一种可视化密封性核酸扩增及试纸检测装置的制作方法

本实用新型涉及基因恒温扩增的快速定性检测技术领域，特别涉及一种可视化密封性核酸扩增及试纸检测装置。

背景技术：

随着科学技术的进步，核酸检测因为特异性好、灵敏度高、检测速度相对较快等特点而广泛应用于医学诊断、食品安全检测等领域中。由于常规的核酸检测需要用到较多的昂贵、精密仪器（如核酸扩增仪、电泳仪等）、检测时间相对较长、不利于装置的小型化开发和应用于现场检测。因此，近年来，一些新的恒温扩增技术发展很快，如交叉引物恒温扩增技术（CPA）、环介导恒温扩增技术（LAMP）、链置换扩增（SDA）、依赖解旋酶的扩增（HDA）等。这些恒温核酸扩增技术已开始应用于快速检测领域，同时结合新兴的非光学检测方法如电化学方法、比色法、浊度法，以及免疫胶体金核酸试纸条，实现了对目标核酸的快速检测，这些恒温扩增及检测技术对装置的要求大为简化，仅需要恒温水浴或金属浴就能实现核酸扩增，但这些方法有的需要开盖操作，极容易造成气溶胶污染，有的检测灵敏度不高，结果不易判断。因此，开发密闭、小型化、便携式的核酸检测装置，将其与现有的检测方法相结合显得越来越重要。

胶体金式的核酸快速检测试纸条因其检测特异性、高灵敏度和简单便携的特性而受到广泛关注，现场快速检测使用时通常要配合一次性的检测装置使用。但目前商业化的快速检测试纸条装置设计相对复杂，生产成本相对较高，不利于推广应用。因此开发简便易行，成本低廉的核酸扩增与试纸条检测一体化装置，十分必要。

技术实现要素：

本实用新型的目的在于提供一种结构简单、制作容易、成本低、操作简单、核酸恒温扩增后不需要开盖而直接试纸条检测、适合于现场检测和基层人员使用的可视化密封性核酸扩增及试纸检测装置。

本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种可视化密封性核酸扩增及试纸检测装置，包括上盖（1）、核酸检测试纸条（2）及扩增管（3），所述上盖内的顶部中心处设有夹持部（11），所述核酸检测试纸条的上端与夹持部卡接，所述核酸检测试纸条的下端设有用于吸收核酸扩增试剂的吸水部（21），所述上盖的外侧壁上设有外凸的卡环（12），所述扩增管上端的内侧壁上设有与卡环相配的卡槽（31），所述扩增管底部中心处设有下凹的核酸扩增试剂存放部（32）。

作为优选，所述上盖包括顶盖（13）和下延部（14），下延部的上部直径大于下部直径，下延部整体呈倒置的凸形。

作为优选，所述卡环包括上卡环和下卡环，上卡环位于下延部的上部，下卡环位于下延部的下部。

作为优选，所述扩增管包括上管部（33）和下管部（34），上管部的直径大于下管部，所述核酸扩增试剂存放部与下管部的底部连通。

作为优选，所述卡槽包括上卡槽、中卡槽和下卡槽，上卡槽位于上管部的上端，中卡槽位于上管部的下端，下卡槽位于下管部的上端。

作为优选，所述夹持部由两片塑料夹片组成，两片塑料夹片的间隙为1mm。因为大部分的免疫胶体金核酸检测试纸条的片材厚度约1-1.5mm，这样免疫胶体金核酸检测试纸条可以直接挤入两片塑料夹片而将试纸条固定。

作为优选，所述核酸扩增试剂存放部的直径为6-7mm，深度为5mm。由于通常核酸扩增所需要的液体非常少，在10-100uL，因此，核酸扩增试剂存放部部设置成比扩增管直径要小的反应部位。核酸扩增的试剂，如酶、探针、dNTP等均以玻璃化形态存放于核酸扩增试剂存放部，量通常在5-20uL。

作为优选，当上卡环与上卡槽卡合时，核酸检测试纸条的底部与核酸扩增试剂存放部的顶部齐平。此时，可以将本实用新型放入恒温水浴或恒温金属浴中进行恒温扩增。上卡环与上卡槽卡合时主要起限位和密封作用，此时，核酸检测试纸条下端的吸水部刚好未进入核酸扩增试剂存放部内，保证在恒温扩增时，不会吸到核酸扩增试剂。

作为优选，当上卡环与中卡槽卡合、下卡环与下卡槽卡合时，核酸检测试纸条的吸水部位于核酸扩增试剂存放部内。恒温扩增步骤完成后进行检测时，再次用力按压上盖，当上卡环与中卡槽卡合、下卡环与下卡槽卡合时，此时，核酸检测试纸条的吸水部置进入核酸扩增试剂存放部，吸水部完全浸没于核酸扩增试剂中。

