一种新型近红外的高量子产率染料及其制备与应用的制作方法

本发明涉及近红外的核仁rna染料，提供了一种新型近红外的高量子产率的染料、制备及应用。

背景技术：

由于其高时空分辨率以及快速和非侵入式操作，小分子荧光染料基于的荧光成像已经成为强大的手段对生命系统中生物现象(比如生物分子检测，标记，癌症诊断和治疗等)的可视化观察。rna是生命系统中特别重要的生物分子，并且细胞核中的rna位于核仁中，它们在基因编码，转录和表达起着至关重要的作用。生物化学过程中的许多生理过程包括细胞增殖和分化等都与rna的功能紧密相关。因此，对rna实时的成像在生化研究中具有重要的意义。许多荧光成像技术(rna微注射，荧光原位杂交(fish)或是绿色荧光蛋白(gfp)及其衍生物黄色荧光蛋白(yfp)标记)已经利用来实现活细胞内rna可视化，但是这些技术具有差的细胞通透性并且可能影响细胞的正常功能。因此，开发出具有好的光物理性质、高的细胞穿透性和易于操作的小分子染料对rna选择性成像具有重要意义。

目前为止，invitrogen公司的具有绿色荧光发射的rnaselect是唯一用于细胞成像的商用rna探针，但是其应用不是很广泛，染色选择性较差，荧光波长也比较短，该探针的分子结构及合成方法至今尚未公开。近年来研究人员通过多种努力开发了很多rna标记的染料。大多数情况下，在活细胞中获得一张满意的rna成像需要较长的孵育时间(几十分钟甚至几个小时)，只有几种具有正电荷的染料能够顺利的进入细胞并对rna快速成像，并且所报道的染料孵育浓度较高且量子产量也低，而这些高浓度染料可能会影响活细胞的正常生理活动并且与细胞中的背景荧光会产生干扰。重要的是，深红特别是近红外发射的rna染料比较急需，这是由于在此发射范围特别是nir生物学窗口(650-900nm)具有最低限度的光损伤、最低限度的背景荧光干扰、降低的光散射和增强的组织穿透深度。因此，开发出新型的具有快速定位、低的孵育浓度、高量子产量、高的光稳定性和近红外发射的rna染料具有重要的意义。

相对常用染料(香豆素、萘二酰亚胺、bodipy、菁染料等)中，基于氧杂蒽的荧光染料由于其独特的性质而备受关注：波长长、光稳定性好、量子产量高、摩尔消光系数大、合成简单、易于修饰等，广泛地应用于生物医学领域。然而由于其发射波长短、ph敏感性强等缺点，限制了其在活体领域的应用。近年报道的新型长波长氧杂蒽类荧光染料，主要是通过扩展电子共扼体系、引入吸电子基团等手段来使其荧光红移。然而使其得到的结构具有更长的发射的同时还具有高的荧光量子产量是非常困难的。

技术实现要素：

本发明要解决的第一个技术问题在于提供一种新型近红外的高量子产率染料。此染料具有良好的生物相容性、低毒性、长的荧光发射波长、优异的化学稳定性以及很高的荧光量子产率。

本发明要解决的第二个技术问题在于提供新型近红外的高量子产率染料的制备方法。

本发明要解决的第三个技术问题在于提供一种新型近红外的高量子产率染料作为近红外的核仁rna染料的应用。

为解决第一个技术问题，本发明一种新型近红外的高量子产率染料，其特征在于，具有如下结构式i：

r1、r2、r6、r7分别独立的为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；r3、r4、r5、r8、r9、r10分别独立的为氢、低级烃基或卤素；r11为氢、甲基、氰基、或三氟甲基；为阴离子；

所述r1、r2、r6、r7中低级烃基为直链、支链或环状；所述低级烃基包含1-6个碳原子；

所述醚基中碳原子数为3～6，氧原子数≤2；

所述取代烷基为直链或支链；所述取代烷基为ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基、ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基、ω-卤素取代1-6个碳原子烷基、ω-羟基取代1-6个碳原子烷基、ω-氨基取代1-6个碳原子烷基或ω-巯基取代1-6个碳原子烷基；其中，所述ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基中甲酸酯基为2-5个碳原子烷基甲酸酯基：所述的ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基中甲酰胺基为2-5个碳原子烃基甲酰胺基；

所述酰基为2-6个碳原子烷基酰基、叔丁氧羰基、苯甲酰基、1-6个碳原子取代苯甲酰基或卤素取代苯甲酰基；

所述卤素为氟、氯、溴或碘；

所述r3、r4、r5、r8、r9、r10中的低级烃基为甲基或乙基；

所述为平衡电荷的任意有机或无机阴离子。

进一步地，所述结构式i中，r1与r3、r1与r10、r2与r3、r2与r10、r6与r5、r6与r8、r7与r5、r7与r8、r1与r2或r6与r7可以独立形成如下ia-in结构：

其中r为氢、甲基或乙基；y为c、o或nr。

更进一步地，所述的r1、r2、r6、r7中的低级烃基为甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、烯丙基、丁基、异丁基或叔丁基；

所述醚基为ch2ch2och3、ch2ch2och2ch3、ch2ch2och2ch3oh、ch2ch2och2ch3och3或ch2ch2och2ch3och2ch3；

所述ω-2-5个碳原子烷基甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mcoo(ch2)nch3或(ch2)mcooc(ch3)3，其中m为1-4，n为0-3；

所述ω-2-5个碳原子烃基甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mconh(ch2)nch3或(ch2)mcon[(ch2)nch3]2，其中m为1-4，n为0-3；

所述ω-卤素取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mcl、(ch2)mbr或(ch2)mi，其中m为1-6；

