本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的提取方法及应用。
背景技术：
：刺五加为五加科植物刺五加的干燥根及根茎川,茎、叶也可作药用，又名五加参。刺五加具有多种成分，包括刺五加苷、刺五加多糖、刺五加蛋白、刺五加黄酮等。具有抗损伤，抗衰老，抗辐射和抗疲劳等功效。由于苷类在水中溶解性和稳定性均较差，易水解，因此常规提取刺五加苷的方法为醇提。而刺五加多糖醇溶性较差，使用醇提法提取刺五加皂苷的时候，大量刺五加多糖仍留在残渣中。因此，我们可以将刺五加醇提残渣进一步进行提取，从而获得刺五加多糖。刺五加多糖对细胞中的活性氧簇具有良好的清除作用，同时也能增强各类抗氧化酶的活性，达到理想的抗氧化作用；同时，通过抑制紫外线导致的细胞脂质过氧化的产生以及减少脂质过氧化产物丙二醛的含量，进而减少紫外照射带来的损伤。目前对刺五加的研究主要集中在成分功效上，对刺五加残渣的提取方法和专利申请均没有检索到相关的记载。技术实现要素：基于此，本发明的目的在于提供一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的提取方法及应用。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加残渣在35～45℃下烘干至质量恒定，粉碎后过70～90目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，并加入蛋白酶，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积有机浸提剂混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。在其中一些实施例中，所述刺五加残渣为刺五加经过醇提取其他成分后剩余的残渣。在其中一些实施例中，所述步骤(2)中的蛋白酶为0.3～5％的蛋白酶。在其中一些实施例中，所述步骤(3)中的有机浸提剂为体积比4:1的氯仿、正丁醇混合液。在其中一些实施例中，所述步骤(4)中的乙醇为75～95％浓度的乙醇溶液。本发明还提供了根据上述制备方法所制得的具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖。本发明还提供了上述具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖。在其中一些实施例中，所述化妆品剂型包括膏霜、乳液、水剂。本发明还提供了一种化妆品，包括如前所述的具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖。本发明还提供了一种抗衰老防晒霜，包含如下质量百分比成分：如前所述的具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖0.5～5％、甘油3～8％、水解珍珠1～5％、甜菜碱3～8％、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.1～0.5％、对羟基苯乙酮0.5～1％、泛醇3～8％、尿囊素0.5～0.8％、三乙醇胺0.2～0.4％、丙二醇3～8％、辛甘醇3～8％、乙基己基甘油1～1.5％、peg-50氢化蓖麻油0.03～0.1％、壬基酚聚醚-140.1～0.5％、去离子水余量。本发明具有的有益效果如下：本发明通过发明人大量的实验以及经验优选了制备方法的各种条件，得到了优化的制备方法，采用本发明制备方法所获得的刺五加多糖，含量高，产品性能稳定，可添加在多种护肤产品中，如膏霜、乳液、水剂等。本发明能够增强抗氧化酶的活性，起到抗氧化作用，还能够减少脂质过氧化产物丙二醛的含量，进而减轻紫外照射带来的损伤。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作进一步阐述：文中所出现的所有成分均为inci(internationalnomenclaturecosmeticingredient)，即国际化妆品原料明明说对其规定的名称。实施例1一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在40℃下烘干至质量恒定，粉碎后过80目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，并加入2.5％蛋白酶，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积体积比4:1的氯仿、正丁醇混合液混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用80％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。实施例2一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在35℃下烘干至质量恒定，粉碎后过70目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，并加入0.3％蛋白酶，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积体积比4:1的氯仿、正丁醇混合液混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用75％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。实施例3一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在45℃下烘干至质量恒定，粉碎后过90目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，并加入5％蛋白酶，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积体积比4:1的氯仿、正丁醇混合液混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用95％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。