本发明涉及花粉蛋白多肽领域，尤其是涉及发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的用途。
技术背景
玫瑰花，别名徘徊花、刺玫花、笔头花，是蔷薇科蔷薇属落叶灌木植物，玫瑰花形娇美，清香淡雅、颜色丰富。玫瑰花主要含有维生素c、胡萝卜素、硫胺素、核黄素、苦味质、鞣质以及钾、钠、钙、镁等矿物质。有的玫瑰花中维生素c是含量是柠檬的50倍。可增强人体产生胶原蛋白的能力，抵抗自由基的侵害，并使肌肤免受紫外线伤害。玫瑰花性温、味甘、辛香微苦，能帮助体内正气运行，推动血液循环，有祛淤调经的作用。现代科学研究发现，玫瑰花所含挥发油有促进胆汁分泌的作用，能帮助胃的消化。玫瑰花瓣既可沐浴也可护肤养颜，是新世纪美容护肤佳品。在每年的5-6月期间，当玫瑰花即将开时，分批摘取它的鲜嫩花蕾，经严格的消毒、灭菌、风干,花蕾芳香怡人，有理气和血、舒肝解郁、降脂减肥、润肤养颜等作用。特别对妇女经痛、月经不调有神奇的功效。服用它可以起到补血养气，滋养容颜的作用。花可提取玫瑰油，干花雷根可入药，具有清热消火、美容养颜的奇特功效。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的用途，玫瑰花粉蛋白多肽能促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，还具有较强的抗氧化活性，可以应用于食品添加剂、化妆品、保健品。
本发明方法中所用到的微生物及其所购买企业为：枯草芽孢杆菌，武汉丰甜生物科技有限公司。
本发明针对
背景技术：
中提到的问题，采取的技术方案为：发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的用途，玫瑰花粉蛋白多肽可以用于食品添加剂、化妆品、保健品中，发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽不仅比玫瑰花粉蛋白本身更容易被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中。
作为优选，发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的方法包括：破壁处理、提取蛋白、发酵、提取，具体包括以下步骤：
破壁处理:将玫瑰花用高速组织捣碎机粉碎于-18～-20℃冻藏12-24小时，按料液比1g:10-12ml加入到78-80℃的pbs缓冲液，缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph为7.4，迅速搅拌直至花粉溶解，然后对花粉溶液进行超声处理15-25分钟，接着迅速降温至40-45℃，并用水浴保温6-8小时，0-4℃搅拌提取10-12小时，取破壁溶液保存于0-4℃环境；对玫瑰花粉进行超声破壁处理可以有效地将花粉中的蛋白质与脂质、纤维素等分离开来，可以更加有效的提取玫瑰花粉蛋白；
提取蛋白：将破壁花粉溶液在4800-5000r/min转速下低速离心15-20分钟后取上清液，3-4℃温度下在上清液中加入硫酸铵至饱和度为20%，溶解后静置2-3小时，3-4℃、10000-12000r/min条件下将上述溶液离心10-12分钟，取沉淀，在清液中加入硫酸铵分别至饱和度为40%、60%、80%、100%后重复上述操作，即可依次得到硫酸铵饱和度为0-20%、20-40%、40-60%、60-80%、80-100%的水溶性蛋白质，将蛋白质合并后低温干燥即得玫瑰花粉蛋白；多硫酸铵饱和浓度提取可以将花粉中的蛋白充分、彻底的提取出来，实现对玫瑰花粉蛋白的全效利用，提取效率较高；
发酵：按培养液体积的5-11%将枯草芽孢杆菌种子液接入到发酵培养液中，种子液中的活菌数为1.0-1.2×108个/ml，在温度为30-41℃，摇床转速为180-200r/min的条件下，水浴恒温发酵培养9-20小时，发酵结束后在沸水浴灭酶10-15分钟；发酵能将微生物产酶与酶水解反应同时进行，降低了成本，而且枯草芽孢杆菌产生的端肽酶对玫瑰花粉蛋白肽具有修饰作用，使制得的肽不但没有苦味，还具有发酵的天然芳香味；玫瑰花粉蛋白肽相对于蛋白质来说分子量更低，更易于被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中；
提取：将发酵液在5000-5500r/min转速下离心20-30分钟，取上清液，用0.45μm滤膜过滤，然后以10kda超滤膜超滤，取滤液低温干燥即得玫瑰花粉蛋白多肽；将发酵液离心可以去除菌体和未发酵的玫瑰花粉残渣，本提取方法简便易行，成本低廉，提取效率较高。
