专利名称：患神经退行性疾病的对象中抗体所识别的小分子的鉴定的制作方法
患神经退行性疾病的对象中抗体所识别的小分子的鉴定
背景技术：
本申请要求与2009年6月2号提交的美国临时申请 序列号61/183，260和于2010 年3月29日提交的美国临时申请序列号61/318，655的优先权，上述每个申请通过整体引用并入本文。本发明在国家心脏、肺和血液研究所(资助号N01-HV28185)和国立卫生院(资助号DP10D00066301)的政府资助下完成。政府享有本发明的一些权益。
I.发明领域本发明一般性涉及分子生物学、免疫学和神经生物学领域。更具体地，本发明涉及被神经退行性疾病(neurodegenerative disease, ND)特异性抗体所识别的拟肽的鉴定。 这些拟肽可用于鉴定患有或有风险患ND的对象。II.相关技术描述阿尔兹海默病(Alzherimer’ s Disease, AD)是有多至530万美国人患病的进行性致命脑疾病。AD破坏脑细胞，造成记忆、思考和行为问题。这些症状随时间加重，最终疾病是致命的。目前，在美国它是位列第六的致死原因，并且是痴呆的最常见形式，占所有痴呆病例的50-70%。不幸的是尽管有对症状的治疗方法，但不能治愈。诊断阿尔兹海默病是涉及几种类型评估的经验性过程，并且可花费许多天或几周来完成。评估包括了解详细病史和身体检查。此外，设计标准实验室检测(包括血液、尿和 CSF检测)主要来帮助排除其他可能病症。还进行神经心理学检测，使用多种工具来评估记忆、问题解决、注意力、视觉-运动协调和抽象思维。还应包括抑郁检测。最后，推荐脑成像扫描来排除造成症状的脑肿瘤或脑中血液凝块。总之，目前没有确切诊断阿尔兹海默病的单个检测，可能仅通过在死后检查脑组织来确定地诊断阿尔兹海默病。帕金森氏病(PD)是另一种脑(中央神经系统)退行性疾病，它通常损害运动能力、语言和其他功能。它影响运动(运动症状)，但其他典型症状包括情绪、行为、思考和感觉障碍(非运动症状)。个体患者症状可有相当的不同，并且疾病进展也有个体差异。PD 的症状是由于黑质致密区着色的多巴胺分泌(多巴胺能)细胞缺失(自发性或遗传性、毒性或创伤性缺失)。这些神经元影响纹状体，并且它们的缺失导致调节运动的基底神经节神经回路的活性改变，本质上抑制直接通路而激发间接通路。PD的诊断有类似但稍有不同的挑战。当进行神经病学检查来评估有任何运动障碍的患者时，医生应了解病史并进行身体检查。此外，进行神经病学检查来完整评估神经系统，包括患者的运动、协调和平衡状况。有典型帕金森氏病症状的患者的血液实验室检测很少发现任何异常。脑电图(EEG’ s)记录脑电活性的一些状态，但在确定PD方面不太有效。 脑部MRI和CAT扫描产生显明和精细的尸检学图片，但PD疾病患者的脑甚至在这样的精细检查下也显示正常，这是因为与PD相关的改变是显微水平的并且这些扫描不能显示。由于没有确定性的诊断检测来提供具体答案，医生必须根据判断来作出PD诊断。因此，仍需要对这两种疾病和其他神经性疾病的诊断方法其(i)准确并且客观，( )简单并且可重复，和(iii)可用于早期和晚期病例两者。发明概述本发明提供了包含与指示神经退行性疾病之抗体结合的拟肽的组合物和检测包含抗体的样品中抗体的方法，其包括将包含抗体的样品与其上附加有拟肽的支持物接触。 本发明的拟肽具有式
权利要求
1.检测包含抗体的样品中抗体的方法，其包括(a)将包含抗体的样品与有拟肽附加其上的支持物接触，所述拟肽具有⑴式(IA)
2.权利要求1的方法，其还包括从对象获得所述样品。
3.权利要求1的方法，其还包括如果抗体与所述拟肽的结合大于在对照未患病患者中观察到的，则诊断从其获得所述样品的对象患阿尔兹海默病。
4.权利要求3的方法，其中一种或更多种拟肽选自
5.权利要求1的方法，其中所述样品与多于一种的权利要求1的拟肽接触。
6.权利要求5的方法，其中所述样品与三种结构不同的拟肽接触。
7.权利要求6的方法，其中所述拟肽是AD1、AD2和AD3。
8.权利要求1的方法，其中所述支持物是珠、板、蘸棒、滤器、膜、针或孔。
9.权利要求1的方法，其中所述样品是血液、血清、唾液或CSF。
10.权利要求1的方法，其中检测包括RIA、FIA、ELISA、Western印迹、流式细胞术、FRET 或表面等离子共振。
11.检测包含抗体的样品中抗体的方法，其包括(a)将包含抗体的样品与其上附加拟肽的支持物接触，所述拟肽具有 ⑴式(2A)
12.权利要求11的方法，其中R26、R29、R31和/或R32是烷基胺或N-丁基胺。
13.权利要求11的方法，其中R3°是烯基或烯丙基。
14.权利要求11的方法，其中R35是烯丙基。
15.权利要求11的方法，其中R37是烷氧基。
16.权利要求15的方法，其中所述烷氧基是乙氧基。