所述ω-羟基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)moh，其中m为1-6；

所述ω-氨基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mnh2，其中m为1-6；

所述ω-巯基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)msh，其中m为1-6；

所述2-6个碳原子烷基酰基为乙酰基、丙酰基、丁酰基或叔丁酰基；

所述1-6个碳原子取代苯甲酰基为甲基取代苯甲酰基、乙基取代苯甲酰基、丙基取代苯甲酰基、丁基取代苯甲酰基或叔丁基取代苯甲酰基；

所述卤素取代苯甲酰基为氯取代苯甲酰基、溴取代苯甲酰基或碘取代苯甲酰基。

为解决第二个技术问题，本发明提供新型近红外的高量子产率染料的制备方法，当结 构式i中r11为氢或三氟甲基时，包括如下制备步骤：

将1毫摩尔化合物ii与1毫摩尔化合物iii加入到5-15毫升浓硫酸中，在加热条件下反应1-4小时，冷却后将反应液慢慢滴加20-100倍体积的冰水中，再加入0.01-1倍体积的质量百分浓度为70％的高氯酸，充分搅拌，析出固体，过滤、真空干燥，柱层析分离得产物。

其中，所述加热的温度为60-100℃；

所述化合物ii的结构式如下：

所述化合物iii的结构式如下：

其中，r1、r2、r6、r7分别独立的为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；r3、r4、r5、r8、r9、r10分别独立的为氢、低级烃基或卤素；r0为氢或三氟甲基。

或，当结构式i中r11为甲基时，包括如下制备步骤：

1)将1毫摩尔化合物ii与1毫摩尔化合物iii加入到5-15毫升浓硫酸中，在加热条件下反应1-4小时，冷却后将反应液慢慢滴加20-100倍体积的冰水中，再加入0.01-1倍体积的质量百分浓度为70％的高氯酸，充分搅拌，析出固体，过滤、真空干燥，柱层析分离得产物1-a；

2)将1毫摩尔得到的i-a溶于5毫升无水thf中，在n2保护条件下逐滴加入3-6毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液,常温搅拌24h后,再加入2-5毫升含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1-12h，将反应液旋干后柱层析分离得到产物。

其中，所述加热的温度为60-100℃；

所述化合物ii的结构式如下：

所述化合物iii的结构式如下：

其中，r1、r2、r6、r7分别独立的为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；r3、r4、r5、r8、r9、r10分别独立的为氢、低级烃基或卤素；r0为氢。

或，当结构式i中r11为氰基时，包括如下制备步骤：

①将1毫摩尔化合物ii与1毫摩尔化合物iii加入到5-15毫升浓硫酸中，在加热条件下反应1-4小时，冷却后将反应液慢慢滴加20-100倍体积的冰水中，再加入0.01-1倍体积的质量百分浓度为70％的高氯酸，充分搅拌，析出固体，过滤、真空干燥，柱层析分离得产物1-a；

②将1毫摩尔得到的i-a溶于5-20毫升无水dmf中，再加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2-5毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，将反应液旋干后柱层析分离得到产物。

其中，所述加热的温度为60-100℃；

所述化合物ii的结构式如下：

所述化合物iii的结构式如下：

其中，r1、r2、r6、r7分别独立的为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；r3、r4、r5、r8、r9、r10分别独立的为氢、低级烃基或卤素；r0为氢。

进一步地，上述三种制备方法中，所述r1、r2、r6、r7中低级烃基为直链、支链或环状；所述低级烃基包含1-6个碳原子；

所述醚基中碳原子数为3-6，氧原子数≤2；

所述取代烷基为直链或支链；所述取代烷基为ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基、ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基、ω-卤素取代1-6个碳原子烷基、ω-羟基取代1-6个碳原子烷基、ω-氨基取代1-6个碳原子烷基或ω-巯基取代1-6个碳原子烷基；其中所述ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基中甲酸酯基为2-5个碳原子烷基甲酸酯基；所述的ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基中甲酰胺基为2-5个碳原子烃基甲酰胺基；

所述酰基为2-6个碳原子烷基酰基、叔丁氧羰基、苯甲酰基、1-6个碳原子取代苯甲酰 基或卤素取代苯甲酰基；

所述卤素为氟、氯、溴或碘；

所述r3、r4、r5、r8、r9、r10中的低级烃基为甲基或乙基。

进一步地，所述化合物ii和化合物iii可以独立形成如下iia-iig和iiia-iiig结构：

其中r为氢、甲基或乙基；y为c、o或nr。

优选地，所述r1、r2、r6、r7中的低级烃基为甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、烯丙基、丁基、异丁基或叔丁基；

优选地，所述醚基为ch2ch2och3、ch2ch2och2ch3、ch2ch2och2ch3oh、ch2ch2och2ch3och3或ch2ch2och2ch3och2ch3；

优选地，所述ω-2-5个碳原子烷基甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mcoo(ch2)nch3或(ch2)mcooc(ch3)3，其中m为1-4，n为0-3；

优选地，所述ω-2-5个碳原子烃基甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mconh(ch2)nch3或(ch2)mcon[(ch2)nch3]2，其中m为1-4，n为0-3；

优选地，所述ω-卤素取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mcl、(ch2)mbr或(ch2)mi，其中m为1-6；

优选地，所述ω-羟基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)moh，其中m为1-6；

优选地，所述ω-氨基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)mnh2，其中m为1-6；

优选地，所述ω-巯基取代1-6个碳原子烷基为(ch2)msh，其中m为1-6；

优选地，所述2-6个碳原子烷基酰基为乙酰基、丙酰基、丁酰基或叔丁酰基；

优选地，所述1-6个碳原子取代苯甲酰基为甲基取代苯甲酰基、乙基取代苯甲酰基、丙基取代苯甲酰基、丁基取代苯甲酰基或叔丁基取代苯甲酰基；

优选地，所述卤素取代苯甲酰基为氯取代苯甲酰基、溴取代苯甲酰基或碘取代苯甲酰基。

为解决第三个技术问题，本发明保护新型近红外的高量子产率染料作为近红外的核仁rna染料的应用。

进一步地，本发明保护新型近红外的高量子产率染料作为近红外的核仁rna染料，应用于核仁rna的荧光标记。

一些新的抗癌药物，如顺铂、放线菌素d、α-鹅膏蕈碱等的作用位点是rna聚合酶， 从而诱导细胞的死亡，而rna聚合酶中，rna聚合酶i和rna聚合酶iii位于细胞质中，rna聚合酶ii位于细胞核中，因此本发明中的染料通过对核仁rna进行荧光标记，可以用来筛选不同作用位点的抗癌药物以及对抗癌药物药效的评估。

