一种从樟子松树皮中提取醇溶性物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物有效成分提取工艺，具体地说，涉及一种超声波辅助溶剂分段提 取樟子松树皮中天然产物的方法。
【背景技术】
[0002] 樟子松是我国三北地区主要优良造林树种之一，分布广泛，资源丰富，樟子松树皮 作为重要的林业副产物，其资源利用率较低。
[0003] 研宄表明，樟子松树皮用乙醇提取的醇溶性物质中含有多糖、酚性物质、有机酸、 鞣质、黄酮等有效成分。其中以黄酮为公认的具有多种保健功效的天然提取物。樟子松中 的油脂含量较低，约为树皮干重的1% -3%。
[0004] 由于樟子松树皮中油脂含量较低，因此没有引起人们的重视，当前提取樟子松树 皮中醇溶性物质的方法主要为直接用乙醇提取，运用该方法，所得的醇溶性天然产物中黄 酮的含量较低。
【发明内容】
[0005] 针对当前的方法中，直接用醇类物质提取样樟子松树皮中的活性成分的方法存在 的提取率低的缺陷。本发明提供一种分段提取樟子松树皮中天然产物的方法。
[0006] 本发明所述从樟子松树皮中提取醇溶性物质的方法，包括如下步骤：
[0007] (1)将樟子松树皮粉碎成20?80目大小的颗粒，投入到正己烷/氯仿中，进行超 声处理，所述超声处理的条件为：温度30?60°C，时间15?60min，频率15?40KHz;，得 到混合物A;
[0008] (2)对所述混合物A进行过滤，得到滤液a和滤渣；将所述滤液a进行蒸馏，蒸出 正己烷/氯仿，得到脂类物质；
[0009] (3)将所述滤渣投入到乙醇溶液中，对其进行超声处理，所述超声处理的条件为： 温度30?55°C，超声时间15?60min，频率10?35KHz得到混合物B;
[0010] (4)对所述混合物B进行过滤，得到滤液b，对滤液b进行蒸馏，蒸出乙醇溶液，得 到醇溶性物质的浓缩液，再将所述浓缩液置于35°C烘箱干燥12-24h，即得醇溶性物质；
[0011] 所述步骤（1)中的温度比步骤（3)中的温度高5?15°C，所述步骤（1)中的频率 比步骤（3)中的超声频率高5-lOKHz。
[0012] 本发明促所述正己烷/氯仿中正己烷和氯仿的体积比为1 : 5?5 : 1，由于樟子 松树皮中油脂含量低，用传统的有机溶剂如石油醚、乙醚等提取效果不好，采用复合提取剂 正己烷/氯仿提取效果明显改善。
[0013] 本发明中所述颗粒与正己烷/氯仿的质量体积比为I: 10?1 : 30。
[0014] 本发明中所述乙醇溶液的浓度为40%?80%。
[0015] 本发明中所述颗粒与乙醇溶液的重量体积比为I: 10?1 : 50
[0016] 本发明所述的提取方法包括如下的优选方案：
[0017] 1)将樟子松树皮粉碎成20?80目大小的颗粒，投入到正己烷/氯仿中，所述正 己烷/氯仿，正己烷氯仿的体积比为I: 1?1 : 2,所述颗粒与正己烷/氯仿的质量体积 比为1 : 15-1 : 20;进行超声处理，所述超声处理的条件为：温度35?50°C，时间15? 60min，频率25?35KHz;，得到混合物A;
[0018] (2)对所述混合物A进行过滤，得到滤液a和滤渣；将滤液a进行蒸馏，蒸出正己 烷/氯仿，得到脂类物质；
[0019] (3)将所述滤渣投入到乙醇溶液中，所述乙醇溶液的浓度为50% -80%，所述颗粒 与乙醇溶液的质量体积比为1 : 20-1 : 25,对其进行超声处理，所述超声处理的条件为： 温度30?35°C，超声时间15?60min，频率15?25KHz，得到混合物B;
[0020] (4)对所述混合物B进行过滤，得到滤液b，对滤液b进行蒸馏，蒸出乙醇溶液，得 到醇溶性物质的浓缩液，再将所述浓缩液置于35°C烘箱干燥12-24h，即得醇溶性物质；
