一种灯盏乙素苷元衍生物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及药物化学研究领域，尤其设及一种新型的灯盏乙素巧元衍生物，W及 其制备方法和在制备抗氧化药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 灯盏乙素（scutellarin，又称灯盏花素）是从菊科植物短亭飞蓬圧rigeron breviscapus(Van.t)Hand. -Mazz.]的干燥全草中提取分离得到的黄酬类化合物，是临床用 药灯盏花素的主要成分，其结构式如下：
[0003]
[0004] 灯盏乙素 阳0化]灯盏乙素在临床上主要用于治疗屯、脑血管疾病、风湿性关节炎和中风后遗症。现 代药理研究证明，灯盏乙素具有增加脑血流量、降低脑血管阻力、改善脑循环、缓解微动脉 疫李、提高血脑屏障通透性、括抗屯、肌缺血再灌注损伤、抑制血小板凝集、促进纤溶活性W 及抗血栓形成的作用。但是灯盏花素临床应用并不理想，原因主要有两点：（1)灯盏乙素水 溶性和脂溶性较差；（2)灯盏乙素生物利用度低，体内易于代谢，不利于发挥药效。
[0006] 灯盏乙素的刚性结构，是限制其透膜吸收的主要原因，水解掉葡萄糖醒酸基，分子 的结构变小，刚性降低，有利于被人体吸收。有研究表明，灯盏乙素可能在人体内被水解为 巧元而被吸收，推断口服灯盏乙素在体内真正起效的可能是巧元。灯盏乙素巧元是灯盏乙 素7位脱去糖基的化合物，其结构如下所示：
[0007] 阳00引灯盏乙素巧元
[0009] 由于灯盏乙素巧元比灯盏乙素具有更好的药理作用和生物利用度，因此，对生物 利用度相对较高的灯盏乙素巧元进行结构修饰，提取、开发并合成出具有新型结构的灯盏 乙素巧元衍生物，在药物研究方面将具有重大的意义。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的是要克服现有技术不足，提供一种具有新型结构的灯盏乙素巧元衍 生物。
[0011] 本发明的另一个目的是提供一种本发明所述灯盏乙素巧元衍生物的制备方法。
[0012] 本发明进一步的目的是提供本发明所述灯盏乙素巧元衍生物在制备抗氧化药物 中的应用。
[0013] 为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：
[0014] 本发明提供一种灯盏乙素巧元衍生物，其结构式如下所示：
[0015]
[0016] 本发明提供上述灯盏乙素巧元衍生物的制备方法，具体包括W下步骤：
[0017] (1)取自然惊干后的斑鸠菊全草，用质量分数为10 %~90 %的乙醇浸泡30天，乙 醇体积用量为原料重量的5~20倍；
[001引 似将上一步得到的浸取液过滤，滤液于50~60°C下浓缩至干，得浸膏I;
[0019] 做将浸膏I用乙酸乙醋萃取，再将得到的萃取液进行浓缩，得浸膏II;
[0020] (4)将浸膏II用甲醇溶解，加入硅胶揽拌，得过柱样品；
[OOW 妨将过柱样品经硅胶柱层析，依次用石油酸、丙酬和正丙醇洗脱，收集正丙醇洗 脱液，然后将得到的正丙醇洗脱液进行浓缩，得浓缩液；
[0022] (6)采用DlOl大孔树脂对得到的浓缩液进行吸附，然后用乙醇进行解吸，得到灯 盏乙素巧元衍生物粗品；
[0023] (7)将灯盏乙素巧元衍生物粗品用乙醇重结晶，再过滤和干燥，得到灯盏乙素巧元 衍生物精制品。
[0024] 优选的，W上所述灯盏乙素巧元衍生物的制备方法，所述步骤（1)中的乙醇体积 用量为原料重量的10倍。
[00巧]本发明还提供上述灯盏乙素巧元衍生物在制备抗氧化药物中的应用。
[00%] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0027] 本发明提供的灯盏乙素巧元衍生物的DPPH(1，1-二苯基-2-S硝基苯阱）抗氧化 活性要强于灯盏乙素，有望作为抗氧化药物得到广泛的应用。
【具体实施方式】 阳0測实施例1
[0029] 一种本发明提供的灯盏乙素巧元衍生物，其结构式如下所示：
[0030]
[0031] 本实施例的灯盏乙素巧元衍生物的具体制备过程为：取斑鸠菊全草I千克，自然 惊干，用20升浓度为50%的乙醇浸泡30天；将浸取液过滤，所得滤液在50°C浓缩至干，得 浸膏I;将浸膏I用5升乙酸乙醋萃取，得萃取液，再将萃取液浓缩，得浸膏II;将浸膏II 用3升甲醇溶解，加入100g硅胶揽拌，得过柱样品；将过柱样品经硅胶柱层析，依次用石油 酸、丙酬和正丙醇洗脱，收集正丙醇洗脱液，将所得的正丙醇洗脱液进行浓缩，得浓缩液；采 用DlOl大孔树脂对所得的浓缩液进行吸附，然后用乙醇进行解吸，获得0. 25g灯盏乙素巧 元衍生物粗品；将灯盏乙素巧元衍生物粗品用乙醇重结晶，然后过滤和干燥，得到0. 19g灯 盏乙素巧元衍生物精制品。
