羰基还原酶生物催化生产噻吩基手性醇类化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于酶与生物催化领域，具体涉及利用羰基还原酶生物催化生产噻吩基手 性醇类化合物的方法。
【背景技术】
[0002] 度洛西汀（Duloxetine)是第三代抗抑郁药，是市场销售最主要的抗抑郁药之一， 能有效地抑制5-羟色氨和去甲肾上腺素的再摄取（Wong，D.T.，etal.LifeSci，1988,43 : 2049-2057)，并且对全身疼痛、胃肠道紊乱等疾病也有良好的药效。研宄表明（S)_度洛西 汀（化学名，（S)-(+)-N-甲基-3-(l-萘氧基）-3-(2_噻吩）-丙胺）才具有药物活性，因 此（S)构型中间体的获得成为度洛西汀合成中的关键步骤。
[0003] 度洛西汀手性中间体的生产目前还采用化学工艺还原后进行手性拆分，其主要存 在的问题有：需要大量的拆分剂，反应步骤长，能耗大；废物排放量大，环境污染严重；产率 低，产品光学纯度不高，重金属残留问题。基于生物催化立体选择性高、副产物少、反应条件 温和以及环境友好等方面的独特优势，利用生物催化生产度洛西汀中间体的研宄也迅速发 展。
[0004] 分析（S)-度洛西汀的结构，根据反向合成策略以及底物易催化、稳定等原则，可 以利用如下所列的5种噻吩基酮类底物S1-S5经不对称还原可获得度洛西汀手性中间体 (Tang，C.G.，etal.BiotechnolLett，2011，33(7) :1435_1440)〇
[0005]
【主权项】
1. 以结构通式（I)为底物，经羰基还原酶不对称生物催化得到S构型醇，
其中 R 取代基为 COOCH3, COOCH2CH3, CONHCH3, CH2Cl, CN 或者 CH2N(CH3)2O
2. -种羰基还原酶KRED2157,其基因序列为SEQ ID:No. 1，氨基酸序列为SEQ ID: No. 2 〇
3. -种羰基还原酶KRED2935,其基因序列为SEQ ID:No. 3,氨基酸序列为SEQ ID: No. 4〇
4. 根据权利要求1所述，其特征是R取代基为COOCH 3或者COOCH 2013时，所用的羰基还 原酶为 KRED2157, ChKRED07, ChKREDIO, ChKREDl 1，ChKRED12 或者 ChKRED14。
5. 根据权利要求1所述，其特征是R取代基为CONHCHJt，所用的羰基还原酶为 ChKRED07, KRED2157, ChKRED03, ChKREDIO, ChKRED23, ChKRED24, ChKRED26 或者 ChKRED14。
6. 根据权利要求1所述，其特征是R取代基为CH 2C1时，所用的羰基还原酶为ChKRED07 或者 ChKRED2935。
7. 根据权利要求1所述，其特征是R取代基为CN时，所用的羰基还原酶为ChKRED07， ChKREDIO, ChKREDll，ChKRED12, ChKRED14, KRED2157, ChKRED03 或者 KRED2935。
8. 根据权利要求1所述，其特征是R取代基为CH 2N(CH3)2时，所用的羰基还原酶为 ChKREDIO, ChKRED03 或者 ChKRED05。
【专利摘要】本发明公开了以羰基还原酶为生物催化剂，经不对称还原5种噻吩基酮类底物合成相应(S)构型醇的方法。该方法的催化剂易制备，水相催化，反应条件温和，反应体系简单，无副反应，ee值绝大多数大于99％，为噻吩基手性醇类生产提供了环境友好的生物催化方法，并具有工业应用潜力。
【IPC分类】C12N9-04, C12P17-00, C12N15-53
【公开号】CN104830924
【申请号】CN201510257701
【发明人】吴中柳, 任志强, 刘艳
【申请人】中国科学院成都生物研究所
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年5月20日