一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法_2

文档序号:9300603阅读:来源:国知局
燥:将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥,干燥过程中的进口温 度为190 °C,出口温度为95 °C。
[0034] 采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽,小分子牛骨胶原肽的 平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
[0035] 实施例2
[0036] 本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法,具体包括以下步骤:
[0037] 1)粉碎:将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后,再利用碎骨机粉碎至2cm 的骨块。
[0038] 2)提取分离:所述提取分离过程为:将经过粉碎后的牛骨清洗干净后,放入蒸煮 罐中进行蒸煮,牛骨与水的体积比为1:3,蒸煮压力为0. 15MPa,蒸煮温度为100°C,蒸煮时 间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液,采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白 提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
[0039] 3)酶解:在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解,一次酶解温 度为50°C,一次酶解时间为lh,骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0. 1% ;
[0040] 骨胶原蛋白酶解后,用混合酸调节一次酶解液的pH值至6,然后加入脯氨酸蛋 白酶进行二次酶解,二次酶解时间为2 h,脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的 0. 1% ;
[0041] 将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90°C,并保持5min,进行灭酶处 理。
[0042] 本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性,首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进 行复合酶解,使得到的产品实用性强,小分子活性肽的得率很高,得率高达90%。
[0043] 4)复合过滤:复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤,所述活性碳过滤为将灭酶处理 后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳,活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2%,将牛 骨胶原蛋白酶解液升温至80°C,并保温5min ;然后降温至70°C,静置30min ;
[0044] 膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤 器和孔径为〇. 1 μ m的多层膜过滤器进行过滤,膜过滤压力为0.1 MPa。
[0045] 本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用,能有效去除有害重金属, 使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
[0046] 5)浓缩:将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30%, 浓缩温度控制在55°C,浓缩压力为-0· 4MPa。
[0047] 6)干燥:将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥,干燥过程中的进口温 度为180 °C,出口温度为85 °C。
[0048] 采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽,小分子牛骨胶原肽的 平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
[0049] 实施例3
[0050] 本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法,具体包括以下步骤:
[0051] 1)粉碎:将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后,再利用碎骨机粉碎至 2. 5cm的骨块。
[0052] 2)提取分离:所述提取分离过程为:将经过粉碎后的牛骨清洗干净后,放入蒸煮 罐中进行蒸煮,牛骨与水的体积比为1:4,蒸煮压力为0. 18MPa,蒸煮温度为110°C,蒸煮时 间为3h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液,采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白 提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
[0053] 3)酶解:在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解,一次酶解温 度为53°C,一次酶解时间为I. 5h,骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0. 2% ;
[0054] 骨胶原蛋白酶解后,用混合酸调节一次酶解液的pH值至6. 5,然后加入脯氨酸蛋 白酶进行二次酶解,二次酶解时间为3 h,脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的 0. 2% ;
[0055] 将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至95°C,并保持8min,进行灭酶处 理。
[0056] 本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性,首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进 行复合酶解,使得到的产品实用性强,小分子活性肽的得率很高,得率高达90%。
[0057] 4)复合过滤:复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤,所述活性碳过滤为将灭酶处理 后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳,活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的3%,将牛 骨胶原蛋白酶解液升温至90°C,并保温Smin ;然后降温至78°C,静置Ih ;
[0058] 膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤 器和孔径为〇. 1 μπι的多层膜过滤器进行过滤,膜过滤压力为0. 2MPa。
[0059] 本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用,能有效去除有害重金属, 使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
[0060] 5)浓缩:将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为35%, 浓缩温度控制在60°C,浓缩压力为-0· 5MPa。
[0061] 6)干燥:将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥,干燥过程中的进口温 度为188 °C,出口温度为90 °C。
[0062] 采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽,小分子牛骨胶原肽的 平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
[0063] 实施例4
[0064] 本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法,具体包括以下步骤:
[0065] 1)粉碎:将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后,再利用碎骨机粉碎至3cm 的骨块。
[0066] 2)提取分离:所述提取分离过程为:将经过粉碎后的牛骨清洗干净后,放入蒸煮 罐中进行蒸煮,牛骨与水的体积比为1:5,蒸煮压力为2MPa,蒸煮温度为120°C,蒸煮时间为 4h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液,采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取 液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
[0067] 3)酶解:在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解,一次酶解温 度为55°C,一次酶解时间为2h,骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0. 3% ;
[0068] 骨胶原蛋白酶解后,用混合酸调节一次酶解液的pH值至7,然后加入脯氨酸蛋 白酶进行二次酶解,二次酶解时间为4 h,脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的 0. 3% ;
[0069] 将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至100°C,并保持lOmin,进行灭酶处 理。
[0070] 本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性,首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进 行复合酶解,使得到的产品实用性强,小分子活性肽的得率很高,得率高达90%。
[0071] 4)复合过滤:复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤,所述活性碳过滤为将灭酶处理 后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳,活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的4%,将牛 骨胶原蛋白酶解液升温至l〇〇°C,并保温IOmin ;然后降温至80°C,静置2h ;
[0072] 膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤 器和孔径为〇. 1 μ m的多层膜过滤器进行过滤,膜过滤压力为0. 15MPa。
[0073] 本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用,能有效去除有害重金属, 使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
[0074] 5)浓缩:将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为25%, 浓缩温度控制在65°C,浓缩压力为-0· 6MPa。
[0075] 6)干燥:将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥,干燥过程中的进口温 度为185 °C,出口温度为95 °C。<
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