本发明涉及一种复合菌剂及其在污水处理中的应用，属于工业微生物技术领域。
背景技术：
在我国，水污染仍是一个严峻的问题。工业废水、城市生活废水排量都很大。全国地下水受到点状或面状的污染。油脂废水主要来源工业、农业、运输和生活废水排放。油脂覆盖在水体表面，阻断空气中的氧向水体扩散，从而使水体自净能力下降，水中生态平衡遭到破坏。目前。处理油脂废水的方法主要有物理法、化学法和生物法。物理法主要是根据水和油互不相容，密度不同，利用重力和离心力将两者分散，如重力分离法、粗粒化法、过滤吸附法、膜分离法等等。化学法主要是利用化学物质对废水中的有机物进行化学分解，对有用有机物质造成损失，也容易造成二次污染。常用方法有化学破乳除油和化学氧化等。生物法处理油脂废水主要是利用微生物将油脂水解成甘油、脂肪酸，最终分解氧化成水喝二氧化碳等产物。生物法处理废水中的油脂具有投入小，效率高，无二次污染等优点。
技术实现要素：
本发明的第一个目的是提供一种用于污水处理的复合菌剂，所述菌剂为活性生物制品，其活性成分包括沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母。
在本发明的一种实施方式中，所述菌剂按如下方法制备获得：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别培养至OD600＝1.2～1.5，按照1:1.5～2:1.5～2的比例、10～15％体积比的总接种量共同接种于发酵培养基中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天；所述发酵培养基成分为玉米浆50～70g/L、尿素1.0％～1.5％、氯化钙0.5～1.5g/L、磷酸吡哆醛0.3～0.6g/L。
在本发明的一种实施方式中，所述菌剂中的解脂耶氏酵母为解脂耶氏酵母CGMCC2.1405。
本发明的第二个目的是提供所述菌剂的制备方法，是将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别分别培养至OD600＝1.2～1.5，按照1:1.5～2:1.5～2的比例、10～15％体积比的总接种量共同接种于发酵培养基中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天.
在本发明的一种实施方式中，所述发酵培养基成分为玉米浆50～70g/L、尿素10～15g/L、氯化钙0.5～1.5g/L、磷酸吡哆醛0.3～0.6g/L。
本发明的第三个目的是提供一种污水处理方法，是将所述的复合菌剂以5～10％体积比投入至污水中，35～37℃反应24～72h。
本发明还提供所述菌剂在污水处理中的应用。
有益效果：本发明提供了一种复合菌剂，能够有效降解油脂废水中的油脂。将本发明的菌剂接种至油脂废水中反应72h后，油脂降解率达96.8％，在1m3的中试放大中也取得了理想的效果，具备大规模工业应用的潜力。
具体实施方式
培养基：
沼泽红假单胞菌培养基：酵母膏l.5g/L、蛋白胨2.0g/L、NaCl 0.5g/L、KH2PO40.6g/L,K2HPO4 0.9g/L。
解脂耶氏酵母培养基：蔗糖1g/L、蛋白胨25g/L、尿素1g/L、硫酸镁1g/L、氯化钠15g/L、吐温-801ml/L。
短小芽孢杆菌培养基：大豆蛋白15g/L、红糖20g/L、硫酸铵10g/L。
油脂降解率的测定：
采用UV-2450型紫外-可见光分光光度计对反应液中油脂含量进行测定。取反应液10mL，加1.5mL硫酸酸化后转入分液漏斗，取5mL甲苯加入分液漏斗，震荡后静置分层萃取。将萃取过后的水样到回原分液漏斗中，加5mL甲苯重复萃取一次。将萃取液混匀用甲苯稀释，在324nm波长下测定萃取液的吸光值。根据油脂与吸光值的标准曲线可计算出油脂的浓度。
实施例1
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50g/L、尿素15g/L、氯化镁1.0g/L)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为69.7％。
实施例2
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50g/L、尿素15g/L、氯化钙1.0g/L)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为75.3％。
实施例3
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50g/L、尿素15g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为72.6％。
实施例4
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50、尿素15g/L、氯化钙1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为90.3％。
实施例5
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1.5：1.5的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50、尿素15g/L、氯化钙1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为95.4％。
实施例6
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：2：2的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50、尿素15g/L、氯化钙1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为96.8％。
实施例7
(1)菌剂的制备：将沼泽红假单胞菌、短小芽孢杆菌和解脂耶氏酵母分别在各自的培养基中培养至OD600＝1.2，按照1：1.5：2的比例、15％体积比的接种量共同接种于发酵培养基(玉米浆50、尿素15g/L、氯化钙1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接种后将培养基密封置于37℃，静置发酵3～5天。
(2)降解污水油脂：将步骤(1)制备的复合菌剂以10％体积比投入至500mL油脂废水(含油脂40％～50％)中，37℃培养箱中反应72h。
对反应初始及反应72h后的污水中油脂含量进行检测，结果显示，反应72h后油脂降解率为95.2％。
实施例8
按实施例6的方法制备菌剂，将菌剂按10％体积比投入至1m3规模的污水处理池中，37℃反应72h，结果显示，反应72h后油脂降解率为95.8％。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。