17β-雌二醇分子印迹材料的制备方法
【专利摘要】本发明公开了17β-雌二醇分子印迹材料的制备方法，该方法基于计算机模拟和光谱学技术，选用2-(甲基丙烯酰氧）乙基磷酸酯作为功能单体，17β-雌二醇作为模板分子，乙腈-甲苯混合液作为起泡剂，三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯作为交联剂制备新型的17β-雌二醇分子印迹材料，并对聚合物材料进行了表征，此材料对17β-雌二醇有较好的亲和性和选择性，可作为高效的固相萃取剂应用于17β-雌二醇残留检测。
【专利说明】17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明涉及分子印迹聚合物，具体为17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法。
【背景技术】
[0003]17 β -雌二醇是一类重要的雌激素，它对生态环境和人类健康的危害极大，可通过食物链在生态系统内进行生物富集，并最终在机体脂肪组织蓄积，形成长期毒害，可损害人体肝脏和肾脏，导致儿童性早熟、致畸致癌等，严重威胁人类健康。分子印迹聚合物具有亲和性高、选择性好，对外界恶劣环境(高温、高压、强酸、强碱、有机试剂等)耐受能力强，稳定性好，使用寿命长，应用范围广等特点而逐渐受到人们关注。目前17β-雌二醇分子印迹技术有了较大发展，但大多采用传统方式制备分子印迹材料后集中于其应用方面的研究，包括食品和环境中17 β -雌二醇残留量的测定和水体环境中17 β -雌二醇的去除方面的应用，而对于开发17 β -雌二醇分子印迹聚合物的研究较少。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对【背景技术】中提到关于开发17 β -雌二醇分子印迹聚合物较少的问题，提供一种采用2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯作为功能单体制备17 β -雌二醇分子印迹材料的方法，以解决上述【背景技术】中提到的问题。
[0005]为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案来实现:
17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法，包括以下步骤:
(1)称取0.068g的17β-雌二醇作为模板分子，0.2f0.42g的2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体，将两者置于顶空进样瓶中，并加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液进行涡旋溶解，涡旋溶解后置于4°C冰箱中静置10-14h ;然后恢复到室温，加入
0.84-1.68g的交联剂和3(T90mg的引发剂，不间断通入氮气4-6 min后，盖上瓶盖密封，在60°C~80°C水浴中振荡反应12~24 h，制得分子印迹聚合物；
(2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽滤，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复三次；上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤三次，再用20mL蒸馏水洗涤三次，最后用20mL甲醇洗涤两次，将聚合物转移到蒸发皿中，于60°C恒温烘干；
(3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤22~26h以除去模板分子；
(4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤2次，在60°C恒温烘干； (5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μ m粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90 μ m粒子即为17 β -雌二醇分子印迹材料。
[0006]作为本发明的优选方案，所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)或三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRM)。
[0007]作为本发明的优选方案，所述引发剂为偶氮二异丁腈(AIBN)。
[0008]综上所述，本发明与以往技术相比具有以下有益效果:
本发明基于计算机模拟和光谱学技术，选用2_(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯作为功能单体，17 β -雌二醇作为模板分子，乙腈-甲苯混合液作为起泡剂，三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯作为交联剂制备新型的17 β -雌二醇分子印迹材料，并对聚合物材料进行了表征，此材料对17β-雌二醇有较好的亲和性和选择性，可作为高效的固相萃取剂应用于17β-雌二醇残留检测。
【专利附图】
【附图说明】
[0009]图1为分子印迹聚合物的扫描电子显微镜图；
图2为本发明制备的分子印迹聚合物的动态吸附曲线图；
图3为本发明制备的分子印迹聚合物的静态吸附等温线曲线图。
【具体实施方式】
[0010]下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0011]实施例1
17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法:
(1)称取0.068g17 β-雌二醇作为模板分子，0.21g 2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体于20mL顶空进样瓶中，加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液涡旋溶解后，置于4°C冰箱中静置l(Tl4h ;恢复到室温，加入0.84g三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRM)，30mg偶氮二异丁腈(AIBN)，不间断通入氮气5 min后，盖上瓶盖密封，在60°C水浴中振荡反应24 h，制得分子印迹聚合物；
(2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽滤，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，并将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复3次，上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤3次，再用20mL蒸馏水洗涤3次，最后用20mL甲醇洗涤2次，聚合物转移到蒸发皿中，于60°C烘干；
(3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤24h以除去模板分子；
(4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤2次，在60°C烘干；
(5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μπι粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90μπι粒子即为17 β-雌二醇分子印迹材料，如图1所示。
[0012]实施例2
17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法:(1)称取0.068g17 β-雌二醇作为模板分子，0.21g 2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体于20mL顶空进样瓶中，加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液涡旋溶解后，置于4°C冰箱中静置l(Tl4h ;恢复到室温，加入1.68g三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRM)，60mg偶氮二异丁腈(AIBN)，不间断通入氮气5 min后，盖上瓶盖密封，在70°C水浴中振荡反应24 h，制得分子印迹聚合物；
