一种谷物蛋白质的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种谷物蛋白质的测定方法，具体通过以下步骤实现：将一定量的谷物样品置于50ml消化管中，采用浓H2SO4-H2O2于远红外消煮炉中消煮至溶液呈清亮色，将消煮液转移至100ml容量瓶中，过滤，滤液采用纳氏比色法测定。本方法测量精度高，操作简便，可适用于多类谷物蛋白质含量的检测。
【专利说明】一种谷物蛋白质的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种谷物蛋白质的测定方法。
【背景技术】
[0002]蛋白质是决定谷物食用品质的一个重要指标，目前常用的国家标准方法采用浓H2SO4—催化剂消煮，凯氏定氮法测定。但该方法存在以下不足:浓H2SO4—催化剂消煮和凯氏定氮这两个过程耗时费时间均较长，操作繁琐，消煮催化剂用量多。在生产和科研中，为完成大批样品的测定，需要采用快速、简易的分析方法。目前，文献报道中有许多谷物蛋白质的快速测定方法，例如双缩脲比色法、染料结合法、水合茚三酮法。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于克服目前国家标准方法中的不足，再为谷物蛋白质的测定提供一种比较准确、快速、易于操作的方法。本发明采用浓H2SO4-H2O2消煮，用浓H2SO4和H2O2将谷物中碳水化合物转化为二氧化碳和水，将蛋白质中的氮转化为铵态氮，消煮液中的铵态氮用纳氏比色法测定。与国家标准方法相比，本方法具有以下优点:(I)国家标准方法中，采用浓H2SO4—催化剂消煮，催化剂用量较多，本方法无需用催化剂，从而降低了分析成本，同时消煮时间可缩短1/3。(2)在大批样品的测定中，国家标准方法中，凯氏定氮法耗时较长，用水量较多，纳氏比色法不但节约了时间，还节约了成本。
[0004]本发明的技术方案为:
[0005]一种谷物蛋白质含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤:
[0006](I)称取0.1000-0.3000g的水稻样品置于50ml消化管中，加5ml浓H2SO4,置于远红外消煮炉中，于80-100°C加热，待浓H2SO4分解冒白烟升高温度，直至溶液转为棕黑色；
[0007](2)取下冷却I 一 5分钟，滴加300g/L H2025 一 10滴，摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min，取下冷却I 一 5分钟，滴加300g/L H2025 一 10滴摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min,如此反复直至消煮液呈无色或清亮色后，再加热5_10min，即消煮完毕，将消煮液转移至10ml容量瓶中，定容后过滤；
[0008](3)配制标准曲线:分别吸取10ug/ml氮(ΝΗ:_Ν)标准溶液0.0,0.5,1.0,2.0、
4.0、6.0、8.0、10ml于50ml比色管中，加Iml的500g/L酒石酸钾钠溶液，摇匀后再加入1ml纳氏试剂，摇匀；放置1min,在波长420nm处比色；以吸光度为为横坐标,相应的氮含量(ug)为纵坐标,绘制标准曲线；
[0009](4)准确吸取Iml滤液于50ml比色管中，加适量水，用NaOH溶液调至中性，加Iml500g/L酒石酸钾钠溶液，再加Iml纳氏试剂，定容后摇匀，1min后于420nm比色；谷物蛋白质的计算公式为:
[0010]
【权利要求】
1.一种谷物蛋白质含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)称取0.1000-0.3000g的水稻样品置于50ml消化管中，加5ml浓H2SO4，置于远红外消煮炉中，于80-100°C加热，待浓H2SO4分解冒白烟升高温度，直至溶液转为棕黑色； (2)取下冷却I— 5分钟，滴加300g/L H2025 — 10滴，摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min，再取下冷却I 一 5分钟，滴加300g/L H2025 一 10滴摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min,如此反复直至消煮液呈无色或清亮色后，再加热5_10min，即消煮完毕，将消煮液转移至10ml容量瓶中，定容后过滤； (3)配制标准曲线:分别吸取10ug/ml氮(NH:-N)标准溶液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、1ml于50ml比色管中，加Iml的500g/L酒石酸钾钠溶液，摇匀后再加入Iml纳氏试剂，摇勻；放置1min,在波长420nm处比色；以吸光度为为横坐标,相应的氮含量(Ug)为纵坐标，绘制标准曲线； (4)准确吸取Iml滤液于50ml比色管中，加适量水，用NaOH溶液调至中性，加Iml500g/L酒石酸钾钠溶液，再加Iml纳氏试剂，定容后摇匀，1min后于420nm比色；谷物蛋白质的计算公式为:蛋白质含量(0Zo)-^xtsx10 xkxlOO
m 式中: P—从标准曲线查得显色液N的含量(Ug)； ts—分取倍数，消煮液定容体积(ml)/吸取消煮液体积(ml)； k一氮换算成蛋白质的系数，水稻系数为5.95，玉米系数为6.25，燕麦系数为5.83 ； m—样品质量(g)。
2.根据权利要求1所述一种谷物蛋白质的测定方法，其特征在于:采用浓H2S04-H202消煮，H202的加入方式为取下冷却I 一 5分钟后，逐滴加入300g/L H20210滴，摇匀，再加热lOmin，取下冷却I 一 5分钟后，再加H2025-10滴，如此反复2_3次，直至消煮液呈无色或清亮色。
3.根据权利要求1所述一种谷物蛋白质的测定方法，其特征在于:滴加H202应直接滴入瓶底。
【文档编号】G01N21/31GK104165886SQ201410376482
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年8月1日 优先权日:2014年8月1日
【发明者】蔚霞, 王仁宗, 刘裕, 王瑞 申请人:湖北富邦科技股份有限公司