本发明涉及中药材中天然活性物质的提取制备技术领域，更具体地，本发明涉及一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法。
背景技术：
中药苦参是豆科植物苦参(sophorsflavescensait)的干燥根，味苦、性寒、有清絷燥湿、杀虫等作用，临床上用于治疗痢疾、黄胆和皮肤骚痒症，近年还发现具有抗肿瘤、升白等药理作用。
苦参中主要含有苦参碱、氧化苦参碱等生物碱。其中，苦参碱是一种对人类健康有显著保健作用的天然活性物质，已引起国际社会的普遍关注，经科学研究及临床应用证明，苦参碱具有抗肿瘤、升白细胞、平喘祛痰、镇痛、抗过敏及免疫抑制作用。
苦参中的苦参总碱、苦参碱及氧化苦参碱的提取方法较为常用的有溶剂提取法和离子交换法。传统的提取方法，苦参总碱出膏率高，即所得到的提取物中杂质较多，提取效果较差。
郭安等用苦参粗粉经60％etoh提取、沉淀、浓缩、酸化后，上柱进行交换，已交换树脂碱化后用chf萃取，收干chf后用et2o萃取，沉淀部分用me2co结晶得氧化苦参碱。该方法氧化苦参碱得率为1.28％。但其只分离出苦参碱。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是针对现有苦参中苦参碱和氧化苦参碱提取技术的不足，提供一种新的从苦参中提取和纯化苦参碱及氧化苦参碱的方法。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现：
提供一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，包括以下步骤：
s1.以溶剂超声提取苦参粉，过滤后收集滤液蒸发溶剂得到初提物；
s2.将步骤s1所得的初提物用溶剂溶解后调节ph值，然后过大孔树脂nka-12柱洗脱，洗脱至生物碱显色剂检测不出来，收集洗脱液旋转至干，得到苦参总碱；
s3.将步骤s2所得苦参总碱过层析柱，经薄层检识后，将只含苦参碱和氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干，溶剂溶解，过滤，分别得到氧化苦参碱和含苦参碱的滤液，滤液经蒸发溶剂得到苦参碱；
其中，步骤s1采用溶剂为乙醇，乙醇的体积比浓度为60～80％；进一步优选的浓度为70％；步骤s1所述超声提取的超声功率为80～100hz，每次超声提取时间为0.5～1h。
本发明针对苦参粉，采用特定浓度的乙醇作为提取溶剂，不仅提取效果较好，而且乙醇成本较低，而且无毒性，对人体无害，保证本发明方法整体的环境友好性。
所述超声提取，优选液料比设为10:1，在此液料比条件下，提取率可达5.25％。
本发明步骤s1所述超声提取的超声功率为80～100hz，优选提取三次，每次的提取时间为0.5～1h。本发明对超声功率和提取时间、提取次数总结出精确的工艺方案，针对苦参，能有效破坏细胞壁，细胞内溶物溶出，加快提取速率，在此超声功率条件下，提取率为5.3％左右。
优选地，步骤s1所述苦参粉是将苦参粉碎后碎至过20～40筛所得。
本发明将苦参粉碎至合适的粒径，然后确定采用特定浓度的乙醇作为提取溶剂，精确液料比，在科学的超声条件下进行提取，获得的初提物的提取产率不低于5％
优选地，步骤s2所述调节ph值为10采用氢氧化钠溶液对体系ph值进行调节。所述氢氧化钠溶液的体积比浓度为10％。
优选地，步骤s2所述生物碱显色剂为质量百分比浓度为10％的硅钨酸试剂。
本发明步骤s2对ph值、大孔树脂、洗脱液浓度等关键因素进行优化，提供了系统的提取操作，所得苦参总碱中含有以苦参碱、氧化苦参碱为主的生物碱，产率不低于4.3％。
优选地，步骤s3所述的层析柱采用的吸附剂为苦参碱分子印迹聚合物。
所述苦参碱分子印迹聚合物经以下方法制备得到：以甲基丙烯酸缩水甘油酯和二乙烯基苯经引发剂引发制备得到载体微球；以载体微球为载体，将4,4'-偶氮双(4-氰基戊酸)连接到载体微球表面，然后以苦参碱为模板分子，α-甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，引发聚合，在载体微球表面上均匀地接枝分子印迹聚合物制得。命名为zk-607吸附剂。
优选地，所述zk-607吸附剂的用量为30g，总碱过氧化zk-607吸附剂层析柱前用2ml乙醇溶解，并进样到zk-607吸附剂层析柱中。
