一种基于Au八面体等离子胶体的赭曲霉毒素A免疫传感器的构建的制作方法

文档序号:12611528阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于Au八面体等离子胶体的赭曲霉毒素A免疫传感器的构建,其特征在于,包括以下步骤:

(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净,将6 µL、1.0 ~ 1.6 mg mL-1 Au八面体分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;

(2)依次滴加6 µL、1~5 µg mL-1的赭曲霉毒素A抗体anti-OTA,3 µL、质量分数为0.5% ~ 2%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;

(3)滴加6 µL、10-4~100 ng mL-1的一系列不同浓度的赭曲霉毒素A到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;

(4)滴加6 µL的Au八面体等离子胶体Au opc负载甲苯胺蓝Tb的二抗标记物Au opc@Ab2@Tb溶液,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。

2.如权利要求1所述的一种基于Au八面体等离子胶体的赭曲霉毒素A免疫传感器的构建,所述的Au八面体分散液,其特征在于,制备步骤如下:

将20 mg mL-1、1.2 mL氯金酸及0.1~1.8 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下加热0.1~10 h,通过在14500 rpm下离心并用超纯水反复洗涤制得Au八面体。

3.如权利要求1所述的一种基于Au八面体等离子胶体的赭曲霉毒素A免疫传感器的构建的制备方法,所述的Au八面体等离子胶体负载甲苯胺蓝的二抗标记物Au opc@Ab2@Tb溶液,其特征在于,制备步骤如下:

(1)Au八面体等离子胶体的制备

将制得的Au八面体分散液用正丁醇溶液洗涤,然后通过超声重新分散在一定量的去离子水中,形成胶体悬浮液,再把1 mL正丁醇溶液加入到上述胶体悬浮液中,超声振荡0.2~5 h,通过界面自组装形成Au八面体等离子胶体,静置5~100 min,得到的沉淀即为Au八面体等离子胶体;

(2) Au八面体等离子胶体负载甲苯胺蓝的二抗标记物Au opc@Ab2@Tb溶液的制备

将0.5 mL、1.0 mg mL-1 Au八面体等离子胶体分散于1.0 mL超纯水中摇匀,并加入0.1 mL的赭曲霉毒素A抗体anti-OTA和甲苯胺蓝, 4 °C下振荡1~5 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au八面体等离子胶体负载甲苯胺蓝的二抗标记物Au opc@Ab2@Tb。

4.如权利要求1所述的一种基于Au八面体等离子胶体的赭曲霉毒素A免疫传感器的构建的制备方法,其特征在于,用于赭曲霉毒素A的检测,制备步骤如下:

(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为4~6 mmol L-1铁氰化钾和10-2~10 mmol L-1硝酸钾溶液中进行测试;

(2)用方波伏安法对赭曲霉毒素A标准溶液进行检测,其电压测试范围为-0.6V ~ 0.3V;

(3)当背景电流趋于稳定后,观察赭曲霉毒素A加入前后传感器的峰电流值,然后记录电流变化,绘制工作曲线。

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