甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，包括衬垫(7)、样品垫(1)、玻璃纤维垫(2)、层析膜(5)和吸收垫(6)；所述样品垫(1)、玻璃纤维垫(2)、层析膜(5)和吸收垫(6)以水平方向顺序相接并固定在所述衬垫(7)上；并且所述玻璃纤维垫(2)上喷涂有带标记的彩色胶乳颗粒；所述层析膜(5)上设置第一检测线（31）、第二检测线（32）和对照线(4)；所述第一检测线（31）由甲型肝炎病毒抗原构成，所述第二检测线（32）由乙型肝炎病毒抗原构成。这种检测卡通过一次操作过程即可联合检测甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体，从而简化了操作过程，实现了快速检测的目的。
【专利说明】甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡
【技术领域】
[0001] 本实用新型属于免疫检测【技术领域】，特别涉及一种甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体 联合检测卡。
【背景技术】
[0002] 病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的以肝炎损害为主的全身性急性或者持续性 传染病，在世界各地均有流行。我国大部分地区属于甲肝高流行区域，每年疫情报告超过 百万例，绝大多数为学龄前儿童。随着近年来经济的发展和卫生条件的改善，甲肝流行出现 了发病年龄上移，病情严重，病死率增加的特点。乙肝是世界性的公共卫生问题，我国属于 乙肝高流行区，人群携带率高。疫苗的使用，有效地降低了甲型、乙型肝炎的发生率。
[0003] 甲乙肝炎联合疫苗是甲、乙型肝炎双重特异性保护性能，同时预防这两种疾病。
[0004] 目前，市场上已有针对单一的甲型肝炎病毒IgG抗体或乙型肝炎病毒IgG抗体的 诊断试剂盒，能够分别诊断这两种IgG抗体。但使用这类单一抗体检测试剂盒，检测甲乙肝 联合疫苗后的IgG抗体，需要购买不同试剂盒分别进行检测，操作复杂，耗时长，耗费大。因 此，虽然单独检测甲型肝炎病毒IgG抗体和乙型肝炎病毒IgG抗体后，再综合分析检测结果 对诊断结果并无影响，但是操作过程繁琐，检测不够方便快捷。 实用新型内容
[0005] 本实用新型所要解决的技术问题是提供甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测 卡。这种检测卡通过一次操作过程即可联合检测甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体，从而简化了 操作过程，实现了快速检测的目的。
[0006] 本实用新型解决上述技术问题所采用的技术方案是：甲型、乙型肝炎病毒IgG抗 体联合检测卡，包括衬垫、样品垫、玻璃纤维垫、层析膜和吸收垫；所述样品垫、玻璃纤维垫、 层析膜和吸收垫以水平方向顺序相接并固定在所述衬垫上；并且所述玻璃纤维垫上喷涂有 带标记的彩色胶乳颗粒；所述层析膜上设置第一检测线、第二检测线和对照线；所述第一 检测线由甲型肝炎病毒抗原构成，所述第二检测线由乙型肝炎病毒抗原构成。
[0007] 所述第一检测线、第二检测线和对照线沿着样品垫到吸收垫的方向依次排列。
[0008] 上述技术方案中，所述样品垫和吸收垫均采用具有吸水性能的材料制备而成，可 以均为市售的滤纸制成，优选吸水性能较强的定性滤纸，这样利于检测，增加检测速度。所 述层析膜为市售硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜又称NC膜，在胶体金试纸中用做C/T线的承 载体，同时也是免疫反应的发生处。米用的硝酸纤维素膜型号135s、170s或180s (以秒为 单位的定义：每4cm膜，水的层析时间是多少秒)。玻璃纤维垫是玻璃纤维制品的一种。玻 璃纤维是一种性能优异的无机非金属材料。英文原名为Glassfiber，成分为二氧化硅、氧 化铝、氧化钙、氧化硼、氧化镁、氧化钠等。它是以玻璃球或废旧玻璃为原料经高温熔制、拉 丝、络纱、织布等工艺，最后形成各类产品，玻璃纤维单丝直径从几个微米到二十几个微米， 相当于一根头发丝的1/20-1/50,每束纤维原丝都有数百根甚至上千根单丝组成，通常作为 复材料中的增强材料、电绝缘材料和绝热保温材料，电路基板等，广泛用于国民经济各个领 域。
[0009] 所述玻璃纤维垫上均匀喷涂有带标记的彩色胶乳颗粒，彩色胶乳颗粒一般采用红 色的胶乳颗粒，这样显色明显；胶乳颗粒上进行标记的方法在本领域为常规技术手段，发明 人在此不做赘述。彩色胶乳颗粒带的标记可以与人血清中的IgG抗体结合，检测线上是抗 原。
