1.一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)以目标DNA为模板设计两条DNA发夹探针H1和H2;
(2)在目标存在的情况下,目标DNA与H1和H2退火杂交,用连接酶将H1和H2连接形成双哑铃DNA结构;
(3)以双哑铃DNA为模板进行环介导等温扩增反应,得到环介导等温扩增产物;
(4)向环介导等温扩增产物中加入DNA双链特异性染料SYBR Green I。
2.根据权利要求1所述的一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:所述H1包含一段单链突出端与目标DNA的3'端互补杂交。
3.根据权利要求1所述的一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:所述H1的3'末端包含目标DNA单碱基多态性位点。
4.根据权利要求1所述的一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:所述H2包含一段单链突出端与目标DNA的5'端互补杂交。
5.根据权利要求1所述的一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:所述步骤(2)中连接酶为Taq DNA连接酶。
6.根据权利要求1所述的一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,其特征在于:所述步骤(3)中环介导等温扩增反应的温度为50~60℃。