技术领域：
本发明涉及一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂及其制备方法。
背景技术：
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农药的普及曾为人类在农业、林业、生产生活中防治病虫害，保证农产品增产增收、稳产，控制疟疾、斑疹伤寒等疾病起到不可磨灭的作用。但它的不利面也日益引起人们的关注，这些农药在动物体内长期存留、难降解，能够在生物体内长期富集、累积，使处于食物链较高层次的生物面临生命威胁甚至是灭绝风险。
二氯二苯三氯乙烷(即ddt)，它具有结构稳定、耐热、耐酸、脂溶性强、持久性、难降解等特点，是一广谱性有机氯杀虫剂。ddt易溶于人体脂肪并累积，破坏人体免疫功能，降低体内抗体产生，引起肝脏肿大，降低脾、胸腺、淋巴结等器官的代谢速率，干扰雌激素的合成等，给人们的生活健康带来了巨大的问题。近年来，随着人们生活水平的不断提高，果蔬中的农药残留已引起大众关注，常规的ddt残留清洗方法有洗涤剂、淘米水、碱水、盐水等方法：洗涤剂对于ddt的去除效率极高，但其主要物质成分是经化学合成的，非纯天然的，在清洗的过程中会造成环境的二次污染；淘米水为弱碱性水，含有一定的脂溶性物质，可降低ddt的含量，但有些米可能本身就有ddt污染，存在不确定性及风险性；碱水浸泡清洗会使得果蔬中一些脂溶性的营养物质流失，且清洗时不易控制碱水的浓度；盐水渗透性较强会，浓度高时会破坏果蔬表面的细胞结构，造成果蔬组织损伤，营养物质流失；而若只用清水清洗，则只能去掉部分ddt农残，且清洗时间长，效率太低，另外ddt最终进入水中循环易造成二次污染。现有技术对此并没有解决之策。
技术实现要素：
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本发明的目的就是针对现有技术存在的上述缺点，提供了一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂及其制备方法，它绿色环保，纯天然，无污染，在去除ddt过程中不会产生有毒有害的物质，解决了现有技术中存在的问题。
本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：
一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂，由以下重量份数的组份组成：木糖：10-20份，海藻糖：10-30份，葡萄糖：10-20份，酵母膏：3-10份，乳糖：10-15份，植物提取液：30-50份，芽孢杆菌：6-8份，假单胞菌：5-8份，吐温80：3-5份，氯化铁：2-5份，水：700-2500份。
优选的，所述假单胞菌为嗜中温假单胞菌和/或荧光假单胞菌。
优选的，所述植物提取液由如下方法制得：将海藻、香蕉、黄瓜、柠檬、芦荟中的一种或几种打碎，然后加入没过上述碎屑的水并煮沸，最后冷却至室温后真空抽滤取抽滤液即得植物提取液。
一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、将乳糖、葡萄糖、酵母膏溶于水中；
s2、向s1得到的溶液中加入植物提取液；
s3、将s2得到的溶液进行高压灭菌不小于15min得到培养基；
s4、取适量s3得到的培养基分别培养芽孢杆菌、假单胞菌至对数期；
s5、将s4得到的对数期菌液按照1％-5％的比例接种至剩余的s3得到的培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.5-1：2-4；然后以40-80ml/min通入无菌空气，于25℃-37℃，100-150r/min，培养3-8d；
s6、发酵液ph值达到7.0-8.5，有效活菌数达到2-10*108cfu/ml，停止发酵，离心取上清液；
s7、将海藻糖，木糖，吐温80，氯化铁溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品。
优选的，所述植物提取液按照如下步骤制备而成：
s21、选择海藻、香蕉、黄瓜、柠檬、芦荟的一种或几种，然后打碎；
s22、加入重量相当于s21中碎屑质量2-5倍的水，然后煮沸；
s23、将s22得到的产品冷却至室温后真空抽滤得到的抽滤液即为植物提取液。
优选的，在s3中，温度不低于115℃。
优选的，在s4中，菌种培养方法如下：
s41、将所用菌种于28℃-37℃活化1-2min,吸取0.5-2ul进行平板划线；
s42、挑取单菌落接种至s3得到的培养基进行纯种培养，通入无菌空气，于28℃-37℃，50-80r/min，培养至对数期。
与现有技术相比，本发明的优点是：原料全部是可食用组分，既不会对身体造成伤害，也不会造成二次污染；所述菌种皆为广谱性有益微生物，取自植物根系表面，非基因工程合成，具有环境友好性、安全性的特点；所用辅助物质价格低，无毒无害，容易降低，不会造成二次污染；本发明对应的产品可用于清除果蔬表面残留的农药，降解果蔬表面的ddt，将ddt分解为简单的小分子化合物，有效降低ddt的毒性，从而避免ddt流入下水道继续造成污染。
具体实施方式：
为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本发明进行详细阐述。