优选地，步骤s3所述的所述洗脱剂为氯仿和甲醇按照不同配比组成的混合物。
优选地，步骤s3所述zk-607吸附剂层析柱洗脱过程：先用30ml氯仿进行洗脱，再按氯仿：甲醇＝1:1～30进行洗脱。每10ml收集一次洗脱液，并按1～100编号。
优选地，所述流份合并是将洗脱液利用薄层析色谱，将只含苦参碱、氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干。
优选地，用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，其纯度不低于92％，提取率不低于1.2％。溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱，纯度较高的氧化苦参碱，其纯度不低于94％，提取率不低于0.4％。
本发明的有益效果：
本发明有机发挥超声、有机溶剂提取和多种分离技术之间的长处，总结获得这几种常规提取纯化方法中的结合点，获得了一种新的苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，利用合理浓度的乙醇超声初提取，然后经过大孔树脂有效提取苦参中的总碱，最后利用自制吸附剂进行柱层析分离到苦参碱及氧化苦参碱。本发明提取工艺精细，不仅得到苦参碱，苦参碱的得率在1.5％左右，相比于现有技术，得到显著提升，还同时得到氧化苦参碱，得到的苦参碱、氧化苦参碱纯度都在91％以上。
本发明过程简单、易实现工业化，产品的高纯度对苦参碱、氧化苦参碱在抗病毒、抗炎、抗肿瘤方面的应用提供有力的保障，具有较大的市场开发前景。
附图说明
图1poly(gma-dvb)(a)与poly(gma-dvb-acpa)(b)微球的红外光谱图。
图2poly(gma-dvb-acpa)微球(a)与mims(b)的红外光谱图。
图3表面环氧基含量不同的poly(gma-dvb)微球与其相对应的mims的扫描电镜照片。
图4初提取物的液相色谱。
图5纯化得到苦参碱的液相色谱图。
图6纯化得到氧化苦参碱的液相色谱图。
图7zk-607吸附剂分子印迹聚合物的电镜扫描图。
图8mims对苦参碱的吸附量随时间的变化情况。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明。下述实施例仅用于示例性说明，不能理解为对本发明的限制。除非特别说明，下述实施例中使用的试剂为常规市购或商业途径获得的试剂，除非特别说明，下述实施例中使用的方法和设备为本领域常规使用的方法和设备。
实施例1
1.原料与仪器(可以采用其他类似的原料与仪器，本发明并不限定具体生产厂家出品)
甲基丙烯酸缩水甘油酯(gma)>97.0％、二乙烯基苯(dvb)80％：国药集团化学试剂有限公司；苦参碱99％：天津市富宇精细化工有限公司；α-甲基丙烯酸(maa)、乙二醇二甲基丙烯酸酯(egdma)、4,4'-偶氮双(4-氰基戊酸)(acpa)、2,2'偶氮二异丁腈(aibn)：分析纯，天津市大茂化学试剂厂。
vector-33ft-ir傅里叶变换红外光谱仪：德国bruker公司；mastersizer2000激光粒度仪：英国malvern仪器公司；hitachis-4300扫描电子显微镜：日本hitachi公司；uv-2550紫外分光光度计：日本shimadzu公司。
2.表面分子印迹聚合物载体微球的制备：
s01.将不同配比的gma和dvb(20％、30％、40％、50％、60％)(gma与dvb的摩尔比，单体和交联剂的总质量占溶剂质量的3.0％)溶于乙腈后置于100ml烧瓶中，超声脱气10min；
s02.往步骤s1所得的体系加入引发剂aibn(占单体质量的2.0％)将烧瓶连接到旋转蒸发仪上，通氮气10min后密封，保持65℃反应24h，转速为20r/min，反应结束后所得聚合物用乙醇反复离心分离洗涤3次，产物于室温真空干燥2d，得聚合物载体微球。
3.表面分子印迹聚合物微球的制备：
s1.取0.60gpoly(gma-dvb)载体微球置于50ml的三颈瓶中，加入10.0ml二甲基亚砜和2.5ml三乙胺，超声脱氧10min，再加入0.120gacpa，50℃搅拌(搅拌速度为100r/min)反应5h。反应过程中连续通入氮气保护。获得的产物用乙醇反复洗涤3次，真空干燥1d，在-10℃保存。制得聚合物微球poly(gma-dvb-acpa)。
