SP8蛋白及其应用、SP8蛋白抗体的制备方法、应用及杂交瘤细胞与流程

文档序号:12454153阅读:来源:国知局

技术特征:

1.SP8蛋白作为标志物在制备男性不育检测试剂盒中的应用,其特征在于,所述SP8蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.SP8蛋白抗体在制备男性不育检测试剂盒中的应用,其特征在于,所述SP8蛋白抗体与所述SP8蛋白具有抗原抗体反应,所述SP8蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

3.一种男性不育检测试剂盒,其特征在于,所述男性不育检测试剂盒是胶体金试剂盒或酶联免疫试剂盒,所述胶体金试剂盒和所述酶联免疫试剂盒均包括所述SP8蛋白抗体,所述SP8蛋白抗体与所述SP8蛋白具有抗原抗体反应,所述SP8蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

4.根据权利要求3所述的男性不育检测试剂盒,其特征在于,所述胶体金试剂盒包括试纸条,所述SP8蛋白抗体包被于所述试纸条的检测线。

5.一种SP8蛋白抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

蛋白表达步骤:将重组载体转化表达菌株表达得到所述SP8蛋白,所述重组载体包括有能表达所述SP8蛋白的Sp8基因,所述SP8蛋白的氨基酸序列为如SEQ ID No.1所示;

细胞融合步骤:用所述SP8蛋白免疫第一宿主动物,研磨经免疫后的所述第一宿主动物的脾脏,得到脾细胞,将所述脾细胞与骨髓瘤细胞融合,得到融合的杂交瘤细胞,所述第一宿主动物是小鼠;

抗体制备步骤:将所述杂交瘤细胞注射第二宿主动物腹腔,7-10天后,取所述第二宿主动物的腹水,纯化所述腹水得到所述SP8蛋白抗体。

6.根据权利要求5所述SP8蛋白抗体的制备方法,其特征在于,所述Sp8基因的碱基序列如SEQ ID No.2所示。

7.根据权利要求5所述SP8蛋白抗体的制备方法,其特征在于,所述表达菌株为大肠杆菌、酵母菌或农杆菌。

8.根据权利要求5所述SP8蛋白抗体的制备方法,其特征在于,用所述SP8蛋白免疫所述第一宿主动物是指:将所述SP8蛋白、弗氏佐剂和YOULONG佐剂按照1.8-2.2:0.8-1.1:0.8-1.2的体积比混合后,得到乳化液,将所述乳化液免疫所述第一宿主动物。

9.根据权利要求5所述SP8蛋白抗体的制备方法,其特征在于,所述第二宿主动物为小鼠或家兔或山羊。

10.一种用于产生SP8蛋白抗体的杂交瘤细胞,其特征在于,其保藏编号是CGMCC No.13284,所述杂交瘤细胞产生的所述SP8蛋白抗体与所述SP8蛋白具有抗原抗体反应,所述SP8蛋白的氨基酸序列为如SEQ ID No.1所示。

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