1.一种利用PCR-RFLP检测绵羊PCNP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以待测绵羊全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增绵羊PCNP基因片段;用限制性内切酶SPhI酶切PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定绵羊PCNP基因上单核苷酸多态性位点的基因型;
所述的引物对P为:
上游引物:5’-AGAATAGCATGGGCAGAA-3’;
下游引物:5’-TCATTTCTGTGGGACACC-3’。
2.如权利要求1所述的利用PCR-RFLP检测绵羊PCNP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55.3℃退火30s,72℃延伸50s,35个循环;72℃延伸10min。
3.如权利要求1所述的利用PCR-RFLP检测绵羊PCNP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于,所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为1.0%。
4.如权利要求1所述的利用PCR-RFLP检测绵羊PCNP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于,所述的单核苷酸多态性位点表现为A或G的单核苷酸多态性,具有AA、GA以及GG三种基因型,电泳结果分别为:AA型表现为377bp和309bp两个条带;GA型表现为686bp,377bp和309bp三个条带;GG型表现为686bp一个条带。
5.如权利要求1所述的利用PCR-RFLP检测绵羊PCNP基因单核苷酸多态性的方法在绵羊辅助选择和分子育种中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于:建立基因型为AA纯合型的绵羊群体,提高绵羊产羔率。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述绵羊选自湖羊或小尾寒羊。