专利名称：红景天注射液多糖含量测定方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的质量方法，具体是红景天注射液多糖含量测定方法。
背景技术：
在已有技术中，大株红景天注射液是通化玉圣药业股份有限公司独家生产的专利产品，国药准字Z20060361。性状本品为淡黄色至棕黄色的澄明液体。成份大株红景天。适应症状活血化瘀。冠心病稳定型劳累性心绞痛。症见胸部刺痛，绞痛，固定不移，痛引肩背及臂内侧，胸闷，心悸不宁，唇舌紫暗，脉细涩。用法用量静脉滴注。一次IOml加入250ml氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液中，一日一次，10天为一疗程。制备方法取大株红景天1670g，加水煎煮三次，每次加水6倍，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 15 I. 20 (50°C)的清膏，加乙醇使含醇量达70%，搅 匀，冷藏24小时(5 10°C )，滤过，沉淀以5 10°C的少量70%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至相对密度为I. 15 I. 20 (500C )的清膏，再加乙醇使含醇量达85%，搅匀，冷藏24小时(5 10°C )，滤过，沉淀以5 10°C的少量85%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，调pH值至8.0，冷藏12小时(5 10°C)，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为
I.20 I. 30 (50°C)的清膏，加入注射用水1000ml，冷藏12小时(5 10°C)，滤过，滤液调pH值至7. 0，加热煮沸30分钟，冷藏72小时(5 10°C )，滤过，滤液以截留分子量为10000的超滤柱超滤，超滤液浓缩，冷冻干燥得干粉，加注射液用水配制成1000ml，微孔滤膜过滤，灌封，灭菌，即得。原质量标准中多糖的含量测定，采用硫酸苯酚显色后，用紫外-可见分光光度法测定，该法操作繁琐、费时，且不易得到平行的结果，而且加样回收率只能达到30%左右，故对原标准中多糖的含量测定进行了修订。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种提高检查效果的红景天注射液多糖含量测定方法。本发明的技术解决方案是红景天注射液多糖含量测定方法，步骤如下
Cl)对照品溶液的制备精密称取经105°c干燥至恒重的D-无水葡萄糖24. 74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
(2)供试品溶液的制备精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。(3)标准曲线的制备:精密量取对照品溶液0、0. 3,0. 4,0. 5,0. 6,0. 7,0. 8ml，分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5- 二硝基水杨酸试液I. 5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法，在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；(4)供试品溶液的测定精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液IOml,置沸水浴中加热30分钟,取出，冷却后加酹酞指示液I滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液O. lmol/L,使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取该溶液和校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，精密加水1ml，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5_ 二硝基水杨酸试液I. 5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得；本品每Iml含多糖以D-无水葡萄糖(C6HltlO6)计，彡6. Omg0本发明的优点是1、本方法操做简便、快速、灵敏度高、杂质干扰小，检测结果准确、重现性、回收率、加样回收率、稳定性较好。2、此法中色素等还原物质与3，5-二硝基水杨酸显色，采用水解前测定值校正水解后测定值的方法，简便有效的排除了色素等杂质的干扰。下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
图I是多糖标准曲线图。图2是供试品中多糖紫外扫描图。图3是葡萄糖对照品紫外扫描图。
具体实施例方式红景天注射液多糖含量测定方法，其步骤如下
I方法
1.I 仪器与试药υν-2550紫外可见分光光度计；D-无水葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号110833— 200503。通化玉圣药业有限公司提供样品，批号20080401、20080402、20080702、20090901，试药均为分析纯。I. 2 对照品溶液的制备精密称取经105°C干燥至恒重的D-无水葡萄糖约24. 74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml中含无水葡萄lmg)。I. 3供试品溶液的制备精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。I. 4校正液的制备精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加水10ml，加酚酞指示液I滴，滴加滴加氢氧化钠溶液(O. lmol/L)使呈粉红色，加水稀释至刻度，摇匀，即得。2方法学考察
2.I 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0、0. 3,0. 4,0. 5,0. 6,0. 7,0. 8ml，分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5- 二硝基水杨酸试液I. 5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录V A)，在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果见表I (参见图I)。表I多糖标准曲线数据
权利要求
1.一种红景天注射液多糖含量测定方法，其特征在于步骤如下 (1)对照品溶液的制备精密称取经105°c干燥至恒重的D-无水葡萄糖24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得； (2)供试品溶液的制备精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得； (3)标准曲线的制备精密量取对照品溶液0、0.3,0. 4,0. 5,0. 6,0. 7,0. 8ml,分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5- 二硝基水杨酸试液I. 5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法，在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线； (4)供试品溶液的测定精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液IOml,置沸水浴中加热30分钟,取出，冷却后加酹酞指示液I滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液O. lmol/L,使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取该溶液和校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，精密加水1ml，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5_ 二硝基水杨酸试液I. 5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得；本品每Iml含多糖以D-无水葡萄糖(C6HltlO6)计，彡6. Omg0
全文摘要
本发明涉及一种中药制剂的质量方法，具体是红景天注射液多糖含量测定方法。其步骤如下(1)对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；(2)供试品溶液的制备精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。(3)标准曲线的制备。(4)供试品溶液的测定本品每1ml含多糖以D-无水葡萄糖(C6H10O6)计，≥6.0mg。具有结果准确，重现性、回收率、加样回收率、稳定性较好的特点。
文档编号G01N21/31GK102809542SQ20121020214
公开日2012年12月5日 申请日期2012年6月19日 优先权日2012年6月19日
发明者曹明光, 王仁久, 刘淑丽 申请人:通化玉圣药业股份有限公司