本发明基于原料易得的3,4-二氢-1-萘酮衍生物，通过与其对应的水杨醛衍生物在浓硫酸的缩合条件下加热，得到了一系列不对称、非直线型共轭结构的新型氧杂蒽衍生的化合物，此化合物具有较长的荧光发射(近红外荧光)，特别是结构中引入的亚甲基结构使其具有较高的荧光量子产率。此外其良好的生物相容性和低毒性，可以对生物体系的大分子(核仁rna)进行荧光标记，对研究其在生理活性中的作用奠定了重要的基础。

本发明的有益效果如下：

本发明的具有结构式i的新型近红外的高量子产率染料具有不对称、非直线型的共轭结构，并且具有长的荧光发射(近红外发射)和较高的荧光量子产率，同时也具有良好的生物相容性和低毒性，可以对生物体系尤其是细胞中的重要生物大分子核仁rna荧光标记，降低了染料孵育浓度，避免了高浓度染料对细胞正常生理功能的干扰，同时避免了背景荧光的干扰从而对生物大分子准确的定位，对于研究核仁rna相关的生理学过程有着重要的作用。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。

图1示出本发明实例3中荧光染料i-6将a549细胞染色后的图。

图2示出本发明实例7中荧光染料i-15将a549细胞染色后的图。

图3示出本发明实例15中荧光染料i-29将a549细胞染色后的图。

图4示出本发明实例16中荧光染料i-30将a549细胞染色后的图。

图5示出本发明实例27中荧光染料i-42将a549细胞染色后的图。

图6示出本发明实例28中荧光染料i-43将a549细胞染色后的图。

图7示出本发明实例37中荧光染料i-54将a549细胞染色后的图。

图8示出本发明实例37中荧光染料i-54将hela细胞染色后的图。

图9示出本发明实例40中荧光染料i-78将a549细胞染色后的图。

图10示出本发明实例40中荧光染料i-78将hela细胞染色后的图。

图11示出本发明实例42中荧光染料i-95将hela细胞染色后的图。

图12示出本发明实例54中荧光染料i-191将hela细胞染色后的图。

图13示出本发明实例62中荧光染料i-255将hela细胞染色后的图。

图14示出本发明实例77中荧光染料i-393将hela细胞染色后的图。

图15示出本发明实例37的荧光染料i-54和实例40中的荧光染料i-78分别和i-78加dna酶和rna酶消化后并与市售dna、rna染料对比图。

图16示出本发明实例37的荧光染料i-54和实例40中的荧光染料i-78分别与市售rna染料sytornaselect的细胞染色效果对比图。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例和附图对本发明做进一步的说明。附 图中相似的部件以相同的附图标记进行表示。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。

实施例1：

将0.193g(0.001mol)的化合物ii-1和0.161g(0.001mol)的化合物iii-1分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.343g化合物i-1，产率82％。esims：理论计算m/z:319.18,实际测试m/z:319.20。λ^abs.max/nm＝615nm,λ^emmax/nm＝638nm,фf＝0.80。

将0.418g(0.001mol)的化合物i-1、0.202g(0.001mol)的二碳酸二叔丁酯和0.101g(0.001mol)的三乙胺分别加入到10毫升的无水二氯甲烷中，常温条件下搅拌24h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析纯化分离得到0.440g化合物i-2，产率85％。esims：理论计算m/z:419.23,实际测试m/z:419.25。λ^abs.max/nm＝620nm,λ^emmax/nm＝645nm,фf＝0.82。

将0.518g(0.001mmol)化合物i-2溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.223g化合物i-3,产率42％。esims：理论计算m/z:433.25,实际测试m/z:433.20。λ^abs.max/nm＝622nm,λ^emmax/nm＝648nm,фf＝0.85。

实施例2

化合物iii-11根据文献(org.lett.,2011,13,6488-6491)由商用化合物iii-1与碘乙烷制备，产率50％。

将0.217g(0.001mol)的化合物ii-2和0.189g(0.001mol)的化合物iii-2分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.399g化合物i-4，产率85％。esims：理论计算m/z:371.21,实际测试m/z:371.24。λ^abs.max/nm＝635nm,λ^emmax/nm＝658nm,фf＝0.73。

将0.470g(0.001mmol)化合物i-4溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.198g 化合物i-5,产率41％。esims：理论计算m/z:385.23,实际测试m/z:383.27。λ^abs.max/nm＝636nm,λ^emmax/nm＝660nm,фf＝0.75。

实施例3

化合物ii-3根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由7-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉制备，产率76％。化合物iii-3根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与碘甲烷制备，产率42％。

将0.191g(0.001mol)的化合物ii-3和0.189g(0.001mol)的化合物iii-3分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.391g化合物i-6，产率88％。esims：理论计算m/z:345.20,实际测试m/z:345.26。λ^abs.max/nm＝633nm,λ^emmax/nm＝656nm,фf＝0.78。

将0.444g(0.001mmol)化合物i-6溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.202g化合物i-7,产率44％。esims：理论计算m/z:359.21,实际测试m/z:359.17。λ^abs.max/nm＝634nm,λ^emmax/nm＝658nm,фf＝0.80。

实施例4

化合物ii-4根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由7-羟基-1-乙基-2,2,4-三甲基-1,2-二氢喹啉制备，产率71％。化合物iii-4根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与1-碘乙烷制备，产率45％。

将0.231g(0.001mol)的化合物ii-4和0.217g(0.001mol)的化合物iii-4分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.446g化合物i-8，产率87％。esims：理论计算m/z:413.26,实际测试m/z:413.32。λ^abs.max/nm＝648nm,λ^emmax/nm＝674nm,фf＝0.76。

将0.512g(0.001mmol)化合物i-8溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.226g 化合物i-9,产率43％。esims：理论计算m/z:359.21,实际测试m/z:359.17。λ^abs.max/nm＝650nm,λ^emmax/nm＝678nm,фf＝0.73。

