以上结果显示，与阿魏酸作为添加剂相比较，阿魏酸衍生物饲料添加剂显著提高了罗非鱼幼鱼的生长性能，同时有效的增强了鱼体的抗氧化能力，改善了肝功能，提高了免疫力。
(2)一种阿魏酸衍生物饲料添加剂在草鱼饲料中的应用效果。在基础饲料中添加阿魏酸及所述阿魏酸衍生物添加剂，共3个处理组，每个处理组设3个平行，每个平行放养25尾草鱼。在室内循环水养殖系统中养殖8周后，测定了草鱼的生长指标、部分血清指标以及血清和肝脏的抗氧化酶活性。
表4阿魏酸和阿魏酸衍生物对草鱼生长性能的影响
表5阿魏酸和阿魏酸衍生物对草鱼肝脏和血清抗氧化酶的影响
表6阿魏酸和阿魏酸衍生物对草鱼血清指标的影响.
以上结果显示，与阿魏酸作为添加剂相比较，阿魏酸衍生物饲料添加剂显著提高了草鱼的生长性能，同时有效的增强了鱼体的抗氧化能力，改善了肝功能，提高了免疫力。
(3)一种阿魏酸衍生物饲料添加剂在团头鲂饲料中的应用效果。在基础饲料中添加阿魏酸及所述阿魏酸衍生物添加剂，共3个处理组，每个处理组设3个平行，每个平行放养25尾团头鲂。在室内循环水养殖系统中养殖8周后，测定了团头鲂的生长指标、部分血清指标以及血清和肝脏的抗氧化酶活性。
表7阿魏酸和阿魏酸衍生物对团头鲂生长性能的影响
表8阿魏酸和阿魏酸衍生物对团头鲂肝脏和血清抗氧化酶的影响
表9阿魏酸和阿魏酸衍生物对团头鲂血清指标的影响.
以上结果显示，与阿魏酸作为添加剂相比较，阿魏酸衍生物饲料添加剂显著提高了团头鲂的生长性能，同时有效的增强了鱼体的抗氧化能力，改善了肝功能，提高了免疫力。