W1周W上的给药间隔进行给 药。本发明的药物组合物的疼痛缓解作用起效快速并具有长期持续的效果，因而可W比传 统的IA-HA制剂的给药间隔长。本发明的药物组合物在15周W上，更具体地，在15周-30 周的时间段具有持续的效果，因此，给药间隔可设置为15周W上，进一步在15周-30周之 间。为达到至少15周的持续效果，进一步为达到30周的持续效果，可使用本发明的药物组 合物。
[0090] 4、本发明的药物纽合物的巧巧对象等
[0091] 本发明的药物组合物对人类关节疾病具有疼痛抑制作用或疼痛改善效果。本发明 的药物组合物在给药后显示快速的治疗效果，给药1周-3周后开始显示几乎最大的效果， 该效果持续15周W上，进一步持续30周。送种"治疗效果"只要对人类关节疾病症状具有 改善效果就没有特别的限制，包括身体机能改善效果、僵硬改善效果、疼痛抑制效果等，但 优选疼痛抑制效果。
[0092] 本发明的药物组合物在单次给药后，1周-3周后显示送种改善效果，并且具有持 续至少15周、进一步持续30周的超长持续的特征。
[0093] 此外，本发明的药物组合物在不失去所期望的效果、同时又不发生副作用的情况 下，如有必要，可含有配制通常的注射用制剂中使用的溶剂、抑调节剂、等渗剂和稳定剂等 添加剂。例如，作为交联HA衍生物的溶剂，例如注射用水、生理盐水、磯酸盐缓冲生理盐水 等；作为通常的注射剂的制剂配制中的抑调节剂、等渗剂使用的磯酸二氨钢、磯酸氨二钢、 氯化钢等添加剂。
[0094] 此外，本发明的药物组合物在单次给药后快速获得显著的治疗效果。正如下述的 实施例，特别是疼痛抑制效果，本发明的药物组合物在给药3周后达到最好治疗效果的约 90%或W上。本发明的药物组合物所具有的送种速效性和显著性是传统IA-HA制剂没有发 现的，认为本发明中的有效成分具有与传统lA-HA制剂具有不同的作用机制，例如速效性 镇痛作用送样作用的潜力。也就是说，本发明已首次发现交联HA衍生物具有与传统IA-HA 制剂中透明质酸成分的疼痛改善效果的机制相异的潜力。
[0095] 此外，在下述的实施例中，与PBS给药患者相比，本发明的药物组合物给药组中， 最初单次给药后30周、需要再次治疗的疼痛复发患者明显较少，该结果显示，给予本发明 的药物组合物后，显著延迟疼痛复发。
[0096] 作为参考，市售的IA-HA制剂之一的ARTZ(注册商标）为每安無或每注射器中有 2. 5ml的关节内注射液，基本处方为每周连续给药5次，每次1安無或1注射器。因此，在单 一疗程中使用的ARTZ剂量为12.5ml。此外，Synvisc-化e(商标）的处方为单次注射，单次 给药6ml。
[0097] 因此，本发明的药物组合物基于单次给药、低剂量且治疗效果长期送Η个主要优 点，例如，对于治疗慢性关节疾病，使用每3个月到半年给药一次的制剂等也成为可能。当 然，考虑到患者改善效果的持续性和症状等，给药间隔为6个月W上的给药制剂也成为可 能。理所当然的是，仅单次给药即为一个疗程也成为可能。
[0098]下面将详细介绍本发明的实施例，但本发明的技术范围不仅限于此。合成例；交联ΗΑ衍生物的制备。
[0099] 根据W02008/069348号公报中所描述的方法，使用重均分子量为90万-100万的 透明质酸钢和Ar-CH=CH-C00H(Ar表示可具有取代基的1-蔡基）酸4-氨了基盐酸盐为 原料，制备取代度为10% -25%、交联度为10% -30%、浓度为1. 0(w/v) %的交联透明质酸 衍生物溶液。下文中，将该溶液称为"试验物质"。
[0100] 实施例1
[0101] 实验步骤
[0102] 对膝关节骨关节炎患者进行多中必、双盲、平行组间比较检验，验证本发明的交联 HA衍生物单次给药的有效性。另外，作为安慰剂（对照），使用磯酸盐缓冲生理盐水（PBS)。
[0103] 在给予试验物质1周-2周前，按W下的选择标准和排除标准对患者进行筛选。符 合此标准的患者被随机分为本发明的交联HA衍生物给药组和PBS给药组。交联HA衍生物 组为231例，PBS组为127例。
[0104] 将上述试验物质给予本发明的交联HA衍生物给药组的患者，W1. 8ml/关节的剂 量在一个患病膝的关节内单次注射给药。对PBS治疗组的患者，W同样的方式单次注射 PBS。