s2.将苦参碱20.0mg溶解于5.0ml氯仿中，加入4.0mmolmaa，室温振荡5h，然后加入20.0mmolegdma和0.150gpoly(gma-dvb-acpa)微球，通氮脱氧10min，在65℃搅拌条件下反应10h，反应过程中氮气保护。聚合完成后将获得的微球用甲醇/冰醋酸溶液(体积比8:2)分多次洗涤，直到在紫外分光光度计上无模板分子检出为止，最后用甲醇洗涤3次除去残余的冰醋酸，离心分离后真空干燥恒量，即得苦参碱表面分子印迹聚合物微球，备用。
采用卤化季铵盐-高氯酸法测定环氧基含量。
表面分子印迹聚合物微球性能测定：取30.0mg印迹或非印迹微球放入25.0ml锥形瓶中，加入5.0ml已知浓度的苦参碱乙腈溶液，室温振荡8h后离心分离，用紫外分光光度计在相应的特征波长下测定其吸光度(平行测定3次取平均值)，并根据标准曲线计算溶液的浓度，根据所得数据计算静态吸附吸附量。
poly(gma-dvb-acpa)微球的红外光谱分析：图1为poly(gma-dvb)(a)与poly(gma-dvb-acpa)(b)微球的红外光谱图。与poly(gma-dvb)微球的红外光谱图相比，poly(gma-dvb-acpa)在1585cm-1处出现了n＝n双键的肩峰，且在906cm-1和841cm-1处环氧基的伸缩振动吸收峰明显减弱；同时，poly(gma-dvb-acpa)在2230cm-1处出现了的特征吸收峰，且3400cm-1～3500cm-1处的羟基峰也有所增加。说明acpa可以通过与poly(gma-dvb)微球表面上的环氧基反应连接到微球上。虽然acpa是一种活性较强的引发剂，但在50e的反应温度下，其半衰期为10000min，而微球表面接枝反应的时间为5h，因此反应过程中绝大多数acpa没有被分解。
表面mims的红外光谱分析：图2为poly(gma-dvb-acpa)微球(a)与mims(b)的红外光谱图。与poly(gma-dvb-acpa)微球的红外光谱图相比，表面分子印迹聚合物微球2239cm-1处的吸收峰消失,说明引发剂已经在反应中消耗掉。且在906cm-1和841cm-1处环氧基的伸缩振动吸收峰明显减弱，说明环氧基发生了开环反应，同时由于功能单体maa羧基的引入，使表面分子印迹聚合物微球在3400cm-1～3500cm-1处的吸收峰与poly(gma-dvb-acpa)微球谱图相比明显增强。图2所示红外光谱分析结果表明，功能单体和交联剂成功地通过poly(gma-dvb)微球上acpa的引发共聚而接枝到了poly(gma-dvb)微球表面上。
poly(gma-dvb)表面环氧基含量对mims接枝率的影响：
本发明采用卤化季铵盐-高氯酸法测定了poly(gma-dvb)载体微球表面环氧基的含量。从表1可见，随着gma投料比的增加，poly(gma-dvb)载体微球表面环氧基含量增加，mims的接枝率也呈上升的趋势，当poly(gma-dvb)中环氧基的含量为0.1927mmol/g时，分子印迹聚合物的接枝率仅为5.2％，而当环氧基的含量增大到2.912mmol/g时，接枝率增大到12.6％。这是因为随着poly(gma-dvb)载体微球表面环氧基含量增加，与acpa反应后有更多的acpa连接到其表面，从而引发更多的功能单体和交联剂在其表面共聚。同时也说明，mims的接枝率可以通过控制poly(gma-dvb)载体微球表面环氧基含量进行调整。
表1
上表1中mims的接枝率由此公式计算：m-m0/m0，，其中，m是mims的产量，m0是用于聚合环氧树的量。
poly(gma-dvb)载体微球表面环氧基含量对mims形貌的影响：图3为表面环氧基含量不同的poly(gma-dvb)载体微球与其相对应的mims的扫描电镜照片。从图中可以看到，mims形态与poly(gma-dvb)载体微球形态相似，保持原有良好的球形形态，说明接枝的分子印迹聚合物均匀地分布在微球表面；接枝分子印迹层后的微球的粒径与接枝前相比明显增大，说明载体微球表面的确包裹了一层分子印迹聚合物，对比接枝前后相应微球的平均粒径，增加了0.23～0.42μm。从图中还可以看到，当微球环氧基含量增加至2.912mmol/g时所制得的mims之间的粘连程度增加，这是因为连接到poly(gma-dvb)载体微球表面上的偶氮引发剂acpa在加热的条件下会分解，产生两个自由基，一个自由基固定在微球表面上，另一个则游离分散在溶液中。