诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的方法与流程

文档序号:12411458阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的方法,其特征在于,包括:

利用第一培养基对所述脐带血单个核细胞进行扩增培养,以便得到扩增后的造血干细胞;以及

利用第二培养基对所述扩增后的造血干细胞进行诱导培养,以便得到所述粒系细胞,

所述第一培养基为spemspan培养基,

所述第二培养基为含有第一添加物的X-VIVOTM15培养基,且所述第一添加物包括重组人血小板生成素、重组人干细胞因子以及重组人粒细胞集落刺激因子。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述spemspan培养基含有第二添加物,所述第二添加物包括:重组人血小板生成素、重组人干细胞因子、重组人白细胞介素-3以及重组人白细胞介素-6。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述第二添加物进一步包括下列的至少一种:FMS样酪氨酸激酶3、芳香烃受体抑制剂和芳香烃受体拮抗剂的增强剂,

优选地,所述第二添加物进一步包括芳香烃受体抑制剂和芳香烃受体拮抗剂的增强剂。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述第二培养基中,

所述重组人血小板生成素的浓度为30~100ng/mL,优选50ng/mL;

所述重组人干细胞因子的浓度为30~100ng/mL,优选50ng/mL;

所述粒细胞集落刺激因子的浓度为30~100ng/mL,优选50ng/mL。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在所述第一培养基中,

所述重组人血小板生成素的浓度为5~20ng/mL,优选10ng/mL;

所述重组人干细胞因子的浓度为30~100ng/mL,优选50ng/mL;

所述重组人白细胞介素-3的浓度为10~50ng/mL,优选20ng/mL;

所述重组人白细胞介素-6的浓度为10~50ng/mL,优选20ng/mL;

所述芳香烃受体抑制剂的浓度为0.3~0.8μM,优选0.5μM;

所述芳香烃受体拮抗剂的增强剂的浓度为0.3~0.8μM,优选0.5μM。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述扩增培养的时间为5~10天,优选7天。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导培养的时间为14~25天,优选21天。

8.一种用于诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的试剂盒,其特征在于,包括:

第一培养基,所述第一培养基用于对所述脐带血单个核细胞进行扩增培养,以便得到扩增后的造血干细胞;以及

第二培养基,所述第二培养基用于对所述扩增后的造血干细胞进行诱导培养,以便得到所述粒系细胞,

其中,所述第一培养基和第二培养基是如权利要求1~5任一项所述的诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的方法定义的。

9.一种用于诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的系统,其特征在于,包括:

第一培养装置,所述第一培养装置用于利用第一培养基对所述脐带血单个核细胞进行扩增培养,以便得到扩增后的造血干细胞;以及

第二培养装置,所述第二培养装置用于利用第二培养基对所述扩增后的造血干细胞进行诱导培养,以便得到所述粒系细胞,

其中,所述第一培养基和第二培养基是如权利要求1~5任一项所述的诱导脐带血单个核细胞分化为粒系细胞的方法定义的。

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