[0021] 所述步骤⑴中的温度比步骤（3)中的温度高5?15°C，所述步骤⑴中的频率 比步骤（3)中的超声频率高5-lOKHz。
[0022] 本发明提供的一种超声波辅助溶剂分段提取樟子松树皮中天然产物的方法，具有 如下优点：
[0023] (一）本发明采用的分段提取的方法，先提取脂类再提取醇溶性物质，有效减少了 醇提物中油脂的干扰，提高醇提物中黄酮等活性物质的提取率，降低了后续纯化工艺的难 度。
[0024] (二）采用本发明方法成功提取分离出脂类与醇溶性物质两类产品，提取效率高， 分离效果好，成功实现了将现代提取分离技术应用于樟子松树皮的精细化利用，对樟子松 树皮的多元化、高值化、精细化利用具有重要的意义。
【附图说明】
[0025] 图1 :分段提取法所得醇溶性物质的LC/MS/MS谱图；
【具体实施方式】
[0026] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例 中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
[0027] 以下实施例中使用的樟子松树皮采集自黑龙江省大兴安岭。
[0028] 实施例1 一种从樟子松树皮中提取醇溶性物质的方法
[0029] 包括如下步骤：
[0030] (1)将20g樟子松树皮粉碎成20?80目大小的颗粒，并投入到300mL的正己烷 /氯仿中，正己烷与氯仿的体积比为1 : 5,在35°C条件下超声波作用30min，超声频率为 25KHz〇
[0031] (2)趁热对处理后的混合物进行真空抽滤，得到滤液a和滤渣。将滤液a置于旋转 蒸发仪进行减压蒸馏，蒸出正己烷/氯仿溶剂，得到脂类物质。
[0032] (3)将步骤2)中的滤渣投入400mL、50%乙醇溶液中，在30°C条件下超声波作用 30min，超声频率为19KHz。
[0033] (4)趁热对处理后的混合物进行真空抽滤，得到滤液b。将滤液a置于旋转蒸发 仪进行减压蒸馏，蒸出乙醇溶液，得到醇溶性物质的浓缩液，再将剩余物置于35°C烘箱干燥 12h〇
[0034] 按此方法提取的樟子松树皮中的脂类物质为18. 60mg/g，醇溶性物质的总量为 88.63mg/g〇
[0035] 用亚硝酸铝-硝酸铝-氢氧化钠显色法（以芦丁计）对所得的醇溶性物质中的黄 酮进行检测，其中黄酮含量为23. 09mg/g。
[0036] 实施例2 -种从樟子松树皮中提取醇溶性物质的方法
[0037] (1)将20g樟子松树皮粉碎成30?60目大小的颗粒，并投入到400mL的正己烷 /氯仿中，正己烷与氯仿的体积比为1 : 1，在50°C条件下超声波作用60min，超声频率为 30KHz〇
[0038] (2)趁热对处理后的混合物进行真空抽滤，得到滤液a和滤渣。将滤液a置于旋转 蒸发仪进行减压蒸馏，蒸出正己烷/氯仿溶剂，得到脂类物质。
[0039] (3)将步骤2)中的滤渣投入500mL、80%乙醇溶液中，在35°C条件下超声波作用 60min，超声频率为25KHz。
[0040] (4)趁热对处理后的混合物进行真空抽滤，得到滤液b。滤液b用旋转蒸发仪进行 减压浓缩，蒸出乙醇溶剂，得到脂溶性物质的浓缩液，将浓缩液置于35°C烘箱干燥16h，得 到醇溶性物质。
[0041] 按此方法提取的樟子松树皮中的脂类物质为24. 72mg/g，醇溶性物质的总量为 95.24mg/g〇
[0042] 用亚硝酸铝-硝酸铝-氢氧化钠显色法（以芦丁计）测量对所得的醇溶性物质中 的黄酮进行检测，其中黄酮含量为26. 28mg/g。
[0043] 实施例3 -种从樟子松树皮中提取醇溶性物质