铵1.lg、磷酸〇? 275ml，用1%的石灰水调pH至5. 5-6. 5,经115°C、20分钟蒸汽 灭菌，冷却后备用。
[0156] ②酵母融合菌0.55kg液体菌种的培养
[0157] 将酵母融合菌一级菌种转种于上述的液体培养基中，经28-32°C、24-48小时静置 培养，其培养液为二级菌种。
[0158] ③酵母融合菌5. 5kg液体培养基及液体菌种的制备
[0159] 在5500ml的新鲜豆腐生产时产生的废水中加入葡糖糖llg、硫酸铵llg、磷 酸2. 75ml，用1 %的石灰水调pH至5. 5-6. 5,分装于500ml的三角烧瓶中，每瓶装量 120-130ml，塞上塞子，经115°C、20分钟蒸汽灭菌，冷却后备用。
[0160] 以10%的接种量将二级菌种转种于已灭菌的三角烧瓶培养基中，放摇床上，经 120-150转/分钟、28-32°C、24-48小时振荡培养，培养菌液即为三级菌种。
[0161] ④酵母融合菌55kg液体菌种培养基及液体菌种的制备
[0162] 在100立升的发酵罐中，装入55kg的新鲜豆腐生产时产生的废水加入葡糖糖 ll〇g、硫酸铵ll〇g、磷酸27. 5ml，用1%的石灰水调pH至5. 5-6. 5,充分搅拌均匀，使其无机 盐全部溶解后，备用。
[0163] 将摇床上振荡培养的5. 5kg液体酵母融合菌种转种于100立升发酵罐装有55kg 的培养基中，经28-32°C、24-48小时通气搅拌，好氧发酵培养后，即得55kg酵母融合菌液体 菌种。
[0164] 2. 土著芽孢杆菌35kg液体菌种的制备；
[0165] 土著巨大芽孢杆菌琼脂斜面培养基的制备及斜面菌种的培养
[0166] ①土著巨大芽孢杆菌琼脂斜面培养基的制备
[0167]蒙金娜有机磷细菌培养基：葡萄糖1 %、硫酸镁0. 03 %、硫酸亚铁0. 003%、硫酸锰 0. 003%、碳酸钙0. 5%、氯化钾0. 03%、硫酸钙0. 05%、NaClO. 03%、卵磷脂0. 02g、琼脂粉 2%，加水100ml，加热溶解后，用1%NaOH调pH至7. 0-7. 2,经115°C、20分钟蒸汽灭菌，然 后分装于15*2cm灭菌的试管中，摆成斜面待凝固后备用。
[0168] ②取土著巨大芽孢杆菌母钟斜面菌种，在无菌条件下转种于上述制备的琼脂斜面 培养基上，经28-32°C、24-72小时培养，即得斜面菌种，为一级菌种。
[0169] 液体培养基及液体菌种的制备
[0170] ①土著巨大芽杆菌液体培养基的制备
[0171] 在500ml的三角瓶中加入350ml的新鲜豆腐生产时产生的废水，加入葡萄糖0. 7g、 硫酸铵〇. 7g、磷酸0. 175ml，用1%的石灰水调pH至6. 5-7. 0,经115°C、20分钟蒸汽灭菌， 冷却后备用。
[0172] ②将一级菌种在无菌条件下转种于上述制备的液体培养基中，经28-32°C、24_72 小时静置培养，即得液体菌液，为二级菌种。
[0173] ③在3500ml的新鲜豆腐生产时产生的废水中加入葡萄糖7g、硫酸铵7g、磷酸 1. 75ml，用1%的石灰水调pH至6. 5-7. 0,分装于500mL的三角瓶中，每瓶装量120-130mL， 经115°C、20分钟蒸汽灭菌，冷却后备用。
[0174] ④将二级菌种在无菌条件下转种于500ml三角瓶的培养基中，按10%的菌种接种 量接种，放摇床上，经120-150转/分钟，28-32°C、28-48小时振荡培养，培养菌液即为三级 菌种。
[0175]⑤在40立升的发酵罐中加35kg的新鲜豆腐生产时产生的废水中加入葡萄糖70g、 硫酸铵70g、磷酸17. 5ml，用1%的石灰水调pH至6. 5-7. 0,经115°C、20分钟蒸汽灭菌，冷 却后备用。
[0176] ⑥将三级菌种在无菌条件下转种于40立升发酵罐装有35kg的液体培养基中，经 28-32°C、24-48小时通气搅拌，好氧培养后即得35kg土著巨大芽孢杆菌液体菌种。
[0177] 3.黑曲霉菌10kg液体菌种的制备；
[0178]a、黑曲霉菌琼脂斜面培养基及菌种的制备
[0179] ①黑曲霉菌琼脂斜面培养基的制备
[0180] 马铃薯-蔗糖琼脂培养基：马铃薯20%、蔗糖2%、琼脂2%、1水100m，加水加热 溶解后，用1 %NaOH调pH至5. 5-6. 5,经115°C、20分钟蒸汽灭菌，然后分装于15*2cm灭菌 的试管中，摆成斜面待凝固后备用。
[0181] ②取黑曲霉菌母钟斜面菌种，在无菌条件下，转种于上述制备的琼脂斜面培养基 上，经28-32°C、24-72小时培养，即得斜面菌种，为一级菌种。
[0182]b、黑曲霉菌液体培养基的制备及液体菌种的培养
[0183] ①黑曲霉菌液体培养基的制备
[0184] 在300ml的三角瓶中加入100ml的新鲜豆腐生产时产生的废水，加入葡萄糖0. 2g、 硫酸铵〇. 2g、磷酸0. 05ml，用1%的石灰水调pH至5. 5-6. 5,经115°C、20分钟蒸汽灭菌，冷 却后备用。
[0185] ②将一级菌种在无菌条件下，转种于上述液体培养基中，经28-32°C、24-72小时 静置培养，即为液体菌种，为二级菌种。
[0186] ③在1000ml的新鲜豆腐生产时产生的废水中加入葡萄糖2g、硫酸铵2g、磷酸 0. 5ml，用1%的石灰水调pH至5. 5-6. 5,经115°C、20分钟蒸汽灭菌后，分装于500ml的三 角烧瓶中，每瓶装量120_130ml，冷却备用。
[0187] ④将二级菌种在无菌条件下，按菌种10%的接种量接种于三角瓶培养基中，放摇 床上经120-150转/分钟、28-32°C、24-72小时振荡培养，所得菌种即为三级菌种。
[0188] ⑤在20立升的发酵罐中，加10kg的新鲜豆腐生产时产生的废水，加葡萄糖20g、硫 酸铵20g、磷酸5. 0ml，用1%的石灰水调pH至5. 5-6. 5,经115°C、20分钟蒸汽灭菌，冷却后 备用。
[0189] ⑥将三级菌种在无菌条件下，转种于20立升发酵罐装有10kg的液体培养基中，经 28-32°C、24-72小通气搅拌，好氧培养后，即得10kg黑曲霉菌液体菌种。
[0190] 4.酵母融合菌混合菌剂100kg的制备
[0191] 取上述制备的酵母融合菌液体菌种55kg、土著巨大芽孢杆菌液体菌种35kg和黑 曲霉菌液体菌种l〇kg，放在不锈钢罐中，经充分混合、搅拌，即得100kg酵母融合菌混合菌 剂，依次制备方法可逐级扩大生产量。
[0192] 酵母融合菌混合菌剂发酵有机废水制备生物液体肥