实施例5

化合物ii-5根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由3-n，n-二乙氨基苯酚制备，产率75％。化合物iii-5根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷制备，产率30％。

将0.165g(0.001mol)的化合物ii-5和0.365g(0.001mol)的化合物iii-5分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.440g化合物i-10，产率74％。esims：理论计算m/z:495.29,实际测试m/z:495.23。λ^abs.max/nm＝622nm,λ^emmax/nm＝648nm,фf＝0.80。

将0.594g(0.001mmol)化合物i-10溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.255g化合物i-11,产率42％。esims：理论计算m/z:509.30,实际测试m/z:509.27。λ^abs.max/nm＝623nm,λ^emmax/nm＝650nm,фf＝0.83。

实施例6

化合物ii-6根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由7-羟基-1-(4-正丁酸)-1,2,3,4-四氢喹啉制备，产率62％。化合物iii-6根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1分别与1-氯-3-溴丙烷、碘甲烷制备，产率28％。

将0.291g(0.001mol)的化合物ii-6和0.215g(0.001mol)的化合物iii-6分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.393g化合物i-12，产率69％。esims：理论计算m/z:471.26,实际测试m/z:471.21。λ^abs.max/nm＝632nm,λ^emmax/nm＝658nm,фf＝0.74。

将0.570g(0.001mmol)化合物i-12溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔 ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.222g化合物i-13,产率38％。esims：理论计算m/z:485.28,实际测试m/z:485.32。λ^abs.max/nm＝633nm,λ^emmax/nm＝662nm,фf＝0.76。

实施例7

化合物ii-7根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由3-(1-哌啶基)苯酚制备，产率83％。化合物iii-7根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与1-氯-3-溴丙烷制备，产率20％。

将0.205g(0.001mol)的化合物ii-7和0.241g(0.001mol)的化合物iii-7分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.454g化合物i-14，产率89％。esims：理论计算m/z:411.24,实际测试m/z:411.20。λ^abs.max/nm＝630nm,λ^emmax/nm＝656nm,фf＝0.74。

将0.510g(0.001mmol)化合物i-14溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.220g化合物i-15,产率42％。esims：理论计算m/z:425.26,实际测试m/z:425.22。λ^abs.max/nm＝630nm,λ^emmax/nm＝660nm,фf＝0.75。

实施例8

化合物ii-8根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由3-(4-吗啉基)苯酚制备，产率83％。化合物iii-8根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与1,5-二溴戊烷制备，产率14％。

将0.207g(0.001mol)的化合物ii-8和0.229g(0.001mol)的化合物iii-8分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.400g化合物i-16，产率80％。esims：理论计算m/z:401.22,实际测试m/z:401.20。λ^abs.max/nm＝624nm,λ^emmax/nm＝652nm,фf＝0.83。

将0.500g(0.001mmol)化合物i-16溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔 ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.200g化合物i-17,产率39％。esims：理论计算m/z:415.24,实际测试m/z:415.27。λ^abs.max/nm＝621nm,λ^emmax/nm＝654nm,фf＝0.84。

实施例9

化合物ii-9根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由3-(1-哌嗪)苯酚制备，产率68％。化合物iii-9根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷制备，产率11％。

将0.206g(0.001mol)的化合物ii-9和0.231g(0.001mol)的化合物iii-9分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.381g化合物i-18，产率76％。esims：理论计算m/z:402.22,实际测试m/z:402.25。λ^abs.max/nm＝625nm,λ^emmax/nm＝653nm,фf＝0.85。

将0.501g(0.001mmol)化合物i-18溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.191g化合物i-19,产率37％。esims：理论计算m/z:416.23,实际测试m/z:416.19。λ^abs.max/nm＝624nm,λ^emmax/nm＝655nm,фf＝0.87。

实施例10

化合物ii-10根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由间氨基苯酚制备，产率48％。

将0.137g(0.001mol)的化合物ii-10和0.189g(0.001mol)的化合物iii-3分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.304g化合物i-20，产率78％。esims：理论计算m/z:291.15,实际测试m/z:291.20。λ^abs.max/nm＝617nm,λ^emmax/nm＝636nm,фf＝0.82。

将0.390g(0.001mol)的化合物i-20、0.202g(0.001mol)的二碳酸二叔丁酯和0.101g(0.001mol)的三乙胺分别加入到10毫升的无水二氯甲烷中，常温条件下搅拌24h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析纯化分离得到0.392g化合物i-21，产率80％。esims：理论计算m/z:391.20,实际测试m/z:391.25。λ^abs.max/nm＝620nm,λ^emmax/nm＝644nm,фf＝0.85。

将0.490g(0.001mmol)化合物i-21溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.186g化合物i-22,产率37％。esims：理论计算m/z:405.22,实际测试m/z:405.24。λ^abs.max/nm＝620nm,λ^emmax/nm＝646nm,фf＝0.87。

实施例11

化合物ii-10根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由3-乙氨基-4-甲基苯酚制备，产率56％。

将0.179g(0.001mol)的化合物ii-11和0.217g(0.001mol)的化合物iii-4分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.359g化合物i-23，产率78％。esims：理论计算m/z:361.23,实际测试m/z:361.18。λ^abs.max/nm＝623nm,λ^emmax/nm＝648nm,фf＝0.87。

将0.460g(0.001mmol)化合物i-23溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.166g化合物i-24,产率35％。esims：理论计算m/z:375.24,实际测试m/z:375.29。λ^abs.max/nm＝621nm,λ^emmax/nm＝650nm,фf＝0.89。

实施例12

化合物ii-12根据文献(j.am.chem.soc.,2007,129,9986-9998)由4-氯-3-二乙胺基苯酚制备，产率56％；化合物iii-10根据文献(org.lett.,2011,13,6488–6491)由商用化合物iii-1与双(2-溴乙基)胺制备，产率8％。