作为优选，所述扩增管由透明的聚苯乙烯塑料或聚酯塑料制成。扩增管采用全透明、耐较高温度聚苯乙烯或聚酯材质塑料，保证核酸试纸条检测显色时检测线和质控线从外面清晰可见，同时在常规的核酸恒温扩增技术中的恒温（通常60-70^oC）下稳定，不会影响扩增及透明度等。

本实用新型的有益效果是：结构简单、制作容易、成本低、操作简单、核酸扩增过程中全密封，扩增后的检测不需要开盖仅需要直接按压上盖操作，不会有气溶胶污染问题，检测试剂不外泄，可以集中处理，不会造成环境的污染。

附图说明

图1是本实用新型的上盖的一种侧视图。

图2是本实用新型的上盖的一种俯视图。

图3是本实用新型的扩增管的一种侧视图。

图4是本实用新型的装配后扩增时的一种结构视图。

图5是本实用新型的装配后检测时的一种结构视图。

图中：1、上盖，11、夹持部，12、卡环，13、顶盖，14、下延部，2、核酸检测试纸条，21、吸水部，3、扩增管，31、卡槽，32、核酸扩增试剂存放部，33、上管部，34、下管部。

具体实施方式

下面通过具体实施例，并结合附图，对本实用新型的技术方案作进一步的具体说明。

实施例：

一种可视化密封性核酸扩增及试纸检测装置，包括上盖1、核酸检测试纸条2及扩增管3，所述扩增管由透明的聚苯乙烯塑料或聚酯塑料制成。所述上盖包括顶盖13和下延部14，下延部的上部直径大于下部直径，下延部整体呈倒置的凸形；所述上盖内的顶盖中心处设有夹持部11，夹持部由两片塑料夹片组成，两片塑料夹片的间隙为1mm，核酸检测试纸条的上端直接挤入两片塑料夹片的间隙，从而与夹持部卡接。所述核酸检测试纸条的下端设有用于吸收核酸扩增试剂的吸水部21，所述上盖的外侧壁上设有外凸的卡环12，所述扩增管上端的内侧壁上设有与卡环相配的卡槽31。所述扩增管包括上管部33和下管部34，上管部的直径大于下管部，下管部底部中心处设有下凹的核酸扩增试剂存放部32，所述核酸扩增试剂存放部的直径为6-7mm，深度为5mm，所述核酸扩增试剂存放部与下管部的底部连通。

所述卡环包括上卡环和下卡环，上卡环位于下延部的上部，下卡环位于下延部的下部。所述卡槽包括上卡槽、中卡槽和下卡槽，上卡槽位于上管部的上端，中卡槽位于上管部的下端，下卡槽位于下管部的上端。当上卡环与上卡槽卡合时，核酸检测试纸条的底部与核酸扩增试剂存放部的顶部齐平。当上卡环与中卡槽卡合、下卡环与下卡槽卡合时，核酸检测试纸条的吸水部位于核酸扩增试剂存放部内。

以牛基因核酸检测为例说明本实用新型专利的使用。

核酸扩增试剂存放部32含有5uL用于牛基因核酸检测的聚合酶、探针、引物、dNTP等CPA（交叉引物恒温扩增）试剂，并以玻璃化形态存在。往核酸扩增试剂存放部32加入15uL复溶缓冲液，再滴加20uL石蜡油，室温静置2-3分钟使玻璃化试剂充分溶解。将牛基因核酸检测试纸条上端用力插入到夹持部11两片塑料夹片的间隙中，备用。往核酸扩增试剂存放部32加入5uL待测定样本的核酸提取液，用移液器吹打混匀后，将带有牛基因核酸检测试纸条的上盖1插入到扩增管，用力稍压上盖，使上盖的上卡环进入到扩增管的上卡槽卡合，这时扩增管处于密闭状态。此时，将扩增管置于60℃水浴中恒温扩增60min。扩增结束后，取出装置，再次用力按压上盖，使上盖往下移动，上盖的上卡环与扩增管的中卡槽卡合、上盖的下卡环与扩增管的下卡槽卡合，此时，牛基因核酸检测试纸条的吸水部21进入到核酸扩增试剂存放部32，并浸入到扩增液体中，特异性的核酸片段会与液体一起往上移动，当遇到检测试纸条中包埋的特异性抗体时，互相结合，呈现出一条红线，显示阳性。如果，样本中没有牛特异性核酸片段，则没有扩增反应，最后就不会与检测试纸条中包埋的特异性抗体结合，也不会显红色，显示阴性。

以上所述的实施例只是本实用新型的一种较佳的方案，并非对本实用新型作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。