专利名称：一种黄酒中甲胺磷的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种黄酒中甲胺磷农药残留的定性和定量检测方法。
背景技术：
甲胺磷是一种高效有机磷杀剂，杀虫范围广，在粮谷、蔬菜等农作物的种植过程中被广泛使用。由于毒性强，在中国、日本等部份国家已禁用。2008年1月中国国家发展改革委等六部委发布的《关于停止生产甲胺磷等五种高毒农药》的公告，禁止使用包括甲胺磷在内的5种有机磷农药。近年来食品安全突发事件频发，国内外对食品中农药残留的限量要求也越来越严格。如2008年初的日本“毒饺子”事件有日本的消费者买了中国大陆制造的手工饺子食用之后，全家出现中毒症状，该饺子被化验出含甲胺磷残留。2010年初国内发生了海南“毒豇豆”事件(水胺硫磷、氧化乐果、三唑磷、克百威残留)。此外，我国农产品出口到日本被通报农药残留超标的事件了经常发生。随着国际社会对农药残留标准的日趋严格，并日益成为发达国家或农产品进出国设置贸易技术壁垒的主要手段，据测算，我国出口农产品因农药残留问题屡遭国外拒收、扣留、退货、索赔，每年外贸损失达到70亿美元。黄酒是中国的特色产品，主要销往日本、欧盟等发达国家，其中以日本的出口量最大。黄酒虽是我国的传统酒种，但在基础研究和食品安全控制方面起步较晚，特别是缺乏对黄酒中农药残留以及外来添加物等有害成分的检测方法和控制措施的研究。酿酒所用的原料大米在种植过程中不可避免地需要使用农药，致使原料米中可能残留国外重点关注的风险较高的农药，黄酒中也有可能存在这些农药残留的风险。目前，国内外没有形成黄酒中甲胺磷测定的方法标准，也没有相关的专利。现有的食品中甲胺磷检测方法中所涉及的样品均未包含黄酒样品。由于黄酒中含有大量的水和酒精，而甲胺磷的极性较大，采用其它产品中甲胺磷残留的分析方法会导致回收率很低，影响残留分析定量的准确性。因此，需要专门针对黄酒制定一种甲胺磷的残留测定方法。
发明内容
为解决现有食品中甲胺磷测定方法对黄酒样品检测存在的技术缺陷和不适合，本发明提供了一种专门针对黄酒的甲胺磷测定方法，提高了黄酒中甲胺磷的回收率，定量检测限为10yg/L。一种黄酒中甲胺磷测定方法，包括以下步骤(1)提取和净化依次用丙酮、超纯水活化固相萃取小柱，使小柱保持润湿状态，备用。取黄酒加入到已经活化好的小柱上，让酒样在重力作用下缓慢通过小柱。待酒样全部通过后，抽真空排干小柱中的水分。再用乙酸乙酯洗脱保留在小柱上的甲胺磷，收集洗脱液于40-50°C水浴中氮吹至与所加的黄酒相同体积，备用，供气相色谱-火焰光度检测器测定。所述的固相萃取小柱优选采用性双官能团改性的聚苯乙烯-二乙烯基苯吸附树脂为填料的固相萃取小柱，例如德国丽公司的商品名为fesy的小柱，优选规格 500mg/3mLo所述的黄酒样品的用量以0. 2 ImL为佳，更优选lmL。所述的水浴温度优选45 V。(2)基质匹配标准工作溶液的配制取不含甲胺磷的阴性黄酒样品，按步骤(1)操作的提取和净化步骤，获取不含甲胺磷的空白样品基质。使用乙酸乙酯稀释甲胺磷标准溶液储备液至所需的浓度，配制标准工作溶液。取200 μ L空白样品基质，氮气吹干后加入同体积的标准工作溶液，涡旋混勻后得同样浓度的基质匹配标准工作溶液。(3)气相色谱测定采用基质匹配标准工作溶液外标法定量，将( 所配制的基质匹配标准工作溶液按浓度从低到高依次注入气相色谱测定，以峰面积对浓度绘制标准曲线，基质匹配标准工作溶液中甲胺磷响应值应在仪器检测线性范围内。将步骤(1)所获得的样液注入气相色谱测定，以标准曲线计算所含的甲胺磷含量。样液中甲胺磷响应值应在仪器检测线性范围内，若响应值超出上限，则需要将样液用乙酸乙酯稀释后再重新注入气相色谱测定；若响应值低于下限，则直接给出定性检测结果 “< 10μ g/L”。(4)液相色谱-串联质谱定性确证当进行气相色谱测定时，若检出试样中甲胺磷的含量大于方法定量检测限IOyg/ L时，取一定体积的步骤(3)中气相色谱测定后的样液，在40°C-5(TC (优选45°C)水浴中氮吹干后，用初始比例的流动相(10%甲醇/90%水)200 μ L定容至相同体积，过0. 22 μ m 滤膜后供液相色谱-串联质谱定性确证。在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准物质中对应的保留时间一致， 且样品组分中各定性离子的相对丰度与浓度相近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过下述最大允许偏差的规定相对离子丰度>50 > 20 50 > 10 20 ^ 10允许的相对偏差士 20 士 25士 30士 50则被确证的样品可判定为阳性检出，并去下一步骤获取定量结果。若偏差超过上述规定，则样品可判定为阴性检出。(5)空白试验使用纯水代替黄酒加到固相萃取小柱上，其余操作相同，按照上述步骤(1) (4) 进行。按式⑴计算空白值，记为)(。。
