丁酰基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，涉及丁酰基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 丁酰基梧桐素（Butyrylmallotolerin)，黄色针晶，mpl97-198°C ,主要存在于大戟 科（Euphorbiaceae)野梧桐 Mallotus japonicus Muell. Arg.果皮中，分子式：C22H24O9,分 子量：432. 43,结构式为
现代药理研宄表明，丁酰基梧桐素具有细胞毒作用。对HeLa细胞的ID50为342ng/ mL，对 KB 细胞的 ED50 为 0· 95 μ g/mL，对 L5178Y 细胞株的 ED50 为 0· 82 μ g/mL。对 H印-2、 ?〇13、816、1^5178￥、？388 细胞的比50(以8/1^)依次为0.91、63、2.38、27、1.22。丁酰基梧 桐素还具有抗病毒作用。抑制单疱病毒HSV-I的复制，其ED50为196ng/mL。
[0003] 通过文献检索，国内尚未见丁酰基梧桐素用于制备抗肿瘤药物。
【发明内容】
[0004] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，应用丁酰基梧桐素制备抗肿瘤 药物。
[0005] 本发明的技术方案如下： 本发明所述的丁酰基梧桐素，其制备方法包括以下步骤： (1) 取野梧桐的果皮粉碎，按固液体积比为5 :1. 5-2加入夹带剂，在压力22-35MPa，温 度35-48°C条件下，通入液态CO2萃取90-180min，在压力7-9MPa，温度30-35°C条件下解析， 收集萃取液； (2) 将步骤（1)中得到的萃取液加硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液； (3) 将步骤（2)中得到的脱色液浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱，用石油 醚-乙酸乙酯洗脱纯化，得到丁酰基梧桐素粗品； (4) 粗品经过制备型高效液相色谱精制得到高纯度的丁酰基梧桐素。
[0006] 所述步骤（1)中，夹带剂为甲醇或乙醇溶液。
[0007] 所述步骤（2)中，硅藻土加入量为药材量的3-4. 5% 所述步骤（3)中，石油醚-乙酸乙酯的体积比为3:14。
[0008] 所述步骤（4)中，制备型高效液相色谱流动相为甲醇-乙腈-水，体积比为 19:38:45。
[0009] 丁酰基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0010] 通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察丁酰基梧桐素的抗肿瘤作用，结果表明丁 酰基梧桐素对A549肺癌和HT29结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副 作用小。
[0011] 本发明的有益效果通过以下实验得到了验证： 实验方法： 1、受试提取物：丁酰基梧桐素提取物 (1)性状：结晶，味苦。
[0012] (2)规格：含丁酰基梧桐素彡90%。
[0013] (3)溶剂：乙醇或甲醇。
[0014] (4)储存条件：4°C，密封保存。
[0015] 2、细胞株：肺癌细胞株A549、结肠癌细胞株HT29。
[0016] 3、给药剂量和方法 丁酰基梧桐素组：l〇mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。
[0017] 阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0018] 阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0019] 灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。
[0020] 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2 X 10 6细胞悬液，注射 至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对 模型动物存活率的影响。
[0021] (2)肺内种植瘤肺转移模型：取2X 10 6细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15 天取肺，测量瘤重和肺转移数。
[0022] (3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。
[0023] 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，丁酰基梧桐素组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转 移的作用，可延长实验小鼠的生存期。
[0024] 表1 丁酰基梧桐素对种植瘤的抑制作用（n=20，i±S)
表3 丁酰基梧桐素对实验小鼠生存率的影响（n=20, ％)
由表1、表2和表3可以看出，丁酰基梧桐素组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对 照组基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。
[0025] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，将丁酰基梧桐素与医学上可接受的辅料一起制成 抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
[0026] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂 肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。
[0027] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0028] 实施例1 丁酰基梧桐素的制备 取500g野梧桐的果皮粗粉，置于萃取釜中，按固液体积比为5 :2加入甲醇作为夹带剂， 在压力22MPa，温度38°C条件下，通入液态C02, C02流量为4. 5ml/g生药/min，萃取120min， 在压力7MPa，温度32°C条件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色 液，浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱(柱压为6bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-乙 酸乙酯3:14洗脱纯化，得到丁酰基梧桐素粗品；以体积比19:38:45甲醇-乙腈-水为流动 相，粗品用流动相溶解，注入制备型高效液相色谱仪，控制流速为20ml/min，收集目标流分， 连续制备，冷冻干燥得高纯度的丁酰基梧桐素，经HPLC检测，纯度94. 9%。
[0029] 实施例2 片剂：丁酰基梧桐素40g，淀粉135g，鹅去氧胆酸盐25g，制粒，压片制成1000片。服用 方法：成人一次1片，一日2次。
[0030] 实施例3 胶囊：丁酰基梧桐素40g，淀粉135g，壳聚糖25g，混匀，制成1000粒。服用方法：成人 一次1粒，一日2次。
【主权项】
1. 结构式如下所示的了酷基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用。2. 如权利要求1所述的了酷基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，了酷 基梧桐素在肺癌药物中的应用。3. 如权利要求1所述的了酷基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，了酷 基梧桐素在结肠癌药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种丁酰基梧桐素在制备抗肿瘤药物中的应用，通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察丁酰基梧桐素的抗肿瘤作用，结果表明丁酰基梧桐素对肺癌和结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将丁酰基梧桐素与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
【IPC分类】A61K31/122, A61P35/00
【公开号】CN104922101
【申请号】CN201510262750
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年5月22日