/L时，鱼就会死亡，因此氨成为限制放养密度的因素之 一。亚硝酸盐是氨转化为硝酸盐过程中的中间产物，在水体缺氧条件下，氨在水体中硝化细 菌的作用下，逐步氧化经亚硝酸盐再转化成硝酸盐，运一过程称为硝化作用。硝化作用一旦 受阻，结果就会引起硝化的中间产物亚硝酸盐再水体内的大量积累。氨含量越高，溶氧水平 越低，抑值越低，水溫越低，则亚硝酸盐的水平越高。亚硝酸盐对鱼类具有一定的毒性，会 导致鱼类的生理功能素乱，严重影响生长而且发病率高。亚硝酸盐主要是通过鱼邮的呼吸 作用，由觸丝进入血液，一般情况下，当水中亚硝酸盐浓度在0.Img/LW下时，水生动物可 W正常生长；但亚硝酸盐浓度达到0.Img/L时，随着浓度的升高，鱼邮红细胞数量和血红蛋 白数量逐渐减少，血液载氧能力逐渐减低，出现组织缺氧。亚硝酸盐对邮、蟹的毒性更大，主 要表现为对肝脏的损害，邮、蟹中毒时觸受损变黑，最后死亡。因此，必须定期监测鱼塘水中 氨氮和亚硝酸盐含量，并加W去除和控制。
[0027] 为了解光合细菌菌剂对鱼塘水氨氮和亚硝酸盐等有机物的降解效果，进行光合细 菌降解鱼塘水的室内实验。
[0028] 1材料与方法 1. 1材料 采集鱼塘排污口污水，光合细菌采用5升塑料桶发酵培养制得(其PSB细菌体浓度为大 于 100 亿/ml)。
[0029] 1. 2 方法 在6个化烧杯中各装IL污水，分别定为A0、AUA2、A3、A4、A5,其中AO为空白对照。 将光合细菌液分别W〇、〇. 5%、1%、1. 5%、2%、2. 5%的比例投到烧杯中，放置于室外。投放第7 天测定未加菌液的污水浓度及加菌液的污水浓度，并作比较。抑值由抑计测定，氨氮、亚硝 酸盐采用奥克丹W-I水质分析仪测定，测定前将光合细菌W3000r/min去除。
[0030] 主要试验设备：化烧杯、抑计（P服-25型抑计)、氨氮测定的仪器和试剂、分光光 度计。结果见表1。
[0031] 表1用光合细菌处理鱼塘水NH/-N和亚硝酸盐的含量变化（mg/L)
2结果与分析 从表1看出，随着光合细菌投放量的增加，鱼塘水中的氨态氮和亚硝酸盐含量呈现下 降趋势，当其投放量达到1. 5%时，氨态氮含量和亚硝酸盐含量分别为0. 03、0. 05,已达到了 渔业水质标准（GB11607-89)，当投放量达到2. 5%时，氨态氮和亚硝酸盐含量下降变化不明 思O
[003? 3小结与讨论 (1)氨态氮和亚硝酸盐是水产养殖业最主要的两种有毒物质，运两种物质在水中溶解 氧低，pH> 7或水溫偏高等情况下容易产生。
[0033] (2)光合细菌对鱼塘水氨态氮、亚硝酸盐有明显的去除作用，其投放量5%时效果 最好。由此推知，用光合细菌处理生活污水和高浓度有机废水，对去除氨态氮和亚硝酸盐也 应有较好的效果。
[0034] (3)施用光合细菌，投放时应选择阳光充足的晴天进行。
[0035] 实施例2本发明光合细菌菌剂对鱼塘水氨氮和亚硝酸盐处理的水面试验 为了解光合细菌对鱼塘水中氨氮和亚硝酸盐等有机物的降解效果，特进行水面试验。
[0036] 1材料与方法 1. 1材料 养殖户湛厚发的鱼塘连年养殖，采用猪粪肥水，水体水质不好，死鱼较多，特选择此鱼 塘为本试验鱼塘，鱼塘位于湖北省武汉市江夏区山坡乡程墳村，北缔30° 3'3. 93"，东经 14° 19' 5. 70"。光合细菌采用5升塑料桶发酵培养制得(其PSB细菌体浓度为大于100亿 /ml)。鱼塘水深2m，水面20亩，按照每亩IL的用量施用光合菌液，同时在投放菌液前取水 样现场检测水质，投放后从第1天到第7天连续取水样，进行现场测定水质，并作比较。pH 值由抑计测定，氨氮、亚硝酸盐采用奥克丹W-I水质分析仪现场测定。
[0037] 主要试验设备：烧杯、抑计（P服-25型抑计)、氨氮测定的仪器和试剂、分光光度 计。结果见表2。
[0038] 表2用光合细菌处理鱼塘水NH/-N和亚硝酸盐的含量变化（mg/L)
2结果与分析 从表2看出，随着投放天数的增加，鱼塘水中的氨态氮和亚硝酸盐含量呈现下降趋 势，投放第6天时，氨态氮含量和亚硝酸盐含量分别为0. 07、0. 07,已达到了渔业水质标准 (GB11607-89)，投放第6天和第7天，鱼塘水的氨氮与亚硝酸盐含量变化不大，趋于稳定。 [00測 3小结与讨论 (1)氨态氮和亚硝酸盐是水产养殖业最主要的两种有毒物质，运两种物质在水中溶解 氧低，pH> 7或水溫偏高等情况下容易产生。
[0040] (2)光合细菌对鱼塘水氨态氮、亚硝酸盐有明显的去除作用，投放第2天即产生了 明显的效果。由此推知，用光合细菌处理生活污水和高浓度有机废水，对去除氨态氮和亚硝 酸盐也应有较好的效果。
[0041] (3)施用光合细菌，投放时应选择阳光充足的晴天进行，保证投放后，能收到良好 的光照，能充分发挥光合细菌的作用。
