专利名称：旋光异构体用分离剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及旋光异构体用分离剂，特别是涉及色谱法中优选使用的旋光异构体用分离剂。特别是提供一种在药品、食品、农药、香料等分析中对广泛的手性化合物使用具有高分离系数的光学离析的旋光异构体分析技术。
现有技术多种有机化合物，其物理性质、化学性质，例如沸点、熔点、溶解度等物理性质完全相同，但存在生理活性不同的旋光异构体。这是由于构成生物的蛋白质及糖质本身大致相同时，一方面存在旋光异构体，对其他旋光异构体的作用方法产生差异，呈现生理活性的差别，特别是在药品领域，往往看到旋光异构体的药效、毒性方面有显著差别，因此，厚生省在医药品制造指南中写道“当该药物为外消旋体时，要求对各种异构体研究其吸收、分布、代谢、排泄动态。”先前所述的旋光异构体由于物理、化学性质，例如沸点、熔点、溶解度等物理性质完全相同，不能采用通常的分离方法进行分析，所以，要研究简便、精密的分析种类繁多的旋光异构体的分析技术。作为符合这种要求的分析方法，可采用高速液相色谱法(HPLC)的光学离析法、特别是采用HPLC所用的手性柱的光学离析方法已取得进展。这里的所谓手性柱是不对称识别剂本身，或者，把不对称识别剂负载在适当载体上的手性固定相。
例如，已开发出光学活性聚甲基丙烯酸三苯基甲酯(特开昭57-150432号)、纤维素、直链淀粉衍生物(Y.Okomoto，M.Kawashima and K.Hatada，J.Am.Chem.Soc.，106，5337，1984)、蛋白质的卵类粘蛋白(特开昭63-307829号)等。在这几种HPLC手性固定相中，纤维素和直链淀粉衍生物负载在硅胶上的光学分离柱，对极广泛的化合物己知有很高的不对称识别能力。近几年来，使HPLC用手性固定相和模拟移动床法进行组合的工业规模的光学活性体液体色谱法分离的探讨已得到进展(Phram Tech Japan 12，43(1996))，不仅要求能将其简单地完全分离，而且，要使色谱分离的生产性提高，对目的化合物的分离更加有效，即要求具有更大的分离系数α值的手性固定相，进行潜心研究，发现具有大的α值的不对称识别能力高的多糖衍生物。
另外，最近作为考虑环境的分离、分析方法，使用水系移动相，或把极少量的移动相使用量作为目标的反相条件专用旋光异构体分离以及在毛细管电泳(CE)领域的旋光异构体分离引起人们极大关注，希望在这些领域采用具有高的不对称识别能力的分离剂。
发明的公开本发明人对具有特征的不对称识别能力的旋光异构体用分离剂进行悉心研究的结果而完成本发明。
即，本发明的旋光异构体用分离剂以具有碳原子数10以上的长链烷氧基作为芳香族取代基的多糖芳香族衍生物作为有效成分。
本发明提供一种采用具有碳原子数10以上的长链烷氧基作为芳香族取代基的多糖芳香族衍生物作为旋光异构体用分离剂，以及采用具有碳原子数10以上的长链烷氧基作为芳香族取代基的多糖芳香族衍生物分离旋光异构体的方法。
本发明的详细说明下面对本发明的实施方案加以详细说明。
作为构成本发明所用的多糖芳香族衍生物的多糖，有合成多糖、天然多糖以及天然物质变成的多糖的任何一种只要有光学活性的均可使用，优选的是希望采用结合状态的规则性高的。例如，β-1，4-葡聚糖(纤维素)、α-1，4-葡聚糖(直链淀粉、支链淀粉)、α-1，6-葡聚糖(右旋糖酐)、β-1，6-葡聚糖(石脐素)、β-1，3-葡聚糖(例如，カ-ドラン，シゾフイラシ等)、á-1，3-葡聚糖、β-1，2-葡聚糖(五棓子多糖)、β-1，4-半乳聚糖、β-1，4-甘露聚糖、α-1，6-甘露聚糖、β-1，2-果聚糖(菊糖)、β-2，6-果聚糖(左聚糖)、β-1，4-木聚糖、β-1，3-木聚糖、β-1，4-脱乙酰壳多糖、α-1，4-N-乙酰脱乙酰壳多糖(吉廷苷)、支链淀粉、琼脂糖、藻酸等，还包括含直链淀粉的淀粉。其中，容易得到高纯度多糖的纤维素、直链淀粉、β-1，4-木聚糖、β-1，4-脱乙酰壳多糖、吉廷苷、β-1，4-甘露聚糖、菊糖、カ-ドラン等是优选的，特别优选的是纤维素、直链淀粉。