前者引发表面接枝聚合反应，而后者则会导致功能单体和交联剂的本体聚合。由于在聚合过程中固定在微球表面的自由基相对集中，而游离于溶液中的自由基含量较低，且单体中含有极少量的阻聚剂能部分阻止这些自由基引发本体聚合，因此反应只在微球表面上进行，制得的接枝微球形状规整，微球间没有粘接现象；当poly(gma-dvb)载体微球环氧基含量增加到2.912mmol/g时，引入的acpa含量较高，游离在溶液中的自由基浓度相应增大，部分单体在溶液中发生本体聚合，导致一些微球相互粘接在一起。
溶剂用量对mims接枝率及粒径分布的影响：因为在mims的制备过程中，溶剂的用量是影响微球接枝率的一个关键因素，在保持其它条件不变的前提下，考察了不同的溶剂用量对mims接枝率的影响，随着溶剂用量的减少，mims的接枝率逐渐增加。当氯仿的用量为5.00ml时，mims的接枝率为12.00％；当氯仿的用量缩减到3.00ml时，接枝率增大到17.40％；但是当氯仿的用量继续减小，得到的为胶状固体聚合物且难于研磨分散。这是因为在模板分子和功能单体的质量不变的情况下，减少溶剂的用量即增大了功能单体和交联剂的浓度，在自由基的引发下更多的功能单体和交联剂在微球表面共聚。但是当溶剂的用量过少时，就会使得聚合反应不仅在微球表面上进行反应，而且在溶液中也发生共聚反应，最终导致分子印迹聚合物全部粘连成块，难以分开。因此微球表面acpa的含量一定时，mims的接枝率可以通过控制溶剂的用量进行调整。且随着氯仿用量的减少，分子印迹聚合物微球的粒径逐渐增大，说明溶剂的含量可以控制mims壳层的厚度，这和对接枝率的影响相一致。同时还可以看到，当氯仿的用量为5.00ml时，粒径的分布相对集中，说明所得的mims单分散性好，没有出现溶剂中的二次成核；但是随着溶剂量的减少，出现了小粒径微球峰，说明当溶剂的用量减少时，随着微球的接枝率和粒径的增大，溶液中发生二次成核的几率也增加，由此会影响mims的单分散性。
分子印迹聚合物接枝率对mims吸附特性的影响：不同接枝率的表面mims对苦参碱的吸附量比非印迹微球的都大。在接枝率小于12.0％时，随着接枝率的增大，表面mims对苦参碱的吸附量逐渐增大；在接枝率为12.0％时，其对苦参碱的吸附量达到最大值60.23μmol/g，此后，接枝率增大，吸附量则下降。这是因为在接枝率较低时，随着接枝率的增大，mims表面结合点的数量增多，因而吸附量增大；当接枝量大于12.0％时，mims表面部分出现粘连，导致可被模板分子接近的结合点数量降低，因此吸附量反而减小。
mims的吸附动力学试验：在苦参碱模板分子初始浓度为5.0mmol/l的情况下，测定了mims前4h对模板分子的吸附量。从图8可以看出：mims对苦参碱的吸附量随着时间的延长而增大；在初始阶段，吸附量增加较快，60min即达到平衡吸附量的65.0％；mims在110min后增加缓慢，140min达到平衡吸附量的78.9％；200min时mims达到吸附平衡。这是因为mims表面存在大量的结合位点，故开始吸附速率较快，之后由于表面结合位点逐渐减少，模板分子需克服传质阻力向mims内部渗透，造成吸附速率下降。
实施例2
以前述表面mims命名为zk-607作为吸附剂。zk-607吸附剂分子印迹聚合物的电镜扫描图见图7所示。本实施例提供一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，包括以下步骤：
s1.以乙醇为提取溶剂超声提取苦参粉，过滤后收集滤液蒸发溶剂得到初提物；所述苦参粉是将苦参粉碎后碎至过20～40筛所得。采用的乙醇的体积比浓度为60％，所述超声提取，液料比设为10:1。所述超声提取的超声功率为100hz，提取3次，每次的提取时间为0.5h。初提物的提取产率为5.0％。
s2.将步骤s1所得的初提物用溶剂溶解后调节ph值为10，将调节ph值后混合物过大孔树脂nka-12柱洗脱，所述洗脱剂为ph值为10、体积比浓度为80％的乙醇，洗脱直至生物碱显色剂检测不出来，收集洗脱液旋转至干，得到苦参总碱；所述调节ph值为10采用氢氧化钠溶液对体系ph值进行调节。所述氢氧化钠溶液的体积比浓度为10％。所述生物碱显色剂为质量百分比浓度为10％的硅钨酸试剂。所得苦参总碱中含有以苦参碱、氧化苦参碱为主的生物碱，产率为4.3％。