17.权利要求11的方法，其还包括从对象获得所述样品。
18.权利要求11的方法，其还包括如果抗体与所述拟肽的结合大于在对照未患病患者中观察到的，则诊断从其获得所述样品的对象患帕金森氏病。
19.权利要求18的方法，其中所述拟肽选自
20.权利要求11的方法，其中所述样品与多于一种式2A或2B的拟肽接触。
21.权利要求20的方法，其中所述样品与三种结构不同的拟肽接触。
22.权利要求21的方法，其中所述拟肽是PD1、PD2和PD3。
23.权利要求11的方法，其中所述支持物是珠、板、蘸棒、滤器、膜、针或孔。
24.权利要求11的方法，其中所述样品是血液、血清、唾液或CSF。
25.权利要求11的方法，其中检测包括RIA、FIA、ELISA、Western印迹、流式细胞术、 FRET或表面等离子共振。
26.治疗被怀疑患神经退行性疾病(ND)的对象的方法，其包括(a)将来自所述对象的包含抗体的样品与一种或更多种有拟肽附加其上的支持物接触，所述拟肽包括 ⑴式(IA)
27.权利要求26的方法，其还包括从对象获得所述样品。
28.权利要求26的方法，其还包括如果抗体与所述PD拟肽的结合大于在对照未患病患者中观察到的，则诊断从其获得所述样品的对象患帕金森氏病。
29.权利要求26的方法，其还包括如果抗体与所述AD拟肽的结合大于在对照未患病患者中观察到的，则诊断从其获得所述样品的对象患阿尔兹海默病。
30.权利要求26的方法，其中所述样品与多于一种式(IA-D)和/或(2A-B)的拟肽接触。
31.权利要求30的方法，其中所述样品与对PD和AD各自抗体有反应性的三种结构不同的拟肽接触。
32.权利要求26的方法，其中所述支持物是珠、板、蘸棒、滤器、膜、针或孔。
33.权利要求26的方法，其中所述样品是血液、血清、唾液或CSF。
34.权利要求26的方法，其中检测包括RIA、FIA、ELISA、Western印迹、流式细胞术、 FRET或表面等离子共振。
35.权利要求26的方法，其还包括对所述对象做出治疗决定。
36.指示神经退行性疾病的抗体的检测试剂盒，所述试剂盒包含一种或更多种拟肽，其包括
37.权利要求36的试剂盒，其中所述拟肽与基质偶联。
38.权利要求36的试剂盒，其中一种或更多种拟肽选自
39.在被怀疑患阿尔兹海默病的对象中诊断AD的方法，其包括(a)将来自所述患者的血清样品暴露至包含多个高亲和性拟肽的微阵列，所述拟肽具有
40.分离的抗体组合物，其包含从患神经退行性疾病对象的血清分离的抗体，其中所述抗体与包括以下结构的拟肽特异性结合
41.用于检测阿尔兹海默病或帕金森氏病相关抗原的试剂盒，其包含权利要求40的分离的抗体。
42.由包括以下的步骤分离的抗体(a)将样品与免疫亲和性基质相接触，所述样品包含指示神经退行性疾病的抗体，所述免疫亲和性基质包含权利要求1和/或11的结合神经退行性疾病指示抗体的拟肽；(b)从所述亲和性基质洗脱所述结合抗体。
43.含有拟肽的组合物，所述拟肽具有下式 (a)式(IA)
44.权利要求43的组合物，其还包含指示神经退行性疾病的抗体。
45.包括下式的拟肽组合物
46.权利要求45的组合物，其还包含指示神经退行性疾病的抗体。
47.具有下式的分离的拟肽 (a)式(IA)
48.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
49.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
50.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
51.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
52.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
53.权利要求47的分离的拟肽，其中所述拟肽具有结构
54.在生物流体中检测抗体的方法，其包括(a)用包含浓度为0.5至2mg/ml的细菌裂解物的封闭缓冲液孵育拟肽阵列；(b)去除所述封闭缓冲液；(c)用包含细菌裂解物的样品溶液孵育所述拟肽阵列；和(d)检测结合至所述拟肽阵列的抗体。
全文摘要
本发明提供了患神经退行性疾病(ND)的个体的鉴定。鉴定了帕金森氏病和阿尔兹海默病特异性抗体识别的拟肽，其能诊断或预测对象的ND。
文档编号G01N33/68GK102439451SQ201080023987
公开日2012年5月2日 申请日期2010年6月1日 优先权日2009年6月2日
发明者史蒂文·康奈利, 德怀特·格曼, 托马斯·科达德克, 约翰尼·威尔逊, 罗丝玛丽·威尔逊, 雷迪·穆拉 申请人:奥普科健康公司, 德克萨斯大学系统董事会