(2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，并将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复三次，上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤3次，再用20mL蒸馏水洗涤3次，最后用20mL甲醇洗涤2次，聚合物转移到蒸发皿中，于60°C烘干；
(3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤24h以除去模板分子；
(4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤2次，在60°C烘干；
(5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μ m粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90 μ m粒子即为17 β -雌二醇分子印迹材料。
[0013]实施例3
17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法:
(1)称取0.068g17β-雌二醇作为模板分子，0.32g 2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体于20mL顶空进样瓶中，加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液涡旋溶解后，置于4°C冰箱中静置l(Tl4h ;恢复到室温，加入0.84g三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRM)，60mg偶氮二异丁腈(AIBN)，不间断通入氮气5 min后，盖上瓶盖密封，在80°C水浴中振荡反应24 h，制得分子印迹聚合物；
(2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽滤，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，并将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复3次，上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤3次，再用20mL蒸馏水洗涤3次，最后用20mL甲醇洗涤2次，聚合物转移到蒸发皿中，于60°C烘干；
(3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤24h以除去模板分子；
(4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤2次，在60°C烘干；
(5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μ m粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90μπι粒子即为17 β-雌二醇分子印迹材料。
[0014]实施例4
17 β -雌二醇分子印迹材料的制备方法:
(I)称取0.068g 17β-雌二醇作为模板分子，0.42g 2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体于20mL顶空进样瓶中，加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液涡旋溶解后，置于4°C冰箱中静置l(Tl4h ;加入0.84g三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRM)，90mg偶氮二异丁腈(AIBN)，不间断通入氮气5 min后，盖上瓶盖密封，在70°C水浴中振荡反应24h，制得分子印迹聚合物；(2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽滤，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，并将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复3次，上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤3次，再用20mL蒸馏水洗涤3次，最后用20mL甲醇洗涤2次，聚合物转移到蒸发皿中，于60°C烘干；
(3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤24h以除去模板分子；
(4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤2次，在60°C烘干；
(5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μ m粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90μπι粒子即为17 β-雌二醇分子印迹材料。
[0015]如图2-3所示，实施例2所用的条件为制备17 β -雌二醇分子印迹材料的最优条件。
[0016]对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
[0017]此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
【权利要求】
1.17 β-雌二醇分子印迹材料的制备方法，其特征是，包括以下步骤: (1)称取0.068g的17β-雌二醇作为模板分子，0.2f0.42g的2-(甲基丙烯酰氧)乙基磷酸酯功能单体，将两者置于顶空进样瓶中，并加入7.5mL体积比为3:1的乙腈-甲苯混合液进行涡旋溶解，涡旋溶解后置于4°C冰箱中静置l(Tl4h ;然后恢复到室温，加入0.84~1.68g的交联剂和3(T90mg的引发剂，不间断通入氮气4~6 min后，盖上瓶盖密封，在60°C~80°C水浴中振荡反应12~24 h，制得分子印迹聚合物； (2)将制备的分子印迹聚合物捣碎，倒入垫有二层滤纸的布氏漏斗中抽滤，用1mL乙腈洗涤顶空进样瓶，将洗涤后的液体倒于滤纸上，重复三次；上层聚合物再用20mL体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液洗涤三次，再用20mL蒸馏水洗涤三次，最后用20mL甲醇洗涤两次，将聚合物转移到蒸发皿中，于60°C恒温烘干； (3)将烘干的分子印迹聚合物研碎，装入滤纸筒中置于索氏提取器中，用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合液反复洗涤22~26h以除去模板分子； (4)将除去模板分子的聚合物取出置于布氏漏斗进行抽滤，用水洗至中性后再用20mL甲醇洗涤两次，在60°C恒温烘干； (5)将(4)烘干的聚合物研磨过筛，收集45~90μπι粒子并储存于干燥器中备用，所收集的45~90μπι粒子即为17 β-雌二醇分子印迹材料。
2.根据权利要求1所述的17β-雌二醇分子印迹材料的制备方法，其特征是，所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯或三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯。
3.根据权利要求1所述的17β-雌二醇分子印迹材料的制备方法，其特征是，所述引发剂为偶氮二异丁腈。
【文档编号】B01J20/281GK104130442SQ201410347647
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月22日 优先权日:2014年7月22日
【发明者】左海根, 魏远隆, 郭平, 祝建新, 占春瑞, 石磊, 曾海龙 申请人:江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心