对比例制备提取青葛素的步骤与实施例1~14相同，其区别仅在于在溶剂提取的同 时不添加超声波震荡的方式，仅采用静置提取的方式，于50°C溫度下静置提取60min。 阳OW 效果例 计算上述实施例1~14及对比例1、2的青葛素提取效率，W青葛素精制量/黄花葛质 量*100%为指标计算青葛素的提取效率。所述青葛素精制量采用高效液相色谱法进行提取 产物的检测，具体方法包括： a、保留时间确定 称取干燥至恒重的青葛素对照品20mg，用流动相(体积比为53:47的甲醇与水)溶解并 定容至100mL摇匀，集得0. 5mg/ml紫杉醇对照品溶液，检测条件：流动相（53:47即甲醇与 水的比值)，检测波长254nm，等度洗脱流速I.Oml/min，检测含量在0. 25%~I. 40%之间，获 得青葛素的保留时间如图2所示。由图中可W看出，在7~8分钟时，峰面积最大，运就是 样品的主峰。可W根据此图的出主峰时间来判断要检测样品主峰的位置，并且通过它的面 积大小来判断样品的含量有多少，峰面积值越大，样品中青葛素的含量越多。
[0022] b、标准曲线的制备 准确称取青葛素对照品0. 125g于100mL容量瓶中，用石油酸超声溶解并定容，得青葛 素标准储备液1. 256mg/ml，再梯度稀释至不同的浓度。在色谱条件下，用高效液相色谱进样 器取定量标准溶液进行分析，结果列于下表2。
[0023] 表2石油酸中青葛素的标准曲线测定结果
绘制青葛素浓度C与峰面积A的标准曲线并进行线性回归，回归方程为式：Y=63477421. 7830X-53395. 3418,其线性相关系数R=0. 9999,P< 0.OOOl。青葛素浓度C与 峰面积A的关系如图3所示。
[0024]C、精密度考察 用进样针吸取样品，连续进样5次，分别记下相应的峰面积，相对标准偏差（RSD) =0.55%。说明仪器进样精密度良好。稳定性考察取20微升样品溶液，于0、2、4、6、8h分 别进样，记录其峰面积，计算RSD=O. 11 %，结果表明化内样品溶液稳定。重复性考察取5份 同一批青葛素粗品，每份约25mg，精密称定，分别a项的方法制备样品溶液，按其色谱条件 测定，再按b项的方法计算青葛素的含量。其平均含量为95. 86%，RSD=O. 55%，运也说明 了选用的含量测定方法精密度比较好。 阳O巧]t重复性试验 六个平行测试样品，相同的青葛素含量测定，每次20微升样本数量、内容的测试结果， 保留时间的相对标准偏差为1.25,相对标准偏差为0.402,样品回收率测试带一个已知数 量的样品，2毫升，共五次，分别为0. 5毫升，准确和青葛素对照品解决方案根据a的色谱条 件测定，平均回收率的100. 4/9,RSD为0. 9,结果如表3所示。
[00%] 表3青葛素加样回收试验结果
e、样品含量测定 按上述色谱条件检测青葛素含量，采用外标法进行定量测定，记录峰面积计算样品含 量。本次实验中青葛样品平均含0. 492%青葛素，相对标准偏差为1. 98%(n=5)。5批青葛 素样品中青葛素平均含量为97. 60%，RSD为0. 97% (n=5)。
[0027] 按照上述方法测定并计算上述实施例1-14及对比例1-2的青葛素提取效率，实验 结果见下表4。
[0028] 表4各实施例青葛素提取效率
从上表数据可W看出，本发明采用的正弦态超声波、余弦态超声波和变频超声波交替 处理的震荡方式，空化作用大幅增强，大大提高了青葛素的提取效率；尤其是进一步筛选正 弦态超声波的频率 < 余弦态超声波的频率 < 变频超声波的频率的超声震荡方式、正弦态超 声波的处理时间 < 余弦态超声波的处理时间 < 变频超声波的处理时间W及分别控制正弦 态超声处理的溫度 < 余弦态超声处理的溫度 < 变频超声处理的溫度的提取工艺条件，更使 得青葛素的提取效率提升接近一倍，相对于现有技术而言，取得了预料不到的显著技术效 果。可见，本发明通过精选最适宜青葛素提取的超声震荡方式，最大限度地增大振动振幅， 增大传质表面积；并且减少驻波造成的死角，产生更强烈的崩溃，具有最大效果的协同作 用，最大化的提高了青葛素的提取产率。
[0029] 显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对 于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可W做出其它不同形式的变化或 变动。运里无需也无法对所有的实施方式予W穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
【主权项】
1. 一种利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于：包括如下步骤： (1) 以黄花蒿为原料，粉碎后加入石油醚溶剂混匀，在超声震荡条件下进行提取，得到 提取液；所述超声震荡方式为正弦态超声波、余弦态超声波和变频超声波交替进tx; (2) 取所述提取液蒸馏得到浓缩液，并对反复蒸馏后得到的浸膏进行脱脂处理，随后加 入乙醇进行结晶，得到青高素粗品； (3) 取得到的青蒿素粗品进行多次结晶，即得青蒿素。2. 根据权利要求1所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，步骤（1) 中，所述正弦态超声波的频率为15~30Hz，功率为100mW/cm2;所述余弦态超声波的频率为 20~35Hz，功率为150mW/cm2;所述变频超声波频率为25~40kHz，功率为200mW/cm2。3. 根据权利要求2所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，步骤（1) 中，所述正弦态超声波的频率 < 所述余弦态超声波的频率 < 所述变频超声波的频率。4. 根据权利要求1~3任一所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，所 述步骤（1)中，所述超声震荡处理的时间为40~60min。5. 根据权利要求4所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，所述步骤 (1)中，所述正弦态超声处理时间 < 所述余弦态超声处理时间 < 所述变频超声处理时间。6. 根据权利要求1~3任一所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，所 述步骤（1)中，所述超声震荡处理的温度为45~60°C。7. 根据权利要求6所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，所述步骤 (1)中，所述正弦态超声处理的温度 < 所述余弦态超声处理的温度 < 所述变频超声处理的 温度。8. 根据权利要求1所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，步骤（1) 中，所述黄花蒿与所述石油醚的物料质量比为1:10~20。9. 根据权利要求1所述的利用超声波技术提取青蒿素的方法，其特征在于，步骤（2) 中，所述结晶使用的乙醇的质量浓度为70~90%。
【专利摘要】本发明涉及一种利用超声波技术提取青蒿素的方法，包括如下步骤：（1）以黄花蒿为原料，粉碎后加入石油醚溶剂混匀，在超声震荡条件下进行提取，得到提取液；所述超声震荡方式为正弦态超声波、余弦态超声波和变频超声波交替进行；（2）取所述提取液蒸馏得到浓缩液，并对反复蒸馏后得到的浸膏进行脱脂处理，随后加入乙醇进行结晶，得到青蒿素粗品；（3）取得到的青蒿素粗品进行多次结晶，即得青蒿素。通过采用最适宜青蒿素提取的超声震荡方式，产生更强烈的崩溃，具有最大效果的协同作用，最大化地提高了青蒿素的提取产率。
【IPC分类】C07D493/20
【公开号】CN105294728
【申请号】CN201510675155
【发明人】蔡莉, 陈亚萍
【申请人】江阴职业技术学院
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年10月19日