作为优选，取10.0-10.2份玫瑰花粉蛋白、0.25-0.28份葡萄糖、0.55-0.58份氯化钠、0.01-0.012份10-樟脑磺酸溶解于150-180份蒸馏水中即得发酵培养液，调节ph值至6.7-6.8，在115-121℃下灭菌20-25分钟，取出，冷却至室温待用；玫瑰花粉蛋白既充当氮源又可作为微生物酶解的底物，发酵培养液可以实现微生物的迅速发酵与酶解；微量的10-樟脑磺酸可以作用于枯草芽孢杆菌的部分辅酶的金属活性中心，从而可以有效的提高相关辅酶的活性，促进枯草芽孢杆菌三羧酸循环的进行，进而增强枯草芽孢杆菌的代谢活力，提高发酵效率，降低发酵时间，提高产量与产率。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）玫瑰花粉粉末既充当氮源又可作为微生物酶解的底物，发酵培养液可以实现微生物的迅速发酵与酶解；微量的10-樟脑磺酸可以作用于枯草芽孢杆菌的部分辅酶的金属活性中心，从而可以有效的提高相关辅酶的活性，促进枯草芽孢杆菌三羧酸循环的进行，进而增强枯草芽孢杆菌的代谢活力，提高发酵效率，降低发酵时间，提高产量与产率；2）玫瑰花粉蛋白肽相对于蛋白质来说分子量更低，更易于被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的方法，包括以下步骤：
1）将玫瑰花用高速组织捣碎机粉碎于-18℃冻藏12小时，按料液比1g:10ml加入到78℃的pbs缓冲液，缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph为7.4，迅速搅拌直至花粉溶解，然后对花粉溶液进行超声处理15分钟，接着迅速降温至40℃，并用水浴保温6小时，0℃搅拌提取10小时，取破壁溶液保存于0℃环境；2）将破壁花粉溶液在4800r/min转速下低速离心15分钟后取上清液，3℃温度下在上清液中加入硫酸铵至饱和度为20%，溶解后静置2小时，3℃、10000r/min条件下将上述溶液离心10分钟，取沉淀，在清液中加入硫酸铵分别至饱和度为40%、60%、80%、100%后重复上述操作，即可依次得到硫酸铵饱和度为0-20%、20-40%、40-60%、60-80%、80-100%的水溶性蛋白质，将蛋白质合并后低温干燥即得玫瑰花粉蛋白；3）发酵培养液含有10.0份玫瑰花粉蛋白、0.25份葡萄糖、0.55份氯化钠、0.01份10-樟脑磺酸，150份蒸馏水，调节ph值至6.7，在115℃下灭菌20分钟，取出，冷却至室温待用；按培养液体积的5%将枯草芽孢杆菌种子液接入到发酵培养液中，种子液中的活菌数为1.0×108个/ml，在30℃、180r/min条件下，水浴恒温发酵培养9小时，发酵结束后在沸水浴灭酶10分钟；4）将发酵液在5000r/min转速下离心20分钟，取上清液，用0.45μm滤膜过滤，然后以10kda超滤膜超滤，取滤液低温干燥即得玫瑰花粉蛋白多肽；将发酵液离心可以去除菌体和未发酵的玫瑰花粉残渣，本提取方法简便易行，成本低廉，提取效率较高。
实施例2：
发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的方法包括：破壁处理、提取蛋白、发酵、提取，具体包括以下步骤：
1）破壁处理:将玫瑰花用高速组织捣碎机粉碎于-20℃冻藏24小时，按料液比1g:12ml加入到80℃的pbs缓冲液，缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph为7.4，迅速搅拌直至花粉溶解，然后对花粉溶液进行超声处理25分钟，接着迅速降温至45℃，并用水浴保温8小时，4℃搅拌提取12小时，取破壁溶液保存于4℃环境；对玫瑰花粉进行超声破壁处理可以有效地将花粉中的蛋白质与脂质、纤维素等分离开来，可以更加有效的提取玫瑰花粉蛋白；
2）提取蛋白：将破壁花粉溶液在5000r/min转速下低速离心20分钟后取上清液，4℃温度下在上清液中加入硫酸铵至饱和度为20%，溶解后静置3小时，4℃、12000r/min条件下将上述溶液离心12分钟，取沉淀，在清液中加入硫酸铵分别至饱和度为40%、60%、80%、100%后重复上述操作，即可依次得到硫酸铵饱和度为0-20%、20-40%、40-60%、60-80%、80-100%的水溶性蛋白质，将蛋白质合并后低温干燥即得玫瑰花粉蛋白；多硫酸铵饱和浓度提取可以将花粉中的蛋白充分、彻底的提取出来，实现对玫瑰花粉蛋白的全效利用，提取效率较高；