这些多糖的数均聚合度(1个分子中所含的吡喃糖或呋喃糖环的平均数)在5以上，优选10以上，无特别的上限，但从易于处理考虑，1000以下是优选的。
所谓本发明的多糖芳香衍生物，具有与上述多糖羟基的一部分或全部的有关羟基反应得到的官能团的芳香族化合物和通过酯键、聚氨酯键、或醚键等结合的化合物。
作为这里的具有能与羟基反应的官能团的芳香族化合物，可以举出芳香族羧酸、酰氯、酸酐、酸酯等芳香族羧酸衍生物或芳香族异氰酸，芳香环上以具有碳原子10以上、优选10-30个的长链烷氧基作为取代基的化合物。长链烷氧基是无支链的直链长烷氧基是优选的。
另外，多糖和具有碳原子10个以上的长链烷氧基作为取代基的芳香族羧酸、芳香族羧酸衍生物或和芳香族异氰酸反应所形成的芳香族酯基或氨基甲酸酯基，每1个葡萄糖单元达到0.1个以上是优选的。作为本发明的多糖衍生物，具有这种酯基或氨基甲酸酯基的多糖酯衍生物或氨基甲酸酯衍生物是优选的，而酯衍生物是特别优选的。
本发明的具有碳原子10以上的长链烷氧基作为取代基的多糖芳香族衍生物，采用在下述载体上负载的方法、把多糖芳香族衍生物本身加以粉碎或制成球状粒子的方法的任何一种方法，制造旋光异构体用分离剂。
这里所说的载体，是载体上固定多糖衍生物的载体，其固定方法是多糖衍生物和载体之间的物理吸附、和载体间的化学吸附、多糖衍生物彼此间的化学吸附、第三成分的化学吸附、对多糖衍生物照射光、自由基反应等任何一种方法均可。还有，这里所说的载体，可以举出多孔性有机载体或多孔性无机载体，优选无机多孔性载体。作为合适的多孔性有机载体，可以举出聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯等构成的高分子物质，作为合适的无机多孔性载体，可以举出硅石、氧化铝、氧化镁、玻璃、高岭土、氧化钛、硅酸盐、羟基磷灰石等。特别优选的是硅胶，硅胶的粒径为0.1μm-10mm，优选1μm-300μm，平均孔径10-100μm，优选50-50000。为了排除表面残留的硅醇的影响，要求进行表面处理，但是，即使不进行全部表面处理也可以。
多糖芳香族衍生物在载体上的负载量，对载体1-100重量份是优选的，特别是5-60重量份是优选的。
另外，具有碳原子10以上的长链烷氧基作为取代基的多糖芳香族衍生物，也可采用此前巳知的方法将其粉碎或制成球状粒子。所得到的破碎状或球状的多糖衍生物，原样或进行分级，希望达到粒度整齐。
本发明的旋光异构体用分离剂，可用于作为色谱法用手性固定相，一般用于气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法、毛细管电泳法、连续式液体色谱分离法等的色谱法，但是，液相色谱用固定相，特别是用水、醇、乙腈或它们的混合液作移动相的液相色谱用固定相；薄层色谱用固定相；添加至以胶束电导色谱法、毛细管电色谱法为代表的毛细管电泳法中的泳动液中或填充至毛细管内的不对称识别剂；用作以模拟移动床式为代表的连续式液体色谱分离固定相是优选的。
另外，本发明的多糖芳香族衍生物不仅用于色谱用分离剂，而且也可用于利用侧长链烷氧基的本身结合的主客体分离剂、膜分离、液晶材料。
本发明的效果本发明提供一种特别是对疏水性化合物具有高的不对称识别能力的旋光异构体用分离剂。
有机层用硫酸镁干燥，滤出硫酸镁后，蒸出有机溶剂，得到白色固体(2)。 ④3，4，5-三(十二烷-1-基氧)苯甲酰氯(5)的合成在氮气氛中，往烧瓶里加入(4)4.30g、亚硫酰氯4ml，于80℃回流20小时。然后，蒸出亚硫酰氯，得到黄白色固体(5)(产量4.36g，收率98.7％)。
⑤纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯(6)的合成在氮气氛中，往烧瓶里加入纤维素(商品名アビセル，メルク社制造)0.26g、(5)4.36g和无水吡啶5.4ml，于80℃加热搅拌15小时。然后，把反应混合物注入甲醇∶水＝4∶1(v/v)混合溶液中，得到淡黄色固体(6)(产量3.08g，收率90.1％)。所得到的纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯(6)的元素分析值示于表1。
