1.一种中华鳖黄病毒,其特征在于所述的中华鳖黄病毒部分基因序列如seqidno.1所示。
2.一种检测权利要求1所述的中华鳖黄病毒的特异性引物组,其特征在于,所述特异性引物组包括核苷酸序列如seqidno.4所示的tsfv-f1和核苷酸序列如seqidno.5所示的tsfv-r1。
3.一种与权利要求2所述检测中华鳖黄病毒配合使用的探针,其特征在于,所述探针核苷酸序列如seqidno.6所示。
4.一种标准质粒,其特征在于,所述的质粒中如含有seqidno.7所示的中华鳖黄病毒标准品序列。
5.如权利要求4所述的标准质粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:对seqidno.7所示的中华鳖黄病毒标准品序列进行pcr扩增,利用特异性引物p1/p2扩增1500bp的靶序列,采用基因克隆技术,将靶序列与t载体进行连接,构建含有1500bp特异性序列的阳性重组质粒;所述的特异性引物p1序列如seqidno.2所示,特异性引物p2序列如seqidno.3所示。
6.一种检测中华鳖黄病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括权利要求2所述的特异性引物组、权利要求3所述的探针和权利要求4所述的标准质粒。
7.如权利要求6所述的检测中华鳖黄病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括4×taqmanfastvirus1-stepmastermix和depc水。
8.如权利要求6所述的检测中华鳖黄病毒的试剂盒,其特征在于,所述特异性引物组浓度为18μm,探针的浓度为5μm。
9.一种利用权利要求8所述的试剂盒检测中华鳖黄病毒的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:利用所述的引物组与探针进行荧光定量pcr扩增待测样品,设depc水为阴性对照,标准质粒为阳性对照,荧光信号设定为fam荧光素,每个循环结束收集荧光信号;
结果判断:(1)ct值≤35且出现典型扩增曲线,判定为tsfvrt-qpcr结果阳性;检测无扩增曲线,或ct值≥40,判定为tsfvrt-qpcr结果阴性;(2)对于35<ct值<40的样品,应进行重复检测;若复检后,ct值≤35且出现典型扩增曲线,判定为tsfvrt-qpcr结果阳性,否则判定为tsfvrt-qpcr结果阴性。
10.一种权利要求2所述的引物组或权利要求3所述的探针或权利要求4所述的标准质粒或权利要求6-8任一项所述的试剂盒在检测中华鳖黄病毒中的应用。