3）发酵：取10.2份玫瑰花粉蛋白、0.28份葡萄糖、0.58份氯化钠、0.012份10-樟脑磺酸溶解于180份蒸馏水中即得发酵培养液，调节ph值至6.8，在121℃下灭菌25分钟，取出，冷却至室温待用；按培养液体积的11%将枯草芽孢杆菌种子液接入到发酵培养液中，种子液中的活菌数为1.2×108个/ml，在41℃、200r/min条件下，水浴恒温发酵培养20小时，发酵结束后在沸水浴灭酶15分钟；发酵能将微生物产酶与酶水解反应同时进行，降低了成本，而且枯草芽孢杆菌产生的端肽酶对玫瑰花粉蛋白肽具有修饰作用，使制得的肽不但没有苦味，还具有发酵的天然芳香味；玫瑰花粉蛋白肽相对于蛋白质来说分子量更低，更易于被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中；
4）提取：将发酵液在5500r/min转速下离心30分钟，取上清液，用0.45μm滤膜过滤，然后以10kda超滤膜超滤，取滤液低温干燥即得玫瑰花粉蛋白多肽；将发酵液离心可以去除菌体和未发酵的玫瑰花粉残渣，本提取方法简便易行，成本低廉，提取效率较高。
实施例3：
发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的方法包括：破壁处理、提取蛋白、发酵、提取，具体包括以下步骤：
破壁处理:将玫瑰花用高速组织捣碎机粉碎于-20℃冻藏15小时，按料液比1g:10ml加入到78℃的pbs缓冲液，缓冲液的浓度为0.1mol/l，ph为7.4，迅速搅拌直至花粉溶解，然后对花粉溶液进行超声处理20分钟，接着迅速降温至42℃，并用水浴保温7小时，2℃搅拌提取10小时，取破壁溶液保存于2℃环境；对玫瑰花粉进行超声破壁处理可以有效地将花粉中的蛋白质与脂质、纤维素等分离开来，可以更加有效的提取玫瑰花粉蛋白；
提取蛋白：将破壁花粉溶液在4800r/min转速下低速离心16分钟后取上清液，3℃温度下在上清液中加入硫酸铵至饱和度为20%，溶解后静置2.5小时，3℃、11000r/min条件下将上述溶液离心10分钟，取沉淀，在清液中加入硫酸铵分别至饱和度为40%、60%、80%、100%后重复上述操作，即可依次得到硫酸铵饱和度为0-20%、20-40%、40-60%、60-80%、80-100%的水溶性蛋白质，将蛋白质合并后低温干燥即得玫瑰花粉蛋白；多硫酸铵饱和浓度提取可以将花粉中的蛋白充分、彻底的提取出来，实现对玫瑰花粉蛋白的全效利用，提取效率较高；
发酵：按培养液体积的10%将枯草芽孢杆菌种子液接入到发酵培养液中，种子液中的活菌数为1.1×108个/ml，在37℃、185r/min条件下，水浴恒温发酵培养15小时，发酵结束后在沸水浴灭酶12分钟；发酵能将微生物产酶与酶水解反应同时进行，降低了成本，而且枯草芽孢杆菌产生的端肽酶对玫瑰花粉蛋白肽具有修饰作用，使制得的肽不但没有苦味，还具有发酵的天然芳香味；玫瑰花粉蛋白肽相对于蛋白质来说分子量更低，更易于被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中；
提取：将发酵液在5400r/min转速下离心25分钟，取上清液，用0.45μm滤膜过滤，然后以10kda超滤膜超滤，取滤液低温干燥即得玫瑰花粉蛋白多肽；将发酵液离心可以去除菌体和未发酵的玫瑰花粉残渣，本提取方法简便易行，成本低廉，提取效率较高。
取10份玫瑰花粉蛋白、0.26份葡萄糖、0.56份氯化钠、0.01份10-樟脑磺酸溶解于160份蒸馏水中即得发酵培养液，调节ph值至6.7，在120℃下灭菌22分钟，取出，冷却至室温待用；玫瑰花粉蛋白既充当氮源又可作为微生物酶解的底物，发酵培养液可以实现微生物的迅速发酵与酶解；微量的10-樟脑磺酸可以作用于枯草芽孢杆菌的部分辅酶的金属活性中心，从而可以有效的提高相关辅酶的活性，促进枯草芽孢杆菌三羧酸循环的进行，进而增强枯草芽孢杆菌的代谢活力，提高发酵效率，降低发酵时间，提高产量与产率。
发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽的用途，玫瑰花粉蛋白多肽可以用于食品添加剂、化妆品、保健品中，发酵法制备的玫瑰花粉蛋白多肽不仅比玫瑰花粉蛋白本身更容易被人体吸收，还可以促进人体对其他营养素如铁和钙的吸收，更重要的是，玫瑰花粉蛋白多肽还具有较强的抗氧化活性，它可以清除体内多余的自由基，抑制脂质过氧化反应，能够有效的提升人体免疫力，增强肌肤活力与弹性，因此适用于食品添加剂、化妆品、保健品中。
本发明操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。