将0.227g(0.001mol)的化合物ii-11和0.230g(0.001mol)的化合物iii-4分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应2h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.375g化合物i-25，产率72％。esims：理论计算m/z:422.20,实际测试m/z:422.23。λ^abs.max/nm＝624nm,λ^emmax/nm＝652nm,фf＝0.83。

将0.521g(0.001mmol)化合物i-25溶于5毫升无水thf，氮气保护下逐滴加入3毫升中含有1毫摩尔ch3mgi的thf溶液，常温反应24小时，再加入2毫升中含有1毫摩 尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.176g化合物i-26,产率33％。esims：理论计算m/z:436.22,实际测试m/z:436.19。λ^abs.max/nm＝622nm,λ^emmax/nm＝655nm,фf＝0.85。

实施例13

将0.518g(0.001mmol)化合物i-2溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.196g化合物i-27,产率36％。esims：理论计算m/z:444.23,实际测试m/z:444.21。λ^abs.max/nm＝690nm,λ^emmax/nm＝720nm,фf＝0.35。

实施例14

将0.470g(0.001mmol)化合物i-4溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.198g化合物i-28,产率40％。esims：理论计算m/z:396.21,实际测试m/z:396.23。λ^abs.max/nm＝698nm,λ^emmax/nm＝732nm,фf＝0.25。

实施例15

将0.444g(0.001mmol)化合物i-6溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.197g化合物i-29,产率42％。esims：理论计算m/z:370.19,实际测试m/z:370.17。λ^abs.max/nm＝705nm,λ^emmax/nm＝730nm,фf＝0.30。

实施例16

将0.512g(0.001mmol)化合物i-8溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn， 常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.236g化合物i-30,产率44％。esims：理论计算m/z:438.25,实际测试m/z:438.29。λ^abs.max/nm＝715nm,λ^emmax/nm＝750nm,фf＝0.20。

实施例17

将0.594g(0.001mmol)化合物i-10溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.254g化合物i-31,产率41％。esims：理论计算m/z:520.28,实际测试m/z:520.30。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝612nm,фf＝0.33。

实施例18

将0.570g(0.001mmol)化合物i-12溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.226g化合物i-32,产率38％。esims：理论计算m/z:496.26,实际测试m/z:496.30。λ^abs.max/nm＝706nm,λ^emmax/nm＝734nm,фf＝0.26。

实施例19

将0.510g(0.001mmol)化合物i-14溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.235g化合物i-33,产率44％。esims：理论计算m/z:436.24,实际测试m/z:436.22。λ^abs.max/nm＝705nm,λ^emmax/nm＝735nm,фf＝0.25。

实施例20

将0.500g(0.001mmol)化合物i-16溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.221g化合物i-34,产率42％。esims：理论计算m/z:426.22,实际测试m/z:426.27。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝725nm,фf＝0.34。

实施例21

将0.501g(0.001mmol)化合物i-18溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.200g化合物i-35,产率38％。esims：理论计算m/z:427.21,实际测试m/z:427.19。λ^abs.max/nm＝696nm,λ^emmax/nm＝725nm,фf＝0.37。

实施例22

将0.490g(0.001mmol)化合物i-21溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.185g化合物i-36,产率35％。esims：理论计算m/z:430.21,实际测试m/z:430.24。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝720nm,фf＝0.37。

实施例23

将0.460g(0.001mmol)化合物i-23溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.175g化合物i-37,产率36％。esims：理论计算m/z:386.22,实际测试m/z:386.21。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝720nm,фf＝0.39。

实施例24

将0.521g(0.001mmol)化合物i-25溶于5毫升无水dmf，然后加入1毫摩尔的nacn，常温搅拌24h后，再加入2毫升中含有1毫摩尔ddq的thf溶液，继续搅拌1h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析分离得到0.191g化合物i-38,产率35％。esims：理论计算m/z:447.19,实际测试m/z:447.17。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝726nm,фf＝0.35。

实施例25

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由间二甲基氨基苯酚与三氟乙酸酐制备，产率45％。

将0.261g(0.001mol)的化合物ii-13和0.161g(0.001mol)的化合物iii-1分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.087g化合物i-39，产率18％。esims：理论计算m/z:387.17,实际测试m/z:387.16。λ^abs.max/nm＝674nm,λ^emmax/nm＝705nm,фf＝0.48。

将0.486g(0.001mol)的化合物i-39、0.202g(0.001mol)的二碳酸二叔丁酯和0.101g(0.001mol)的三乙胺分别加入到10毫升的无水二氯甲烷中，常温条件下搅拌24h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析纯化分离得到0.516g化合物i-40，产率88％。esims：理论计算m/z:487.22,实际测试m/z:487.25。λ^abs.max/nm＝680nm,λ^emmax/nm＝710nm,фf＝0.45。

实施例26

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由8-羟基久洛尼定与三氟乙酸酐制备，产率52％。

将0.285g(0.001mol)的化合物ii-14和0.189g(0.001mol)的化合物iii-2分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.113g化合物i-41， 产率21％。esims：理论计算m/z:439.20,实际测试m/z:439.18。λ^abs.max/nm＝686nm,λ^emmax/nm＝720nm,фf＝0.35。

实施例27

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由7-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉与三氟乙酸酐制备，产率51％。

将0.259g(0.001mol)的化合物ii-15和0.189g(0.001mol)的化合物iii-3分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.128g化合物i-42，产率25％。esims：理论计算m/z:413.18,实际测试m/z:413.19。λ^abs.max/nm＝695nm,λ^emmax/nm＝720nm,фf＝0.38。

实施例28

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由7-羟基-1-乙基-2,2,4-三甲基-1,2-二氢喹啉与三氟乙酸酐制备，产率49％。

将0.299g(0.001mol)的化合物ii-16和0.217g(0.001mol)的化合物iii-4分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.133g化合物i-43，产率23％。esims：理论计算m/z:481.25,实际测试m/z:481.27。λ^abs.max/nm＝705nm,λ^emmax/nm＝738nm,фf＝0.30。