s3.将步骤s2所得苦参总碱过zk-607吸附剂层析柱洗脱，所述洗脱剂为氯仿和甲醇按照不同配比组成，经薄层检识后，将只含苦参碱和氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干，
用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱。
所述的zk-607吸附剂层析柱，k-607吸附剂的用量为30g，总碱过zk-607吸附剂层析柱前用2ml乙醇溶解，并进样到zk-607吸附剂层析柱中。
步骤s3所述zk-607吸附剂层析柱洗脱过程：先用30ml氯仿进行洗脱，再按氯仿：甲醇＝1:1～30进行洗脱。每10ml收集一次洗脱液，并按1～100编号。
所述流份合并是将洗脱液利用薄层析色谱，将只含苦参碱、氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干。
步骤s3用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，其纯度不低于91％，提取率不低于1.1％。溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱，纯度较高的氧化苦参碱，其纯度不低于92％，提取率不低于0.4％。
实施例3
以前述表面mims命名为zk-607作为吸附剂。zk-607吸附剂分子印迹聚合物的电镜扫描图见图7所示。本实施例提供一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，包括以下步骤：
s1.以乙醇为提取溶剂超声提取苦参粉，过滤后收集滤液蒸发溶剂得到初提物；所述苦参粉是将苦参粉碎后碎至过20～40筛所得。采用的乙醇的体积比浓度为80％，所述超声提取，液料比设为10:1，所述超声提取的超声功率为80hz，提取3次，每次的提取时间为1h。初提物的提取产率为5.1％。
s2.将步骤s1所得的初提物用溶剂溶解后调节ph值为10，将调节ph值后混合物过大孔树脂nka-12柱洗脱，所述洗脱剂为ph值为10、体积比浓度为80％的乙醇，洗脱直至生物碱显色剂检测不出来，收集洗脱液旋转至干，得到苦参总碱；所述调节ph值为10采用氢氧化钠溶液对体系ph值进行调节。所述氢氧化钠溶液的体积比浓度为10％。所述生物碱显色剂为10％硅钨酸试剂。所得苦参总碱中含有以苦参碱、氧化苦参碱为主的生物碱，产率为4.5％。
s3.将步骤s2所得苦参总碱过zk-607吸附剂层析柱洗脱，所述洗脱剂为氯仿和甲醇按照不同配比组成，经薄层检识后，将只含苦参碱和氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干，然后用少量丙酮溶解，放置析晶，得苦参碱、氧化苦参碱纯品。
所述的zk-607吸附剂层析柱，k-607吸附剂的用量为30g，总碱过zk-607吸附剂层析柱前用2ml乙醇溶解，并进样到zk-607吸附剂层析柱中。
步骤s3所述zk-607吸附剂层析柱洗脱过程：先用30ml氯仿进行洗脱，再按氯仿：甲醇＝1:1～30进行洗脱。每10ml收集一次洗脱液，并按1～100编号。
所述流份合并是将洗脱液利用薄层析色谱，将只含苦参碱、氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干。
步骤s3用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，其纯度不低于91％，提取率不低于1.2％。溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱，纯度较高的氧化苦参碱，其纯度不低于91％，提取率不低于0.4％。
实施例4
以前述表面mims命名为zk-607作为吸附剂。zk-607吸附剂分子印迹聚合物的电镜扫描图见图7所示。本实施例提供一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，包括以下步骤：
s1.以乙醇为提取溶剂超声提取苦参粉，过滤后收集滤液蒸发溶剂得到初提物；所述苦参粉是将苦参粉碎后碎至过20～40筛所得。采用的乙醇的体积比浓度为70％。所述超声提取，液料比设为10:1，所述超声提取的超声功率为90hz，提取3次，每次的提取时间为45min。初提物的提取产率为5.4％。