[0010] 作为优选，所述玻璃纤维垫为喷涂有带金黄色葡萄球菌A蛋白（Staphylococal Protein A，SPA)标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫。金黄色葡萄球菌A蛋白是一种从金黄 色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。由于SPA能与人、鼠、兔等的IgG的Fc端结合，成为免疫 学上一种极为有用的工具。所述对照线是将SPA固定在层析膜上形成的对照线。所述对照 线与标记物对应。
[0011] 作为优选，所述玻璃纤维垫为喷涂有带鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗 粒的玻璃纤维垫。鼠抗人IgG单克隆抗体是一种较好的标记物。所述对照线是将羊抗鼠 IgG抗体固定在层析膜上形成的对照线。羊抗鼠IgG抗体又称羊抗鼠IgG多克隆抗体。羊 抗鼠IgG (免疫球蛋白）多克隆抗体在胶体金法快速抗体诊断产品中用来固定于硝酸纤维 素膜上，与胶体金标记的单克隆抗体发生特异性免疫反应并显示一定的颜色，形成对照线 进行免疫诊断。
[0012] 进一步地，所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，，还包括壳体，所述衬 垫置于壳体内；所述壳体的顶部对应于层析膜的位置设有观察窗，对应于样品垫的位置设 有加样孔。
[0013] 所述壳体为硬质塑料。
[0014] 所述观察窗为方形孔或者透明片。
[0015] 本实用新型的检测原理是：本实用新型的检测是在层析作用的推动下完成的。当 血清样品被添加至样品垫上后，通过层析作用到达玻璃纤维垫，血清样品中的IgG抗体与 标记的彩色胶乳颗粒结合形成结合颗粒，然后进一步至层析膜上，在层析膜的层析作用下， 结合颗粒向前移动，如血清中含有甲型肝炎病毒IgG抗体和乙型肝炎病毒IgG抗体时（即 接种甲肝、乙肝联合疫苗后应产生此两种抗体)，与相应2条检测线结合，呈现颗粒的颜色线 条，未结合的颗粒会继续向前移动，与对照线结合呈现颗粒的颜色线条，即显示检测线和对 照线颜色线；如血清中不含有这几种抗体时，颗粒与相应的检测线的抗原无法结合，检测线 不显色，为结合的颗粒会继续向前移动，与对照线结合呈现颗粒的颜色线条，即只显示对照 线一条颜色线。
[0016] 因膜层析速度较快，几分钟内带标记彩色胶乳颗粒即可移动完整个层析膜条，立 刻可以判读结果，如第一检测线和对照线均显色，甲型肝炎病毒IgG抗体为阳性；如第二检 测线和对照线均显色，血清乙型肝炎病毒IgG抗体为阳性。只有对照线一条线显色，血清抗 体为阴性。
[0017] 综上所述，本实用新型的有益效果是：
[0018] (1)本实用新型检测卡通过一次操作过程即可联合检测甲型肝炎病毒IgG抗体和 乙型肝炎病毒IgG抗体，从而简化了操作过程，实现了快速检测的目的；并且特异性强，灵 敏度高。
[0019] (2)本实用新型使用时，只需将待检样品用生理盐水1:1稀释，直接加到本实用新 型加样孔处的样品垫上即可，操作十分简便；样品加到本实用新型样品垫上，10分钟通过 观察窗肉眼即可观测检测结果，进行判定，整个检测耗时约15分钟，耗时短。
【专利附图】
【附图说明】
[0020] 图1是实施例1的俯视图；
[0021] 图2是实施例1的剖视图。
[0022] 图3是实施例5的结构示意图。
[0023] 图中标记相对应的部件名称是：1_样品垫，2-玻璃纤维垫，31-第一检测线，32-第 二检测线，4-对照线，5-层析膜，6-吸收垫，7-衬垫，8-壳体，9-观察窗，10-加样孔。
【具体实施方式】
[0024] 下面通过具体实施例，并结合附图，对本实用新型的技术方案作进一步的具体说 明。
[0025] 实施例1
[0026] 如图1和2所示，甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，包括衬垫7、样品垫1 (滤纸，上海金标生物技术有限公司）、玻璃纤维垫2(Ahlstrom8964玻纤，上海杰一生物技术 有限公司，型号JY-J101)、层析膜5 (硝酸纤维素膜，Millipore公司，型号135s)和吸收垫 6 (滤纸，上海金标生物技术有限公司）。样品垫1、玻璃纤维垫2、层析膜5和吸收垫6以水 平方向顺序相接并固定在所述衬垫7上。
[0027] 所述玻璃纤维垫2为均匀喷涂有带SPA标记的红色胶乳颗粒(红色聚苯乙烯胶乳 颗粒，上海杰一生物技术有限公司，型号PSR030N)的玻璃纤维垫，胶乳颗粒进行标记的方法 为本领域公知技术，在此不作赘述。
[0028] 所述层析膜5上设置第一检测线31、第二检测线32和对照线4。所述第一检测线 31、第二检测线32和对照线4在层析膜上沿着从样品垫1到吸收垫6的方向依次排列设 置。第一检测线31是将灭活的纯化甲型肝炎病毒抗原固定在层析膜5上形成，第二检测线 32是将灭活的纯化乙型肝炎病毒抗原固定在层析膜5上形成。
