一种提高细菌转化效率的方法与流程

文档序号:12412105阅读:来源:国知局
技术总结
本发明公开了一种提高细菌转化效率的方法,主要包括以下步骤:1)受体菌的培养;2)细胞EPS的去除;3)感受态细胞的制备;4)转化:感受态细胞悬液,加入质粒DNA溶液,冰上放置30分钟;热击后迅速置于冰上冷却,加入LB液体培养基,混匀后37℃振荡培养1小时,使细菌恢复正常生长状态,并表达质粒编码的抗生素抗性基因,摇匀后吸取100l涂布于含抗生素的筛选平板上,正面向上放置半小时,待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿,37℃培养16‑24小时;根据生长情况对菌落数进行计数。本发明具有转化效率高、操作步骤简单、温度和细菌生长条件要求低、革兰氏阴性菌和阳性菌通用的特点,对分子生物学与基因工程技术领域具有重要的意义。

技术研发人员:康福星;杨兵;高彦征
受保护的技术使用者:南京农业大学
文档号码:201611181649
技术研发日:2016.12.20
技术公布日:2017.05.31

当前第3页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1