[0128] 3. 384板倒过来压在6MG 384板上。两板对调，6MG板在上。敲打6MG板背面，使 树脂落入装有单碱基延伸产物的384孔板中。封口膜封好装有单碱基延伸产物和树脂的 384板，15rpm，30min，上下颠倒板子，使树脂在水中分散好，充分纯化。（注：实际操作中ABI 9700随机自带的和中心实验室订的ABI384孔板均有四个小的塑料突起，妨碍了与6MG板的 贴合，用刀片切去后即可）
[0129] 4.机械臂点样之前离心2000转，3min。
[0130] 实施例1临床样本评估
[0131] 入组722例患者（男401例，女321例），根据DSM-IV诊断标准，经过两位高年资 医师诊断确诊精神分裂症，单用非典型抗精神病药一年以上（氯氮平：631例，奥氮平：59 例，利培酮：32例），收集病史及临床资料，以阳性与阴性症状量表（PANSS)评定疗效。采集 血液，进行代谢指标测定。
[0132] 代谢综合征定义采用国际糖尿病联盟（IDF) 2005年颁布的诊断标准：中心性肥胖 (中国男性腰围彡90cm，女性彡80cm)加上以下4个因素中的任意2项，（1)甘油三酯（TG) 水平升高：>1.7mm〇l/L(150mg/dL)，或已经进行针对此项血脂异常的治疗。（2)高密度脂蛋 白胆固醇（HDL-C)降低：男性〈1. 03mmol/L(40mg/dL)，女性〈1. 29mmol/L(50mg/dL)，或已经 进行针对此项血脂异常的治疗。（3)血压升高：收缩压多130mmHg或舒张压多85mmHg，或已 经诊断高血压并开始治疗。（4)空腹血糖（FPG)升高：彡5. 6mmol/L(100mg/dL)，或已经诊 断为2型糖尿病。
[0133] 722例患者中出现代谢综合征的比率为40. 3%，氯氮平组为41. 3%，奥氮平组 为35. 5%，利培酮组为28. 1%。经过FDR校正后，SREBFl基因 rsll654081-T等位基因在 代谢综合征组与非代谢综合征组间的分布具有统计学差异（P = 〇. 010, OR = 2. 27,95% Cl: 1. 32-3. 90)。经Logistic回归校正混杂因素后，两组间rsll654081-T等位基因的分布 差异仍具有统计学意义（P = 〇. 019, OR = 2. 56,95 % Cl: 1. 44-4. 54)。在代谢综合征组， rsll654081的TT基因型分布频率更高，差异具有统计学意义（P = 0. 026);其基因型TT比 CT的OR为2. 37(95% Cl :1. 36-4. 12)。SCAP基因的等位基因及基因型频率在两组间未见 统计学差异（P>〇. 05)。
[0134] 表1伴或不伴代谢综合征患者的临床特征
[0136] 缩写：MetS，代谢综合征；SD，标准差；CL0,氯氮平；0LA，奥氮平；RIS，利培酮； BMI，体质指数.
[0137] 实施例2抗精神病药物相关代谢综合征易感性的试剂盒
[0138] 基于SREBFl基因 rsll654081-T等位基因与抗精神病药相关代谢综合征之间的相 关性，采用SEQ ID NO. :2、3(也可另行设计）作为引物，以病人的血液样本的DNA为模板进 行扩增并检测。
[0139] 所制备的试剂盒中含有SEQ ID NO. :2、3所示的引物，以及PCR反应液。
[0140] 实施例3抗精神病药物相关代谢综合征易感性辅助检测
[0141] 采用实施例2中的试剂盒以及通用方法，取50例实施例1中已知患有抗精神病药 物相关代谢综合征的患者，以及50例未患有抗精神病药物相关代谢综合征的样本。将两组 样本混合，并利用随机双盲的方法，检测所有样本中SNP的存在情况，并将其与已知患有疾 病的样本进行结果比对。
[0142] 检测结果显示有30例含有本发明SNP的样本，而其中28例为来自于患有抗精神 病药物相关代谢综合征的对象。
[0143] 由此可见，本发明SNP与MetS有着非常强烈的相关性，而采用该SNP位点可以对 MetS的易感性进行有效的预测和评估。
[0144] 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独 引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可 以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范 围。
【主权项】
1. 一种分离的含单核苷酸多态性即SNP位点的多核苷酸、或其检测试剂的用途，其特 征在于，用于制备检测抗精神病药物相关代谢综合征易感性的试剂盒，其中，所述的多核苷 酸中的SNP位点对应于： 人染色体 17pll.2 区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))，rsll654081，C -T。2. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的多核苷酸如SEQ ID NO. : 1所示。3. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的易感性包括： ⑴如果检测对象的染色体17pll. 2区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))， rsll654081携带T等位基因或基因型为TT，则说明所述检测对象患有抗精神病药物相关代 谢综合征的易感性较高；和/或 (ii)如果检测对象的染色体 17pll. 2 区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))， rs 11654081携带C等位基因或基因型为CT，则说明所述检测对象患有抗精神病药物相关代 谢综合征的易感性较低。4. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的检测试剂包括引物对、和/或探针。5. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的检测试剂为引物对，所述引物对中引 物的长度为15_50bp，且特异性地杂交并扩增出含有所述SNP的扩增产物。6. 如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的引物对序列如SEQ ID NO. :2、3所示。7. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的抗精神病药物包括：氯氮平、或奥氮 平。8. -种用于检测抗精神病药物相关代谢综合征易感性的试剂盒，所述的试剂盒含有检 测SNP的检测试剂，且所述试剂盒的扩增产物含有所述的SNP，其中所述的SNP如下： 人染色体 17pll.2 区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))，rsll654081，C -T。9. 如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还含有对应于以下SNP的多 核苷酸作为阳性对照： 人染色体 17pll.2 区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))，rsll654081，C -T。10. -种体外非诊断性的判断SREBP-I基因是否为抗精神病药物相关代谢综合征相关 基因的方法，其特征在于，包括步骤： (i) 提供一样本，并检测所述样本中SREBP-I基因的SNP位点，其中，所述的位点为人染 色体 17pll. 2 区域（chrl7:17708129(GRCh37/hgl9))，rsll654081，C - T ; (ii) 当⑴中的SNP位点的等位基因检测为T，或基因型检测为TT时，则说明所述样 本中含有的SREBP-I基因为抗精神病药物相关代谢综合征的相关基因； 当（i)中的SNP位点的等位基因检测为C，或基因型检测为CT时，，则说明所述样本中 含有的SREBP-I基因不是抗精神病药物相关代谢综合征的相关基因。
【专利摘要】本发明提供了一种抗精神病药物相关代谢综合征的易感基因及其应用。具体地，涉及一种分离的含单核苷酸多态性即SNP位点的多核苷酸、或其检测试剂的用途，用于制备检测抗精神病药物相关代谢综合征易感性的试剂盒，其中，所述的多核苷酸中的SNP位点对应于：人染色体17p11.2区域(chr17:17708129(GRCh37/hg19))，rs11654081，C→T。通过检测该基因及SNP，能够辅助性判断个体对于抗精神病药物相关代谢综合征的易感性，为该综合征的诊断和相应治疗提供了新的途径；此外，该基因及SNP的发现，还提供了开发治疗相关代谢性综合征的药物新靶点，并可作为用于该综合征患者转归、预后的分子标志。
【IPC分类】C12Q1/68
【公开号】CN105018602
【申请号】CN201510363820
【发明人】陈剑华, 徐一峰, 师咏勇, 杨琳, 李岩, 王琰, 梁世桥
【申请人】上海市精神卫生中心
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年6月26日