实施例29

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由间二甲基氨基苯酚与三氟乙酸酐制备，产率44％。

将0.233g(0.001mol)的化合物ii-17和0.365g(0.001mol)的化合物iii-5分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.086g化合物i-44，产率13％。esims：理论计算m/z:563.27,实际测试m/z:563.29。λ^abs.max/nm＝686nm,λ^emmax/nm＝602nm,фf＝0.42。

实施例30

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由7-羟基-1-(4-正丁酸乙酯)-1,2,3,4-四氢喹啉与三氟乙酸酐制备，产率41％。

将0.359g(0.001mol)的化合物ii-18和0.215g(0.001mol)的化合物iii-6分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.064g化合物i-45，产率10％。esims：理论计算m/z:539.25,实际测试m/z:539.21。λ^abs.max/nm＝694nm,λ^emmax/nm＝724nm,фf＝0.35。

实施例31

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由3-(1-哌啶基)苯酚与三氟乙酸酐制备，产率47％。

将0.273g(0.001mol)的化合物ii-19和0.241g(0.001mol)的化合物iii-7分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.104g化合物i-46，产率18％。esims：理论计算m/z:479.23,实际测试m/z:479.21。λ^abs.max/nm＝695nm,λ^emmax/nm＝724nm,фf＝0.35。

实施例32

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由3-(4-吗啉基)苯酚与三氟乙酸酐制备，产率46％。

将0.275g(0.001mol)的化合物ii-20和0.229g(0.001mol)的化合物iii-8分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.096g化合物i-47，产率17％。esims：理论计算m/z:469.21,实际测试m/z:469.27。λ^abs.max/nm＝682nm,λ^emmax/nm＝715nm,фf＝0.48。

实施例33

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由3-(1-哌嗪)苯酚与三氟乙酸酐制备，产率35％。

将0.274g(0.001mol)的化合物ii-21和0.231g(0.001mol)的化合物iii-9分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.085g化合物i-48，产率15％。esims：理论计算m/z:470.20,实际测试m/z:470.18。λ^abs.max/nm＝685nm,λ^emmax/nm＝715nm,фf＝0.45。

实施例34

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由间氨基苯酚与三氟乙酸酐制备，产率33％。

将0.205g(0.001mol)的化合物ii-22和0.189g(0.001mol)的化合物iii-3分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.055g化合物i-49，产率12％。esims：理论计算m/z:359.14,实际测试m/z:359.18。λ^abs.max/nm＝680nm,λ^emmax/nm＝708nm,фf＝0.50。

将0.458g(0.001mol)的化合物i-49、0.202g(0.001mol)的二碳酸二叔丁酯和0.101g(0.001mol)的三乙胺分别加入到10毫升的无水二氯甲烷中，常温条件下搅拌24h，在真空条件下除去溶剂，干燥，柱层析纯化分离得到0.463g化合物i-50，产率83％。esims：理论计算m/z:459.19,实际测试m/z:459.25。λ^abs.max/nm＝684nm,λ^emmax/nm＝710nm,фf＝0.47。

实施例35

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由间乙基氨基苯酚与三氟乙酸酐制备，产率38％。

将0.247g(0.001mol)的化合物ii-23和0.217g(0.001mol)的化合物iii-4分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.074g化合物i-51，产率14％。esims：理论计算m/z:429.21,实际测试m/z:429.27。λ^abs.max/nm＝682nm,λ^emmax/nm＝715nm,фf＝0.48。

实施例36

化合物ii-4根据文献(chem.eur.j.,2013,19,16556-16565)由4-氯-3-二乙胺基苯酚与三氟乙酸酐制备，产率46％。

将0.295g(0.001mol)的化合物ii-24和0.230g(0.001mol)的化合物iii-10分别加入到5毫升的浓硫酸中，然后在100℃条件下加热搅拌，反应4h。冷却后，将反应液缓慢倒入到200毫升冰水中，然后在搅拌的条件下逐滴加入1毫升高氯酸(70％)，再加入大量的蒸馏水，静置后析出固体，过滤、真空干燥，柱层析纯化分离得到0.094g化合物i-52，产率16％。esims：理论计算m/z:490.19,实际测试m/z:490.21。λ^abs.max/nm＝684nm,λ^emmax/nm＝715nm,фf＝0.42。

实施例37

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-1分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-53、i-54、i-55、i-56、i-57、i-58、i-59、i-60，产率分别为83％、85％、84％、87％、88％、83％、81％、80％。

实施例38

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-53、i-54、i-55、i-56、i-57、i-58、i-59、i-60分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-61、i-62、i-63、i-64、i-65、i-66、i-67、i-68，产率分别为41％、43％、44％、45％、47％、43％、42％、43％。

实施例39

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-53、i-54、i-55、i-56、i-57、i-58、i-59、i-60分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-69、i-70、i-71、i-72、i-73、i-74、i-75、i-76，产率分别为31％、33％、34％、35％、37％、35％、33％、30％。

实施例40

按照实施例25的方法，由1毫摩尔化合物ii-13分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-77、i-78、i-79、i-80、i-81、i-82、i-83、i-84，产率分别为11％、14％、16％、17％、21％、20％、15％、12％。

实施例41

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-2分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-85、i-86、i-87、i-88、i-89、i-90、i-91、i-92，产率分别为80％、86％、89％、85％、88％、83％、82％、81％。

实施例42

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-85、i-86、i-87、i-88、i-89、i-90、i-91、i-92分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-93、i-94、i-95、i-96、i-97、i-98、i-99、i-100，产率分别为38％、46％、45％、43％、45％、46％、41％、40％。

实施例43

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-85、i-86、i-87、i-88、i-89、i-90、i-91、i-92分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-101、i-102、i-103、i-104、i-105、i-106、i-107、i-108，产率分别为28％、31％、37％、36％、35％、33％、35％、32％。

实施例44

按照实施例25的方法，由1毫摩尔化合物ii-14分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-109、i-110、i-111、i-112、i-113、i-114、i-115、i-116，产率分别为8％、18％、14％、15％、17％、12％、11％、9％。

实施例45

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-15分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-117、i-118、i-119、i-120、i-121、i-122、i-123、i-124，产率分别为75％、82％、83％、73％、88％、83％、84％、82％。