[0029] 对照线4是将SPA (市售，郑州百基生物技术有限公司）固定在层析膜5上形成。
[0030] 本实用新型中，所述样品垫1、玻璃纤维垫2、层析膜5和吸收垫6以水平方向顺序 相接。具体地，所述样品垫1、玻璃纤维垫2、层析膜5和吸收垫6顺序相接的方式是部分重 叠的，即：样品垫1的尾端搭接在玻璃纤维垫2上，玻璃纤维垫2的尾端搭接在层析膜5的 首端上，吸收垫6的首端搭接在层析膜5的尾端上。
[0031] 实施例2
[0032] 本实施例与实施例1基本相同，其不同部分仅在于：所述玻璃纤维垫2为均匀喷涂 有带鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫，所述对照线4为将羊抗鼠 IgG抗体固定在层析膜5上形成。
[0033] 实施例3
[0034] 本实施例与实施例1基本相同，其不同部分仅在于：所述样品垫1、玻璃纤维垫2、 层析膜5和吸收垫6的顺序相接的方式是首尾连接并且没有重叠的。
[0035] 实施例4
[0036] 本实施例与实施例3基本相同，其不同部分仅在于：所述玻璃纤维垫2为喷涂有带 鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫，所述对照线4为将羊抗鼠 IgG 抗体固定在层析膜5上形成。
[0037] 实施例5
[0038] 如图3所示，本实施例与实施例1基本相同，其不同部分仅在于：本实用新型还包 括壳体8,所述衬垫7、样品垫1、玻璃纤维垫2、层析膜5和吸收垫6均置于壳体8内，所述 壳体8的顶部对应于层析膜5的位置设有观察窗9,对应于样品垫1的位置设有加样孔10。 并且所述壳体为硬质塑料，所述观察窗为方形孔或者透明片。使用时通过加样孔10将样品 加到样品垫1上。
[0039] 以上所述的实施例只是本实用新型的一种较佳的实施方案，并非对本实用新型任 何形式上的限制，在不超过权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体以及改 型。
【权利要求】
1. 甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，包括衬垫（7)、样品垫（1)、玻 璃纤维垫（2)、层析膜（5)和吸收垫（6);所述样品垫（1)、玻璃纤维垫（2)、层析膜（5)和吸 收垫￠)以水平方向顺序相接并固定在所述衬垫（7)上；并且所述玻璃纤维垫（2)上喷涂 有带标记的彩色胶乳颗粒；所述层析膜（5)上设置第一检测线（31)、第二检测线（32)和对 照线（4);所述第一检测线（31)由甲型肝炎病毒抗原构成，所述第二检测线（32)由乙型肝 炎病毒抗原构成。
2. 根据权利要求1所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，所述 第一检测线（31)、第二检测线（32)和对照线（4)沿着样品垫（1)到吸收垫（6)的方向依次 排列。
3. 根据权利要求2所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，所述 玻璃纤维垫（2)为喷涂有带SPA标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫（2)，所述对照线（4)为 SPA固定在层析膜（5)上形成的对照线。
4. 根据权利要求2所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，所述 玻璃纤维垫（2)为喷涂有带鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫（2)， 所述对照线（4)为羊抗鼠 IgG抗体固定在层析膜（5)上形成的对照线（4)。
5. 根据权利要求2所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，还包 括壳体（8)，所述衬垫（7)置于壳体（8)内；所述壳体（8)的顶部对应于层析膜（5)的位置 设有观察窗（9)，对应于样品垫（1)的位置设有加样孔（10)。
6. 根据权利要求5所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，所述 壳体（8)为硬质塑料。
7. 根据权利要求6所述的甲型、乙型肝炎病毒IgG抗体联合检测卡，其特征在于，所述 观察窗（9)为方形孔或者透明片。
【文档编号】G01N33/577GK203870109SQ201420181380
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年4月15日 优先权日:2014年4月15日
【发明者】范亚民 申请人:宁波天润生物药业有限公司