技术特征：
技术总结
一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌，缺失hly基因，其保藏编号为：CCTCC M 2016523。还提供了上述减毒单核细胞增生李斯特氏菌的制备方法，以EGD‑e基因组为模板扩增hly基因的上游片段P1/P2、下游片段P3/P4；然后进行单酶切，产物使用连接酶连接，得到的上下游连接产物与pMD19‑T Vector连接；将连有同源臂的pMD19‑T Vector与pKSV7质粒使用限制性内切酶SmaI和SalI进行双酶切，产物使用连接酶连接，将阳性克隆的质粒抽提后进行SmaI和SalI限制性内切酶双酶切，获得hly基因缺失的Lm减毒菌株。通过实验证明，hly基因敲除后，Lm的毒性下降。
技术研发人员：谢曼曼;刘箐;孙静娟;马俊飞;马兰
受保护的技术使用者：上海理工大学
技术研发日：2017.03.23
技术公布日：2017.08.18