一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂，由以下重量份数的组份组成：木糖：10-20份，海藻糖：10-30份，葡萄糖：10-20份，酵母膏：3-10份，乳糖：10-15份，植物提取液：30-50份，芽孢杆菌：6-8份，假单胞菌：5-8份，吐温80：3-5份，氯化铁：2-5份，水：700-2500份。
所述假单胞菌为嗜中温假单胞菌和/或荧光假单胞菌；所述芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌中的一种或几种；所述芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌中的一种或几种。
所述植物提取液由如下方法制得：将海藻、香蕉、黄瓜、柠檬、芦荟中的一种或几种打碎，然后加入没过上述碎屑的水并煮沸，最后冷却至室温后真空抽滤取上清液即得植物提取液。
一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、将乳糖、葡萄糖、酵母膏溶于水中；
s2、向s1得到的溶液中加入植物提取液；
s3、将s2得到的溶液进行高压灭菌不小于15min得到培养基；
s4、取适量s3得到的培养基分别培养芽孢杆菌、假单胞菌至对数期；
s5、将s4得到的对数期菌液按照1％-5％的比例接种至剩余的s3得到的培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.5-1：2-4；然后以40-80ml/min通入无菌空气，于25℃-37℃，100-150r/min，培养3-8d；
s6、发酵液ph值达到7.0-8.5，有效活菌数达到2-10*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s7、将海藻糖，木糖，吐温80，氯化铁溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品。
所述植物提取液按照如下步骤制备而成：
s21、选择海藻、香蕉、黄瓜、柠檬、芦荟的一种或几种，然后打碎；
s22、加入重量相当于s21中碎屑质量2-5倍的水，然后煮沸2min以上；
s23、将s22得到的产品冷却至室温后真空抽滤得到的抽滤液即为植物提取液。
在s3中，温度不低于115℃。
在s4中，菌种培养方法如下：
s41、将所用菌种于28℃-37℃活化1-2min,吸取0.5-2ul进行平板划线；
s42、挑取单菌落接种至s3得到的培养基进行纯种培养，通入无菌空气30-50ml/min，于28℃-37℃，50-80r/min，培养至对数期。
实施例1：
s1、将乳糖15克、葡萄糖20克、酵母膏10克溶于水中，并用水定容至2500克备用；
s2、植物提取液是将20克海藻打碎，加入100g水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行120℃、20min的高压灭菌得到培养基；
s4、将嗜中温假单胞菌；地衣芽孢杆菌进行单菌纯种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行单菌纯种培养，以30ml/min通入无菌空气，于37℃，80r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为1：4，以40ml/min通入无菌空气，于37℃，150r/min，培养8d；
s7、发酵液ph值达到8.5，有效活菌数达到10*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖30克，木糖20克，吐温805克，氯化铁5克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t1组实验数据。
实施例2：
s1、将乳糖10克、葡萄糖10克、酵母膏3克溶于水中，并用水定容至700克备用；
s2、植物提取液是将20克黄瓜打碎，加入80g水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行115℃、15min的高压灭菌得到培养基；
s4、将荧光假单胞菌；凝结芽孢杆菌进行单菌纯种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行单菌纯种培养，以30ml/min通入无菌空气，于28℃，50r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.5：2，以40ml/min通入无菌空气，于25℃℃，100r/min，培养3d；
s7、发酵液ph值达到7.0，有效活菌数达到2*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖10克，木糖10克，吐温803克，氯化铁2克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t2组实验数据。
实施例3：
s1、将乳糖13克、葡萄糖15克、酵母膏7克溶于水中，并用水定容至1600克备用；