[0193] 实施例9:在豆腐废水配制的培养液中发酵制备生物液体肥
[0194] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升新鲜的豆腐生产时产生的废水中加豆柏 粉3kg、鱼粉3kg、骨粉lkg、硫酸铵lkg、磷酸2kg，用1%的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅 拌混合，加热使有机、无机物质全部溶解后备用。
[0195]②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂100kg转种在1300立升发酵罐装有1000立 升的液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小时通气搅拌好氧发酵培养，当活菌数浓度为 10-20亿个/mL，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
[0196] 实施例10 :在粉丝废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥：
[0197] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的新鲜粉丝废水，再加豆柏粉3. 5kg、骨 粉1. 5kg、硫酸铵lkg、磷酸1. 5kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使 有机、无机物质全部溶解后备用。
[0198] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升的液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小通气搅拌好氧发酵培养，当活菌 数浓度为10-20亿个/mL时，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
[0199] 实施例11 :在玉米淀粉废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥
[0200] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的新鲜粉丝废水，再加豆柏粉2kg、骨粉 lkg、硫酸铵1. 5kg、磷酸2kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使有机、 无机物质全部溶解后备用。
[0201] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升的发酵培养基中，经28-32°C、24-72小通气搅拌好氧发酵培养，当活菌数浓 度为10-20亿个/mL时，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
[0202] 实施例12 :在马铃薯淀粉废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥：
[0203] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的新鲜粉丝废水，再加豆柏粉2kg、骨粉 lkg、硫酸铵2kg、磷酸2kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使有机、无 机物质全部溶解后备用。
[0204] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小通气搅拌好氧发酵培养，当活菌数 浓度为10-20亿个/mL时，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
[0205] 实施例13 :在啤酒废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥
[0206] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的新鲜啤酒废水，再加豆柏粉2kg、骨粉 lkg、硫酸铵2kg、磷酸2kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使有机、无 机物质全部溶解后备用。
[0207] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小时通气搅拌好氧发酵培养，当活菌 数浓度为10-20亿个/mL时，即可放罐，发酵成功，即为生物液体肥。
[0208] 实施例14:在味精废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥：
[0209] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的新鲜味精废水，再加豆柏粉2kg、骨粉 lkg、硫酸铵2kg、磷酸2kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使有机、无 机物质全部溶解后备用。
[0210] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小时通气搅拌好氧发酵培养，当活菌 数浓度为10-20亿个/mL时，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
[0211] 实施例15:在蔬菜加工废水配制的培养基中发酵制备生物液体肥：
[0212] ①在1300立升的发酵罐中加入1000立升的蔬菜加工废水，再加豆柏粉2kg、骨粉 lkg、硫酸铵2kg、磷酸2kg，用1 %的石灰水调pH至6. 5-7. 0,充分搅拌混合，加热使有机、无 机物质全部溶解后备用。
[0213] ②将上述制备的酵母融合菌混合菌剂按10%的接种量，转种在1300立升发酵罐 装有1000立升液体发酵培养基中，经28-32°C、24-72小时通气搅拌好氧发酵培养，当活菌 数浓度为10-20亿个/mL时，即可放罐，为发酵成功，即为生物液体肥。
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