s2.将步骤s1所得的初提物用溶剂溶解后调节ph值为10，将调节ph值后混合物过大孔树脂nka-12柱洗脱，所述洗脱剂为ph值为10、体积比浓度为80％的乙醇，洗脱直至生物碱显色剂检测不出来，收集洗脱液旋转至干，得到苦参总碱；所述调节ph值为10采用氢氧化钠溶液对体系ph值进行调节。所述氢氧化钠溶液的体积比浓度为10％。所述生物碱显色剂为质量比10％硅钨酸试剂。所得苦参总碱中含有以苦参碱、氧化苦参碱为主的生物碱，产率为4.4％。
s3.将步骤s2所得苦参总碱过zk-607吸附剂层析柱洗脱，所述洗脱剂为氯仿和甲醇按照不同配比组成，经薄层检识后，将只含苦参碱和氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干，
用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱。
所述的zzk-607吸附剂层析柱，zk-607吸附氧化铝的用量为30g，总碱过zk-607吸附剂层析柱前用2ml乙醇溶解，并进样到zk-607吸附剂层析柱中。
步骤s3所述zk-607吸附剂层析柱洗脱过程：先用30ml氯仿进行洗脱，再按氯仿：甲醇＝1:1～30进行洗脱。每10ml收集一次洗脱液，并按1～100编号。
所述流份合并是将洗脱液利用薄层析色谱，将只含苦参碱、氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干。
步骤s3用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，其纯度不低于93％，提取率不低于1.5％。溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱，纯度较高的氧化苦参碱，其纯度不低于93％，提取率不低于0.4％。
实施例5
以前述表面mims命名为zk-607作为吸附剂。zk-607吸附剂分子印迹聚合物的电镜扫描图见图7所示。本实施例提供一种苦参中苦参碱及氧化苦参碱提取及纯化的方法，包括以下步骤：
s1.以乙醇为提取溶剂超声提取苦参粉，过滤后收集滤液蒸发溶剂得到初提物；所述苦参粉是将苦参粉碎后碎至过20～40筛所得。采用的乙醇的体积比浓度为70％。所述超声提取液料比设为10:1，所述超声提取的超声功率为90hz，提取3次，每次的提取时间为1h。初提物的提取产率为5.4％。
s2.将步骤s1所得的初提物用溶剂溶解后调节ph值为10，将调节ph值后混合物过大孔树脂nka-12柱洗脱，所述洗脱剂为ph值为10、体积比浓度为80％的乙醇，洗脱直至生物碱显色剂检测不出来，收集洗脱液旋转至干，得到苦参总碱；所述调节ph值为10采用氢氧化钠溶液对体系ph值进行调节。所述氢氧化钠溶液的体积比浓度为10％。所述生物碱显色剂为质量比10％硅钨酸试剂。所得苦参总碱中含有以苦参碱、氧化苦参碱为主的生物碱，产率为4.5％。
s3.将步骤s2所得苦参总碱过zk-607吸附剂层析柱洗脱，所述洗脱剂为氯仿和甲醇按照不同配比组成，经薄层检识后，将只含苦参碱和氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干，用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱。
所述的zk-607吸附剂层析柱，zk-607吸附剂的用量为30g，总碱过zk-607吸附剂层析柱前用2ml乙醇溶解，并进样到zk-607吸附剂层析柱中。
步骤s3所述zk-607吸附剂层析柱洗脱过程：先用30ml氯仿进行洗脱，再按氯仿：甲醇＝1:1～30进行洗脱。每10ml收集一次洗脱液，并按1～100编号。
所述流份合并是将洗脱液利用薄层析色谱，将只含苦参碱、氧化苦参碱的流份合并，回收溶剂至干。
步骤s3用少量乙醚溶解，不溶于乙醚的是氧化苦参碱，过滤得到氧化苦参碱，其纯度不低于93％，提取率不低于1.5％。溶于乙醚的是苦参碱，旋转蒸发乙醚，得到氧化苦参碱，纯度较高的氧化苦参碱，其纯度不低于93％，提取率不低于0.4％。
将本发明任意实施例所得的初提取物进行检测，液相色谱见图4所示，纯化得到苦参碱的液相色谱图见图5所示，纯化得到氧化苦参碱的液相色谱图见图6所示。