[0042] 上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，W及部分运用的实施例，对于 本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可W做出若干变形和 改进，运些都属于本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤 a) 、菌种活化 采用硅胶塞封口的试管作为培养容器，加入液体活化培养基，其总体积占容器有效容 积的70-80%，将在冷冻室中低温保存的光合细菌菌种接种于液体活化培养基中静置培养， 接种量1毫升，培养温度30-35°C，培养时间5 -7天，即得到光合细菌一级种子； b) 、种子液制备 在无菌的操作台上，将光合细菌一级种子接种到250毫升液体种子培养基中，接种量 为20-25毫升，抒紧瓶盖后放于自然光下培养，温度30-35°C，培养周期5 -7天，得到光 合细菌二级种子液； c) 、发酵培养 向5升可密封的塑料桶中加入发酵培养基，按照20- 50%比例接入光合细菌二级种子 液，拧紧桶盖后露天放置，在光照下发酵，检测发酵液中菌体数量，待菌体数量达到100亿/ 毫升时即可停止发酵。2. 根据权利要求1所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤 a) 中液体活化培养基的pH值为7.2,含有以下重量百分比的物质：蛋白胨0.6%，柠檬酸钠 0. 6%，酵母浸粉0. 2%，碳酸氢钠0. 2%，氯化钠0. 2%，氯化铵0. 2%，七水硫酸镁0. 2%，磷酸二氢 钾0. 2%和余量的水。3. 根据权利要求1所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤 b) 中液体种子培养基的pH值为7. 2,含有以下重量百分比的物质：蛋白胨0. 6%，柠檬酸钠 0. 6%，酵母浸粉0. 2%，碳酸氢钠0. 2%，氯化钠0. 2%，氯化铵0. 2%，七水硫酸镁0. 2%，磷酸二氢 钾0. 2%和余量的水。4. 根据权利要求1所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤c) 中发酵培养基含有以下重量百分比的物质：醋酸钠〇. 1% - 〇. 2%，酵母膏0. 1%，氯化铵0. 1%， 氯化钠0. 01%，碳酸氢钠0. 3%，七水硫酸镁0. 04%，磷酸氢二钾0. 6%，微量元素母液0. 1%，水 余量。5. 根据权利要求4所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的微量元 素母液含有以下重量百分比的物质：乙二胺四乙酸二钠〇. 25%，硫酸锌1. 0%，硫酸镁0. 2%， 硫酸铜0. 04%，氯化钴0. 02%，硫酸亚铁0. 7%，水余量。6. 根据权利要求1至5任意一项所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所 述的步骤c)中的发酵过程在室外自然光或室内钨丝灯光源下进行，每天摇动培养容器2- 3次。7. 根据权利要求6所述的一种光合细菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤c) 中菌体数量的检测采用双层琼脂检测法。8. -种如权利要求1所述光合细菌菌剂的应用，其特征在于，应用于水产养殖水体施 用以净化水质。9. 根据权利要求8所述光合细菌菌剂的应用，其特征在于，针对水体污染、氨氮及亚硝 酸盐含量过高的养殖水体或受污染的非养殖水体中使用。10. 根据权利要求9所述光合细菌菌剂的应用，其特征在于，使用时按照0. 5-1升/亩 的用量直接撒入水中。
【专利摘要】本发明公开了一种光合细菌菌剂的制备方法，包括a）菌种活化，b）种子液制备和c）发酵培养，还公开了其应用于水产养殖水体施用以净化水质，本光合细菌菌剂在光合作用下，能够利用污水中的有机质作为营养物质迅速生长繁殖，而在连续光照作用下,光合作用消耗CO2的速率远大于其呼吸作用产生CO2的速率,导致CO3-2/？HCO3-值增大,因此pH值持续上升，而较高的pH值有利于降低系统中磷的可溶性和生物有效性，因此对有机物污染的水体中的氨氮及亚硝酸盐均具有良好的降解效果，对污水具有较强的净化效果，增加了水中的含氧量，在水产养殖中具有良好的水质调节作用。
【IPC分类】C02F103/20, C12N1/20, C02F3/34
【公开号】CN105219680
【申请号】CN201510727349
【发明人】满丽萍, 果然, 田龙军, 刘广鑫, 李延锋, 冯卓彦
【申请人】湖北中化东方肥料有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年11月2日