实施例46

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-117、i-118、i-119、i-120、i-121、i-122、i-123、i-124分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-125、i-126、i-127、i-128、i-129、i-130、i-131、i-132，产率分别为35％、41％、43％、45％、44％、46％、43％、41％。

实施例47

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-117、i-118、i-119、i-120、i-121、i-122、i-123、i-124分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-133、i-134、i-135、i-136、i-137、i-138、i-139、i-140，产率分别为25％、30％、33％、35％、37％、34％、31％、33％。

实施例48

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-15分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-141、i-142、i-143、i-144、i-145、i-146、i-147、i-148，产率分别为9％、16％、13％、5％、18％、14％、11％、12％。

实施例49

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-16分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-3、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-149、i-150、i-151、i-152、i-153、i-154、i-155、i-156，产率分别为75％、84％、85％、87％、72％、89％、85％、83％。

实施例50

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-149、i-150、i-151、i-152、i-153、i-154、i-155、i-156分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-157、i-158、i-159、i-160、i-161、i-162、i-163、i-164，产率分别为37％、42％、44％、40％、48％、45％、41％、41％。

实施例51

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-149、i-150、i-151、i-152、i-153、i-154、i-155、i-156分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-165、i-166、i-167、i-168、i-169、i-170、i-171、i-172，产率分别为26％、31％、33％、32％、36％、35％、32％、33％。

实施例52

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-16分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-3、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-173、i-174、i-175、i-176、i-177、i-178、i-179、i-180，产率分别为8％、12％、11％、7％、15％、12％、13％、14％。

实施例53

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-17分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-181、i-182、i-183、i-184、i-185、i-186、i-187、i-188，产率分别为85％、87％、86％、89％、89％、85％、83％、80％。

实施例54

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-181、i-182、i-183、i-184、i-185、i-186、i-187、i-188分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-189、i-190、i-191、i-192、i-193、i-194、i-195、i-196，产率分别为39％、42％、44％、45％、47％、46％、42％、43％。

实施例55

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-181、i-182、i-183、i-184、i-185、i-186、i-187、i-188分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-197、i-198、i-199、i-200、i-201、i-202、i-203、i-204，产率分别为29％、31％、32％、36％、35％、34％、31％、32％。

实施例56

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-17分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-205、i-206、i-207、i-208、i-209、i-210、i-211、i-212，产率分别为10％、12％、14％、17％、20％、15％、13％、12％。

实施例57

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-18分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-213、i-214、i-215、i-216、i-217、i-218、i-219、i-220，产率分别为72％、81％、79％、63％、84％、81％、80％、76％。

实施例58

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-213、i-214、i-215、i-216、i-217、i-218、i-219、i-220分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-221、i-222、i-223、i-224、i-225、i-226、i-227、i-228，产率分别为33％、38％、40％、35％、44％、43％、41％、42％。

实施例59

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-213、i-214、i-215、i-216、i-217、i-218、i-219、i-220分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-229、i-230、i-231、i-232、i-233、i-234、i-235、i-236，产率分别为27％、32％、34％、30％、36％、33％、31％、30％。

实施例60

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-18分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-237、i-238、i-239、i-240、i-241、i-242、i-243、i-244，产率分别为7％、12％、13％、8％、16％、12％、9％、10％。

实施例61

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-19分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-245、i-246、i-247、i-248、i-249、i-250、i-251、i-252，产率分别为81％、84％、86％、73％、88％、85％、84％、83％。

实施例62

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-245、i-246、i-247、i-248、i-249、i-250、i-251、i-252分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-253、i-254、i-255、i-256、i-257、i-258、i-259、i-260，产率分别为37％、42％、43％、35％、44％、43％、42％、40％。

实施例63

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-245、i-246、i-247、i-248、i-249、i-250、i-251、i-252分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-261、i-262、i-263、i-264、i-265、i-266、i-267、i-268，产率分别为28％、31％、33％、32％、36％、34％、32％、33％。

实施例64

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-19分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-269、i-270、i-271、i-272、i-273、i-274、i-275、i-276，产率分别为11％、14％、13％、9％、16％、15％、13％、11％。

实施例65

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-20分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-277、i-278、i-279、i-280、i-281、i-282、i-283、i-284，产率分别为82％、84％、85％、71％、86％、88％、85％、82％。

实施例66

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-277、i-278、i-279、i-280、i-281、i-282、i-283、i-284分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-285、i-286、i-287、i-288、i-289、i-290、i-291、i-292，产率分别为36％、42％、43％、34％、45％、47％、42％、41％。

实施例67

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-277、i-278、i-279、i-280、i-281、i-282、i-283、i-284分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-293、i-294、i-295、i-296、i-297、i-298、i-299、i-300，产率分别为28％、32％、33％、31％、37％、38％、34％、32％。

实施例68

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-20分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-301、i-302、i-303、i-304、i-305、i-306、i-307、i-308，产率分别为9％、12％、13％、8％、14％、16％、13％、10％。

实施例69

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-21分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-309、i-310、i-311、i-312、i-313、i-314、i-315、i-316，产率分别为80％、82％、81％、69％、84％、85％、82％、78％。

实施例70

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-309、i-310、i-311、i-312、i-313、i-314、i-315、i-316分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-317、i-318、i-319、i-320、i-321、i-322、i-323、i-324，产率分别为33％、39％、41％、32％、43％、45％、40％、38％。

实施例71

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-309、i-310、i-311、i-312、i-313、i-314、i-315、i-316分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-325、i-326、i-327、i-328、i-329、i-330、i-331、i-332，产率分别为27％、30％、32％、31％、34％、36％、32％、30％。

实施例72

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-21分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-333、i-334、i-335、i-336、i-337、i-338、i-339、i-340，产率分别为7％、11％、12％、6％、14％、15％、13％、11％。

实施例73

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-22分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-341、i-342、i-343、i-344、i-345、i-346、i-347、i-348，产率分别为75％、74％、69％、78％、83％、81％、78％、73％。