对比例1一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在50℃下烘干至质量恒定，粉碎后过60目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加10倍去离子水，并加入3％蛋白酶，于85℃下进行恒温水浴浸提5小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积体积比3:1的氯仿、正丁醇混合液混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用50％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。对比例2一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在40℃下烘干至质量恒定，粉碎后过80目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液与等体积体积比4:1的氯仿、正丁醇混合液混匀后放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)取刺五加多糖液减压浓缩后使用80％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。对比例3一种具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的制备方法，包含以下过程：(1)将刺五加醇提后剩余的残渣在40℃下烘干至质量恒定，粉碎后过80目筛后，使用乙醚浸泡一天后待其挥干，得到刺五加残渣粉末；(2)取刺五加残渣粉末，加20倍去离子水，于80℃下进行恒温水浴浸提8小时，得到刺五加残渣浸提液；(3)将刺五加残渣浸提液放置过夜，分离杂质后收集处于下层的刺五加多糖液；(4)使用80％乙醇进行沉淀，取沉淀进行进一步浓缩成浸膏，得到刺五加多糖。结果分析：实施例1-3和对比例1-3的制备条件具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖的含量如下表1。表1由表1数据分析可知：实施例1-3的制备条件下得到的刺五加多糖的含量明显比对比例1-3的制备条件下得到的刺五加多糖的含量明显要高；对比例1改变了制备工艺的所有参数，结果对比例1得到刺五加多糖的含量明显低于实施例1；对比例2中没有加入蛋白酶，但是对比例2的刺五加多糖的提取量比实施例1明显少，说明蛋白酶能使多糖成分更容易被提取，进而提高了提取量；对比例3制备条件为水提后用乙醇沉淀，但是刺五加多糖含量比实施例1低，说明了采用酶解水提醇沉的方法能达到提高原料利用率的目的；而经过多次的变化工艺参数，步骤等实验，得到本发明保护的制备方法。将实施例1-3制备得到的具有抗辐射抗衰老活性的刺五加多糖应用在制备抗衰老防晒霜中，具体如下表2。表2防晒功效验证原理：络氨酸转化成黑色素的过程中，络氨酸酶的催化作用主要发生在络氨酸酶转化为多巴及多巴转化成多巴醌的过程，多巴醌为一种有色物质，在475nm处有吸收，可利用分光光度计测量含量。l-dopa为底物，测定防晒霜的络氨酸酶抑制活性。方法：准确吸取防晒霜并用磷酸缓冲液稀释成不同浓度的液体，分别稀释为原体积1倍、3倍、5倍、7倍，在30℃水浴中孵育10分钟后加入300μ/ml的络氨酸酶溶液，继续培育十分钟，立即在475nm测定其吸光值。结果如下表3。表3组别1倍3倍5倍7倍空白抑制率％85.880.178.172.59.8由表3的数据分析可知：防晒霜有良好的抑制酪氨酸酶的作用，间接反映了其防晒效果好。抗辐射功效验证选取健康实验小鼠30只，体重20-25g，雌性，随机分为如下3组：刺五加多糖组、防晒霜组、空白对照组。将小鼠背毛剃净，面积2cm×2cm。除空白对照组外，将3组小鼠于紫外灯下(uva和uvb紫外灯管由合肥赛帆试验设备有限公司生产，型号uva-340和uvb-313型)模拟日光照射，照射距离50cm，1h/d，每周5次，连续2周。紫外线照射20min前，小鼠于脱毛区均匀涂抹对应组别制备的试验品。试验结束后，取每只动物紫外线照射部位皮肤全层1g，制备皮肤组织匀浆液，分别检测mda、sod、gsh-px、cat、hyp水平。紫外线照射部位皮肤组织sod、gsh-px、cat及mda含量统计结果见表4。表4与对照组1比较，*p＜0.05，**p＜0.01。由表4的数据分析可知：刺五加多糖，防晒霜组的皮肤组织sod、gsh-px、cat及hyp水平显著下降(p＜0.05或p＜0.01)，mda水平显著升高(p＜0.01)，可见刺五加多糖具有抗辐射活性，将其应用在防晒霜中，使得防晒霜具有抗辐射效果。抗衰老功效验证上述抗辐射试验结束后，取紫外线照射部位皮肤0.3cm×0.3cm，没有经紫外照射的同批次的小鼠酮部位的皮肤0.3cm×0.3cm，分别用10％甲醛溶液固定，石蜡包埋、切片、he染色，采用光学显微镜观察皮肤组织病理形态。结果：皮肤组织结构光学显微镜(10×40)下观察显示，空白组紫外照射小鼠表皮明显增厚，组织结构不完整，纤维组织排列紊乱，出现断裂现象，细胞皱缩，表现为衰老迹象。刺五加多糖组和防晒霜组小鼠皮肤角质层薄，表皮组织结构完整，各层细胞清晰，真皮层纤维组织呈波浪状均匀分布，细胞表现力强，甚至比没有经过紫外照射的小鼠皮肤活力强。间接反映了刺五加多糖和防晒霜的抗衰老效果。以上实施例仅表明本发明的几种实施例，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利的限制范围。应当指出的是：任何从事本专业的技术人员，都有能力利用已揭示的技术内容，对其作出一些更动或修饰，成为等同变化的等效实施例。根据本发明技术实质，对本发明进行简单修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。当前第1页12