[0105] 此外，进行给药的医生应在给药前确认给药患者的患病膝，有水肿时将关节积液 吸出。
[0106] 注射后，在第1周、第3周、第6周、第9周及第15周的时间点，分别按照下述的评 价方法评价改善效果。
[0107] 此外，在每个评价日，作为并用药物，分发对己醜氨基酪，每天允许服用高达 4000mg。在试验期间，除了对己醜氨基酪，限于在给予试验物质前至少4周继续服用一定量 的情况下，允许病人服用非酱体抗炎镇痛药、非处方药（0TC)、草药疗法和软骨保护剂。此 夕b试验期间，允许间歇性使用阿片类镇痛药。然而，在每个评价日前的24小时，禁止任何 合并疗法。
[010引选择标准和排除标准
[0109] (1)选择标准
[0110] 满足W下所有条件的患者且未被下文所述的排除标准所排除，则为本试验的被评 价患者。
[0111] a. 40岁和80岁之间的患有膝关节骨关节炎症状的患者。
[0112] b.在站立或行走时，有持续至少4周W上膝疼痛的患者。
[0113] C.X射线所见判断为KellgrenLarence分类1-3级的患者。
[0114] d.根据WesternOntarioandMcMasterUniversitiesOsteoarthritis Index(WOMAC(注册商标）疼痛评价，被评价膝在40mmW上且对侧膝在20mmW下的患者。 此外，W0MAC(注册商标）使用100mm视觉模拟量表（VA巧。
[0115] e.在治疗试验期间，除了允许的合并疗法，同意中止当前实施的治疗法的患者。 [011引 似排除标准
[0117] a.X射线所见判断为KellgrenLarence分类4级的患者。
[0118] b.被评价膝患有除0A外的其他炎症性疾病的患者、患有重度膝关节水肿的患者、 或下肢力线（alignment)严重变化的患者。
[0119] C.接受过膝或髓关节人工关节手术的患者、12个月内做过膝关节手术的患者、3 个月内做过关节镜的患者、6周内在关节内给予过透明质酸制剂的患者。
[0120] d.严重的全身性疾病或评价对象膝患有感染性皮肤病的患者。
[0121] 评价方法
[0122] 使用NicholasBellamy博i开发的W0MAC(TheJournalofMieumatologyl988 ; 15 ; 12,p. 1833-1840)评分标准，对交联HA衍生物的有效性进行评价。此外，WOMAC是一个 注册商标。在下文中，送个注册商标的标识将被省略。
[0123] 本文使用的W0MAC评分标准是对患者进行包括由疼痛、僵硬和身体机能Η部分组 成的全部24个项目（全项目）对患者进行询问并根据患者的回答进行评分的方法。
[0124] 在本试验中，W0MAC疼痛评分作为主要评价，进一步地，W0MAC僵硬评分、W0MAC身 体机能评分W及W0MC全项目评分作为次要评价。
[01巧]此外，W0MAC评分是通过询问如上所述的由疼痛、身体机能、僵硬共计24个问 题的患者申报型的评分方法，该方法作为0Α的评价方法而建立。回答问题的方法分为 VAS(VisualAnalogScale)和李克特量表化化ertscale)两种。VAS是患者在100mm的 直线上标示自己对各个问题感受的程度并根据位置判断程度的方法。该位置表示从量表的 左端开始的长度。另一方面，李克特量表是患者根据5个等级的回答选项表示自己对各个 问题感受程度的方法。本实验中根据VAS对患者的疼痛、身体机能和僵硬程度进行评价。
[0126] 例如，在给药前和给药后的各评分时间点向患者询问关于疼痛的同一问题，患者 通过在量表上标示位置（程度）进行回答。基于给药前患者标示的长度（给药前基准值 度aseline))与给药后各评分时间点患者所标示的长度之间的差值，使改善效果转化为数 值。
[0127]W0MAC评分广泛用于0A治疗效果的评价指标，W0MAC评分还可W确认0A治疗效果 可靠性和可信性灯heJournalof化eumatology2000;27;ll，p. 2635-2641)。
[012引使用意图治疗人群（Intention-to-treatpopulation) (ITT人群）和符合方案人 群（perprotocolpopulation) (PP人群）进行有效性分析。本发明的ITT人群的交联HA衍生物组231例，PBS