实施例74

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-341、i-342、i-343、i-344、i-345、i-346、i-347、i-348分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-349、i-350、i-351、i-352、i-353、i-354、i-355、i-356，产率分别为32％、41％、30％、42％、44％、40％、42％、33％。

实施例75

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-341、i-342、i-343、i-344、i-345、i-346、i-347、i-348分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-357、i-358、i-359、i-360、i-361、i-362、i-363、i-364，产率分别为23％、28％、25％、30％、33％、34％、30％、28％。

实施例76

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-22分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-365、i-366、i-367、i-368、i-369、i-370、i-371、i-372，产率分别为6％、11％、5％、12％、14％、11％、12％、10％。

实施例77

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-23分别与1毫摩尔化合物iii-2、iii-3、iii-4、iii-6、iii-7、iii-8、iii-9、iii-11反应，可以分别制得化合物i-373、i-374、i-375、i-376、i-377、i-378、i-379、i-380，产率分别为81％、82％、79％、85％、87％、84％、82％、83％。

实施例78

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-373、i-374、i-375、i-376、i-377、i-378、i-379、i-380分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-381、i-382、i-383、i-384、i-385、i-386、i-387、i-388，产率分别为34％、41％、33％、44％、47％、45％、41％、42％。

实施例79

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-373、i-374、i-375、i-376、i-377、i-378、i-379、i-380分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-389、i-390、i-391、i-392、i-393、i-394、i-395、i-396，产率分别为27％、31％、30％、33％、35％、34％、31％、32％。

实施例80

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-23分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-397、i-398、i-399、i-400、i-401、i-402、i-403、i-404，产率分别为9％、14％、13％、7％、16％、15％、11％、13％。

实施例81

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-24分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-405、i-406、i-407、i-408、i-409、i-410、i-411、i-412，产率分别为81％、85％、84％、72％、83％、87％、82％、79％。

实施例82

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物i-405、i-406、i-407、i-408、i-409、i-410、i-411、i-412分别与1毫摩尔化合物ch3mgi反应，可以分别制得化合物i-413、i-414、i-415、i-416、i-417、i-418、i-419、i-420，产率分别为35％、43％、42％、40％、44％、46％、41％、42％。

实施例83

按照实施例1和实施例13的方法，由1毫摩尔化合物i-405、i-406、i-407、i-408、i-409、i-410、i-411、i-412分别与1毫摩尔化合物nacn反应，可以分别制得化合物i-421、i-422、i-423、i-424、i-425、i-426、i-427、i-428，产率分别为29％、32％、33％、30％、35％、37％、34％、33％。

实施例84

按照实施例1的方法，由1毫摩尔化合物ii-24分别与1毫摩尔化合物iii-1、iii-2、iii-4、iii-5、iii-7、iii-8、iii-9、iii-10反应，可以分别制得化合物i-429、i-430、i-431、i-432、i-433、i-434、i-435、i-436，产率分别为10％、16％、17％、11％、19％、21％、15％、13％。

实施例84

重复实施例1制备化合物i-1的方法，区别在于，将加热温度100℃改成“60℃”，反应时间改为4h，其余条件不变，制备得到具有结构式i的化合物。

按照上述实施例1-84的制备方法，可制得的产物结构i中，r1、r2、r6、r7可分别独立的为氢、低级烃基、醚基、取代烷基或酰基；r3、r4、r5、r8、r9、r10分别独立的为氢、低级烃基或卤素；r11为氢、甲基、氰基或三氟甲基；为阴离子；

其中，r1、r2、r6、r7中低级烃基可为直链、支链或环状；所述烃基包含1-6个碳原子；

其中，r1、r2、r6、r7中醚基中碳原子数为3～6，氧原子数≤2；

其中，r1、r2、r6、r7中取代烷基为直链或支链；所述取代烷基为ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基、ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基、ω-卤素取代1-6个碳原子烷基、ω-羟基取代1-6个碳原子烷基、ω-氨基取代1-6个碳原子烷基或ω-巯基取代1-6个碳原子烷基；其中，所述ω-甲酸酯基取代1-6个碳原子烷基中甲酸酯基为2-5个碳原子烷基甲酸酯基；所述的ω-甲酰胺基取代1-6个碳原子烷基中甲酰胺基为2-5个碳原子烃基甲酰胺基；

其中，r1、r2、r6、r7中酰基为2-6个碳原子烷基酰基、叔丁氧羰基、苯甲酰基、1-6个碳原子取代苯甲酰基或卤素取代苯甲酰基；所述r11为氢、甲基、氰基、或三氟甲基；

其中卤素为氟、氯、溴或碘。

本发明所得近红外的高量子产率染料应用于核仁rna荧光标记实验：

根据公开号为：cn103725758a的中国发明专利中提供的“近红外生物荧光染料在活细胞成像的应用”中的方法，将本发明实施例3、7、15、16、27、28、37、40、42、54、62、77中得到的具有结构式i的荧光染料化合物i-6、i-15、i-29、i-30、i-42、i-43、i-54、i-78、i-95、i-191、i-255、i-393应用于对a549细胞和hela细胞核仁rna的荧光标记，区别在于，步骤3)中染料溶液的最终浓度为400-450nm，结果分别如图1-14所示。从图1-14中均可以看出在配制较低浓度的染料溶液的条件下，该系列染料对细胞质染色的同时，也对细胞核内核仁也染色，图中细胞质有荧光，细胞核里的核仁也有荧光，整个染色范围均较大。且染料的荧光量子产量高、染色所需的染料浓度也很低，避免了高浓度染料对活细胞正常的生理功能造成某些干扰以及降低了细胞的毒性。

将本发明所得化合物染料i-54和i-78分别加dna酶和rna酶消化并与市售的dna、rna染料对比，如图15所示，结果说明化合物i-54和i-78进入细胞核所染的为核仁rna。

将本发明所得化合物染料i-54和i-78分别与市售rna染料sytornaselect的细胞染色效果对比，如图16所示，结果说明i-54和i-78比sytornaselect具有更好的核仁rna染色，并且对细胞的损伤小、降低了背景荧光的干扰。

显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。