权利要求
1. 一种黄酒中甲胺磷的测定方法，其特征在于包括以下步骤(1)提取和净化依次用丙酮、超纯水活化固相萃取小柱，使小柱保持润湿状态，备用；取待测黄酒样品加入到已经活化好的小柱上，让酒样在重力作用下缓慢通过小柱，待酒样全部通过后，抽真空排干小柱中的水分，再用乙酸乙酯洗脱保留在小柱上的甲胺磷，收集洗脱液刻度离心管中，收集到的洗脱液于40 50°C水浴中氮吹至与所加的黄酒相同体积，所得样液备用，供气相色谱-火焰光度检测器测定；(2)基质匹配标准工作溶液的配制取不含甲胺磷的阴性黄酒样品，按步骤(1)操作的提取和净化步骤，获取不含甲胺磷的空白样品基质；使用乙酸乙酯稀释甲胺磷标准溶液储备液至所需的浓度，配制若干不同浓度的标准工作溶液；取空白样品基质，氮气吹干后加入同体积的标准工作溶液，涡旋混勻后得同样浓度的基质匹配标准工作溶液；(3)气相色谱定性筛选和定量采用基质匹配标准工作溶液外标法定量，将步骤( 所配制的基质匹配标准工作溶液按浓度从低到高依次注入气相色谱测定，以峰面积对浓度绘制标准曲线，基质匹配标准工作溶液中甲胺磷响应值应在仪器检测线性范围内，线性下限应低于定量检测限10μ g/L ；将步骤(1)所获得的样液注入气相色谱测定，以标准曲线计算所含的甲胺磷含量；样液中甲胺磷响应值应在仪器检测线性范围内，若响应值超出上限，则需要将样液用乙酸乙酯稀释后再重新注入气相色谱测定；若响应值低于下限，则直接给出定性检测结果 “< 10yg/L"；(4)液相色谱-串联质谱定性确证当进行气相色谱测定时，若检出试样中甲胺磷的含量大于方法定量检测限lOyg/L 时，取一定体积的经步骤C3)中气相色谱测定后的样液，在40°C 50°C水浴中氮吹干后，用初始比例的流动相-10%甲醇/90%水定容至相同体积，过0. 22 μ m滤膜后供液相色谱-串联质谱定性确证；在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准物质中对应的保留时间一致，且样品组分中各定性离子的相对丰度与浓度相近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过下述最大允许偏差的规定相对离子丰度>50 > 20 50 > 10 20 ^ 10允许的相对偏差士 20 士 25士 30士 50则被确证的样品可判定为阳性检出，并去下一步骤获取定量结果。若偏差超过上述规定，则样品可判定为阴性检出；(5)空白试验使用纯水代替黄酒加到固相萃取小柱上，其余操作相同，按照上述步骤(1) (4)进行；按式⑴计算空白值，记为)(。，
2.如权利要求1所述的黄酒中甲胺磷的测定方法，其特征在于所述的固相萃取小柱为极性双官能团改性的聚苯乙烯-二乙烯基苯吸附树脂为填料的固相萃取小柱。
3.如权利要求2所述的黄酒中甲胺磷的测定方法，其特征在于所述的固相萃取小柱为德国丽公司的商品名为fesy的小柱，规格500mg/3mL。
4.如权利要求1所述的黄酒中甲胺磷的测定方法，其特征在于所述的黄酒样品的用量为0. 2 lmL。
5.如权利要求1所述的黄酒中甲胺磷的测定方法，其特征在于所述的水浴温度为 45 °C。
全文摘要
本发明公开了一种黄酒中甲胺磷的测定方法，利用气相色谱法及液相色谱-串联质谱法测定黄酒中甲胺磷含量的检测方法，包括(1)提取和净化利用固相萃取小柱提取黄酒中的甲胺磷，使用乙酸乙酯洗脱吸附在固相萃取小柱上的甲胺磷；(2)基质匹配标准工作溶液的配制；(3)气相色谱定性筛选和定量；(4)阳性样品使用液相色谱-串联质谱定性确证；(5)空白试验；(6)计算结果和表述。本发明方法前处理操作简便易行，甲胺磷回收率高，基质匹配标准工作溶液的采用解决了甲胺磷在气相色谱上的“基质效应”问题和准确定量问题。
文档编号G01N30/88GK102156177SQ20111012643
公开日2011年8月17日 申请日期2011年5月17日 优先权日2011年5月17日
发明者宋伟华, 胡贝贞, 董文洪, 陶兴耀 申请人:中华人民共和国绍兴出入境检验检疫局