技术特征：
技术总结
本发明提供了一种人原代肝细胞的分离及培养方法，包括以下步骤：(1)无菌条件下切取新鲜人肝组织，4℃密封运回实验室；(2)将组织放入预冷无菌含双抗的PBS缓冲液中洗涤数次除去血液、结缔组织；(3)预热的PBS缓冲液针刺法灌洗；(4)预热的HBSS缓冲液针刺法灌洗；(5)预热的GBSS混合酶液针刺法灌洗；(6)剪碎组织用GBSS混合酶液消化，离心，弃上清；(7)取细胞滤液用锥虫蓝染色检测细胞活性；(8)细胞计数后用完全培养基重悬接种到包被后的培养瓶，置于37℃、5％CO2环境中培养；(9)细胞形态鉴定；(10)ELISA法检测；(11)RT‑PCR检测。本发明提供的一种人肝细胞的分离及培养方法，操作简单，所得细胞数量多，成活率高，是一种理想的人原代肝细胞分离与培养方法，为实验提供可靠的细胞资源。
技术研发人员：不公告发明人
受保护的技术使用者：江苏齐氏生物科技有限公司
技术研发日：2016.11.15
技术公布日：2018.05.25