s2、植物提取液是将20克香蕉打碎，加入蒸60g馏水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行115℃、15min的高压灭菌得到培养基；
s4、将嗜中温假单胞菌；蜡样芽胞杆菌进行单菌纯种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行单菌纯种培养，以30ml/min通入无菌空气，于32℃，65r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.8：3，以40ml/min通入无菌空气，于31℃，130r/min，培养6d；
s7、发酵液ph值达到7.5，有效活菌数达到6*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖20克，木糖15克，吐温804克，氯化铁3.5克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t3组实验数据。
实施例4：
s1、将乳糖15克、葡萄糖20克、酵母膏10克溶于水中，并用水定容至2500克备用；
s2、植物提取液是将20g柠檬打碎，加入40g水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行120℃、20min的高压灭菌得到培养基；
s4、将荧光假单胞菌；地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌进行单菌纯种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行菌种培养，以30ml/min通入无菌空气，于37℃，80r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为1：4，以40ml/min通入无菌空气，于37℃，150r/min，培养8d；
s7、发酵液ph值达到8.5，有效活菌数达到10*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖30克，木糖20克，吐温805克，氯化铁5克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t4组实验数据。
实施例5：
s1、将乳糖10克、葡萄糖10克、酵母膏3克溶于水中，并用水定容至700克备用；
s2、植物提取液是将5克海藻、5克香蕉、5克黄瓜、5克柠檬、5克芦荟打碎，加入水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行115℃、15min的高压灭菌得到培养基；
s4、将嗜中温假单胞菌，荧光假单胞菌；地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌进行菌种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行单菌纯种培养，以30ml/min通入无菌空气，于28℃，50r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.5：2，以40ml/min通入无菌空气，于25℃℃，100r/min，培养3d；
s7、发酵液ph值达到7.0，有效活菌数达到2*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖10克，木糖10克，吐温803克，氯化铁2克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t5组实验数据。
实施例6：
s1、将乳糖13克、葡萄糖15克、酵母膏7克溶于水中，并用水定容至1600克备用；
s2、植物提取液是将5克海藻、5克香蕉、5克黄瓜、5克柠檬、5克芦荟打碎，加入水煮沸，冷却至室温后真空抽滤取上清液备用；
s3、将上述s1得到的溶液和s2得到溶液混合，进行115℃、15min的高压灭菌得到培养基；
s4、将嗜中温假单胞菌和荧光假单胞菌；地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌进行菌种培养；所用菌种37℃活化1min,吸取1ul进行平板划线；
s5、挑取s4培养的单菌落接种至s3所述的培养基进行单菌纯种培养，以30ml/min通入无菌空气，于32℃，65r/min培养至对数期。
s6、将对数期发酵种子按照3％的比例接种至s3的剩余培养基中，其中假单胞菌与芽孢杆菌的接种比为0.8：3，以40ml/min通入无菌空气，于31℃，130r/min，培养6d；
s7、发酵液ph值达到7.5，有效活菌数达到6*108cfu/ml，停止发酵，离心5min取上清液；
s8、将海藻糖20克，木糖15克，吐温804克，氯化铁3.5克溶于s6得到的上清液中，过滤得最终产品；
s9、将s8得到的产品分别用于苹果和韭菜表面的ddt降解处理1h，然后分别测ddt降解率，得到t6组实验数据。
统计结果见下表：
上述具体实施方式不能作为对本发明保护范围的限制，对于本技术领域的技术人员来说，对本发明实施方式所做出的任何替代改进或变换均落在本发明的保护范围内。
本发明未详述之处，均为本技术领域技术人员的公知技术。