本发明涉及视网膜表面膜的电镜标本制备方法。
背景技术：
病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,其不仅组织薄, 而且非常软, 手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起, 须飘浮在液体表面才能展开。视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次，不能很好地观察表面膜组织中各种细胞形态及它们相互之间的关系。
技术实现要素：
本发明提出一种视网膜表面膜的电镜标本制备方法。
一种视网膜表面膜的电镜标本制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：
（1）取人或者动物脱落网膜，泡入用2%多聚甲醛、0.5%戊二醛、0.2mol/L二甲砷酸钠缓冲液配制的混合液中，将pH值调节至7.4，固定4h，然后用0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗数次；
（2）然后将1滴浓度为22%的白蛋白滴在清洁载玻片上,用解剖针或牙签轻轻地把视网膜表面膜捞入白蛋白中,让它自然铺展,再取3%戊二醛2-3滴，滴于白蛋白上, 微波高火力固定5s ,室温放置2 min, 使白蛋白和戊二醛固定凝成块状，在微波固定时, 在标本周围加适量冷水, 使温度低于35摄氏度；
（3）用双面刀片从底部刮下, 修掉没有组织的部分, 再用0.1-0.5mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗后经1%锇酸后固定1-5h；
（4）逐级酒精脱水, 用多角孔的平板把标本块竖立包埋, 切厚片定位,超薄切片,利用铀-铅染色后既得。
优选地，所述微波设备的功率为800W,245 MHz。
优选地，所述步骤（3）中二甲砷酸钠缓冲液为0.1mol/L，锇酸后固定2h。
本发明所述方法制备的视网膜表面膜的电镜标本，表面膜标本展平，方法简单、方便易于操作，稳定可靠。
具体实施方式
实施例1。
一种视网膜表面膜的电镜标本制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：
（1）取人或者动物脱落网膜，泡入用2%多聚甲醛、0.5%戊二醛、0.2mol/L二甲砷酸钠缓冲液配制的混合液中，将pH值调节至7.4，固定4h，然后用0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗数次；
（2）然后将1滴浓度为22%的白蛋白滴在清洁载玻片上,用解剖针或牙签轻轻地把视网膜表面膜捞入白蛋白中,让它自然铺展,再取3%戊二醛2-3滴，滴于白蛋白上, 微波高火力固定5s ,室温放置2 min, 使白蛋白和戊二醛固定凝成块状，在微波固定时, 在标本周围加适量冷水, 使温度低于35摄氏度；
（3）用双面刀片从底部刮下, 修掉没有组织的部分, 再用0.1-0.5mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗后经1%锇酸后固定1-5h；
（4）逐级酒精脱水, 用多角孔的平板把标本块竖立包埋, 切厚片定位,超薄切片,利用铀-铅染色后既得。
实施例2。
一种视网膜表面膜的电镜标本制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：
（1）取人或者动物脱落网膜，泡入用2%多聚甲醛、0.5%戊二醛、0.2mol/L二甲砷酸钠缓冲液配制的混合液中，将pH值调节至7.4，固定4h，然后用0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗数次；
（2）然后将1滴浓度为22%的白蛋白滴在清洁载玻片上,用解剖针或牙签轻轻地把视网膜表面膜捞入白蛋白中,让它自然铺展,再取3%戊二醛2-3滴，滴于白蛋白上, 微波高火力固定5s ,室温放置2 min, 使白蛋白和戊二醛固定凝成块状，在微波固定时, 在标本周围加适量冷水, 使温度低于35摄氏度；
（3）用双面刀片从底部刮下, 修掉没有组织的部分, 再用0.1-0.5mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗后经1%锇酸后固定1-5h；
（4）逐级酒精脱水, 用多角孔的平板把标本块竖立包埋, 切厚片定位,超薄切片,利用铀-铅染色后既得。
（5）所述微波设备的功率为800W,245 MHz。
实施例3。
一种视网膜表面膜的电镜标本制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：
（1）取人或者动物脱落网膜，泡入用2%多聚甲醛、0.5%戊二醛、0.2mol/L二甲砷酸钠缓冲液配制的混合液中，将pH值调节至7.4，固定4h，然后用0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗数次；
（2）然后将1滴浓度为22%的白蛋白滴在清洁载玻片上,用解剖针或牙签轻轻地把视网膜表面膜捞入白蛋白中,让它自然铺展,再取3%戊二醛2-3滴，滴于白蛋白上, 微波高火力固定5s ,室温放置2 min, 使白蛋白和戊二醛固定凝成块状，在微波固定时, 在标本周围加适量冷水, 使温度低于35摄氏度；
（3）用双面刀片从底部刮下, 修掉没有组织的部分, 再用0.1-0.5mol/L二甲砷酸钠缓冲液漂洗后经1%锇酸后固定1-5h；
（4）逐级酒精脱水, 用多角孔的平板把标本块竖立包埋, 切厚片定位,超薄切片,利用铀-铅染色后既得。
（5）所述步骤（3）中二甲砷酸钠缓冲液为0.1mol/L，锇酸后固定2h。