[0032] 本实施例制备的灯盏乙素巧元衍生物精制品经Ih-NMR和MS确认，数据如下： 阳03引 1h-NMR(400MHz,DMSO-de) 5 :4. 40-4. 71 (m, 2H,CH)，5. 0 (S, 1H, -0H)， 5. 12 (S, 1H, -OH)，5. 84 (S, 1H, -CH)，6. 58 (d, 1H, -CH)，6. 68 (d, 2H, -CH)，6. 71 (S, 1H, -CH)， 7. 13(d，2H，-CH)，7. 36(d，lH，-CH)。ESI-MS:m/z363[M-田。
[0034] 将获得的精制品用乙醇和正己烧混合溶剂（体积比3:1)重结晶，得到单晶。经元 素分析确认其分子式为：〔1班12〇6尸2。 阳0对实施例2
[0036] 一种本发明提供的灯盏乙素巧元衍生物，其结构式同实施例1的结构式。
[0037] 本实施例的灯盏乙素巧元衍生物的具体制备过程为：取斑鸠菊全草1千克，自然 惊干，用10升浓度为90%的乙醇浸泡30天；将浸取液过滤，所得滤液在60°C浓缩至干，得 浸膏I;将浸膏I用5升乙酸乙醋萃取，得萃取液，再将萃取液浓缩，得浸膏II;将浸膏II 用3升甲醇溶解，加入100g硅胶揽拌，得过柱样品；将过柱样品经硅胶柱层析，依次用石油 酸、丙酬和正丙醇洗脱，收集正丙醇洗脱液，将所得的正丙醇洗脱液进行浓缩，得浓缩液；采 用DlOl大孔树脂对所得的浓缩液进行吸附，然后用乙醇进行解吸，获得0. 28g灯盏乙素巧 元衍生物粗品；将灯盏乙素巧元衍生物粗品用乙醇重结晶，然后过滤和干燥，得到0. 20g灯 盏乙素巧元衍生物精制品。
[0038] 本实施例制备的灯盏乙素巧元衍生物精制品的Ih-NMR和MS数据同实施例1。
[0039] 体外检测抗氧化剂清除自由基的方法中W清除DPPH(1，1-二苯基-2-S硝基苯 阱）自由基最为常用。DPPH溶液在517nm处具有较强吸收，当有供氨能力的抗氧化剂存在 时，与DPPH禪合使DPPH紫色消退或减弱，且吸光度与自由基被清除的程度呈线性关系，通 过加入抗氧化剂前后吸光度的线性变化计算自由基清除率。研究比较灯盏乙素巧元衍生物 对自由基的清除作用，对于抗氧化药物的开发具有重要意义。
[0040] 将实施例1制备得到的灯盏乙素巧元衍生物与DPPH用无水乙醇溶解。分别把 100yL受试物（浓度为300ymol?L1)加到96孔板中，然后加入100yLDPPH溶液（浓度 为45ymol?L1)，振摇均匀，避光反应30分钟，在517皿处测定吸光值。按照W下公式计 算自由基清除率：
[0042] A。:溶剂与DPPH作用后的吸光度；A1:本发明提供的灯盏乙素巧元衍生物与DPPH 作用后的吸光度；As:未加DPPH时的吸光度。具体实验数据如表1所不：
[0043] 表1灯盏乙素巧元衍生物DPPH抗氧化活性数据
[0044]
[0045] 从表I可W看出，本发明提供的灯盏乙素巧元衍生物的DPPH抗氧化活性要强于灯 盏乙素，可W作为抗氧化药物进行后续开发。
【主权项】
1. 一种灯盏乙素苷元衍生物，其特征在于，其结构式如下所示：2. -种制备如权利要求1所述的灯盏乙素苷元衍生物的方法，其特征在于，包括以下 步骤： (1) 取自然晾干后的斑鸠菊全草，用质量分数为10%~90%的乙醇浸泡30天，乙醇体 积用量为原料重量的5~20倍； (2) 将上一步得到的浸取液过滤，滤液于50~60°C下浓缩至干，得浸膏I; (3) 将浸膏I用乙酸乙酯萃取，再将得到的萃取液进行浓缩，得浸膏II; (4) 将浸膏II用甲醇溶解，加入硅胶搅拌，得过柱样品； (5) 将过柱样品经硅胶柱层析，依次用石油醚、丙酮和正丙醇洗脱，收集正丙醇洗脱液， 然后将得到的正丙醇洗脱液进行浓缩，得浓缩液； (6) 采用D101大孔树脂对得到的浓缩液进行吸附，然后用乙醇进行解吸，得到灯盏乙 素苷元衍生物粗品； (7) 将灯盏乙素苷元衍生物粗品用乙醇重结晶，再过滤和干燥，得到灯盏乙素苷元衍生 物精制品。3. 如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤（1)中的乙醇体积用量为原料重量 的10倍。4. 一种如权利要求1所述的灯盏乙素苷元衍生物在制备抗氧化药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种具有新型结构的灯盏乙素苷元衍生物，以及它的制备方法和在制备抗氧化药物中的应用。本发明所述的灯盏乙素苷元衍生物的制备方法为：乙醇浸泡斑鸠菊全草得浸取液、浸取液过滤浓缩得到浸膏I、乙酸乙酯萃取浸膏I后浓缩得到浸膏II、用浸膏II制备得到过柱样品、过柱样品经硅胶柱层析后浓缩得到浓缩液、浓缩液进行吸附和解吸后得到灯盏乙素苷元衍生物粗品、灯盏乙素苷元衍生物粗品经乙醇重结晶并过滤和干燥后得到灯盏乙素苷元衍生物精制品。体外检测抗氧化剂清除自由基的实验结果表明，本发明提供的灯盏乙素苷元衍生物的抗氧化活性要强于灯盏乙素，有望作为抗氧化药物而得到广泛的应用。
【IPC分类】C07D311/40, A61P39/06, A61K31/352, C07D311/30
【公开号】CN105294626
【申请号】CN201510687596
【发明人】郭鑫, 吴义强, 胡云楚
【申请人】中南林业科技大学
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年10月21日