表1 纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯](6)的元素分析值
⑥载有纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯(6)的填充剂的制造把⑤中得到的纤维素酯衍生物(6)1.0g溶于10mml氯仿中。将该纤维素酯衍生物(6)的氯仿溶液在经过氨基丙基硅烷处理的硅胶4.0g(粒径7μm)中均匀振荡后，蒸出溶剂，制成载有纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯(6)的填充剂。
⑦采用纤维素三[3’，4’，5’-三(十二烷-1-基氧)苯甲酸酯(6)载带型填充剂的填充柱制造采用⑥中制成的负载型填充剂，通过淤浆填充法往φ0.20cm×L25cm的不锈钢柱中进行加压、填充，制成旋光异构体用分离柱。应用例1采用实施例1中制成的旋光异构体分离柱，通过下列条件(1)的液相色谱法，对以式(1)表示的六螺烯的不对称识别能力(α值)进行评价。作为比较，采用从市场购得的纤维素酯系衍生物作为不对称识别剂的纤维素三苯甲酸酯负载型旋光异构体分离用柱(CHIRALCEL(登记商标)OB，ダイセル化学工业(株)制造，φ0.46×L25cm)、纤维素三乙酸酯负载型旋光异构体分离柱(CHIRALCEL(登记商标)OA，ダイセル化学工业(株)制造，φ0.46×L25cm)，分别按下列条件(2)及(3)的液相色谱法，进行六螺烯的不对称识别能力(α值)的评价。 分析条件(1)移动相甲醇，流速0.2ml/min，温度25℃分析条件(2)移动相乙醇，流速0.5ml/min，温度25℃分析条件(3)移动相水/乙醇＝50/50(v/v)，流速0.5ml/min，温度25℃还有，表中保持系数(k’)、分离系数(α)依下式定义保持系数k’＝[(对映体的保持时间-(死时间)]/死时间分离系数α＝(较强保持的对映体的保持系数)/(较弱保持的对映体的保持系数)此时，死时间是以三叔丁基苯的洗提时间作为死时间。
表2 应用例2采用实施例1中制成的旋光异构体分离柱，通过下列条件的液相色谱法，对以式(2)表示的特勒格尔盐基的不对称识别能力(α值)进行评价。作为比较，采用特开昭60-142930号公报中记载的方法制成的载有纤维素三-对-辛基氧苯甲酸酯的分离剂，同样进行不对称识别能力(α值)评价。结果示于表3。 分析条件 移动相己烷/异丙醇＝90/10(v/v)，流速0.5ml/min，温度25℃，检测254nm表3
权利要求
1.一种旋光异构体用分离剂，其以具有碳原子数10以上的长链烷氧基作为芳香族取代基的多糖芳香族衍生物作为有效成分。
2.权利要求1中所述的分离剂，其特征是，多糖芳香族衍生物是纤维素或直链淀粉的酯衍生物或氨基甲酸酯衍生物。
3.权利要求1或2中所述的分离剂，其特征是，长链烷氧基是无支链的直链烷氧基。
4.权利要求1-3中任何一项所述的分离剂，其特征是，可以用作色谱用手性固定相。
5.权利要求4中所述的分离剂，其特征是，色谱用手性固定相是在以水、乙醇、乙腈或其混合液作为移动相时的条件下使用。
6.权利要求4中所述的分离剂，其特征是，色谱用手性固定相是添加到毛细管电泳中的泳动液中或填充在毛细管内的不对称识别剂。
7.权利要求4所述的分离剂，其特征是，色谱用手性固定相是连续式色谱分离用固定相。
全文摘要
本发明提供一种具有特征的不对称识别能力的旋光异构体用分离剂。它以具有碳原子数10以上的长链烷氧基作为芳香族取代基的多糖芳香族衍生物作为有效成分的旋光异构体用分离剂。
文档编号B01J20/285GK1462264SQ02801455
公开日2003年12月17日 申请日期2002年4月25日 优先权日2001年4月27日
发明者冈本佳男, 山本智代 申请人:大赛璐化学工业株式会社