本发明涉及分子印迹电化学传感器，尤其是一种甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备方法。
背景技术：
甲基多巴(alpha-methyldopa)，又名α-甲基多巴，化学名为2-氨基-3-(3,4-二羟基苯基)-2-甲基-丙酸。甲基多巴是一种抗高血压药。其主要是在中枢转化成甲基去甲肾上腺素。甲基去甲肾上腺素是一种很强的中枢α受体激动药。用于中、重度或恶性高血压，还有镇静、降低眼压作用。尤其适用于肾性高血压及肾功减退的高血压。但长期或过量使用此类药物会损害心血管系统、血液系统，另外还会有因肝、肾功能损害。
测定甲基多巴的方法有气相-质谱法、高效液相色谱梯度洗脱法及毛细管电泳法等。然而这些方法由于需要昂贵的仪器设备，存在成本高、耗时长、灵敏度不高等缺点。因此，研究一种高灵度的、简便的甲基多巴测定方法具有非常重要的意义。
分子印迹技术是以待测目标分子为模板分子，将具有结构上互补的功能性单体通过共价或非共价键与模板分子结合形成单体模板分子复合物，再加入交联剂使之与单体进行聚合反应形成模板分子聚合物，反应完成后通过物理或化学方法去除模板分子，得到分子印迹聚合物，在聚合物中形成与原印迹分子空间结构互补并且具有多重识别位点的空穴。目前的方法由于选取的功能单体与模板分子不能恰当地匹配，并且交联的刚性也较差，因此灵敏度不高。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供一种设备简单、制作简易的一种甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：以甲基多巴为模板分子、幼枝含断氧化马钱子苷为功能单体、偶氮二异丁腈为引发剂、纳米粘土为掺杂剂，以异去氢钩藤碱为交联剂制备。
上述一种甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备方法，以甲基多巴为模板分子、幼枝含断氧化马钱子苷为功能单体、偶氮二异丁腈为引发剂、以异去氢钩藤碱为交联剂、纳米粘土为掺杂剂，在直径2mm玻碳电极表面上形成一种杂化纳米粘土甲基多巴分子印迹聚合物薄膜，然后采用洗脱剂摩尔比3:1的乙酸和正己醇混合溶剂将模板分子洗脱，即得。
上述一种甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备方法，包括以下步骤：
<1>向10.0ml溶剂乙醇中，依次加入0.20mmol～1.5mmol模板分子甲基多巴、1.0mmol～7.0mmol功能单体幼枝含断氧化马钱子苷、3.0mmol交联剂异去氢钩藤碱、0.12mmol引发剂偶氮二异丁腈及0.0100g～0.0600g的纳米粘土，每加入一种化学试剂超声波溶解8分钟；
<2>取步骤<1>的混合物8μl涂于干净光滑的直径为2mm的玻碳电极表面上，放置6小时后，将修饰后的电极置于80℃的真空干燥箱内热聚合1.5小时，然后采用洗脱剂摩尔比为3:1的乙酸和正己醇混合溶剂将模板分子洗脱，即得。
研究发现，以甲基多巴为模板分子、幼枝含断氧化马钱子苷为功能单体、偶氮二异丁腈为引发剂、纳米粘土为掺杂剂，以异去氢钩藤碱为交联剂制备的甲基多巴分子印迹电化学传感器，可用于测定甲基多巴的含量。应用本发明建立测定甲基多巴的电化学分析方法，具有很优秀的灵敏度；甲基多巴的浓度在4.0×10-8~4.0×10-4mol/l范围内呈现良好的线性关系(线性相关系数为r=0.9998)，检出限(s/n=3)为4.6×10-9mol/l，因此，纳米粘土掺杂的甲基多巴分子印迹电化学传感器具有较高的灵敏度，超过目前的检测方法；并且设备简单、制作简易。
附图说明
图1是实施例1中一种甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备方法的工作曲线图。
具体实施方式
实施例1
一、玻碳电极的处理
将玻碳电极在抛光布上依次用1.0μm、0.3μm和0.05μm的氧化铝粉抛光，然后放入体积比为1:1的硝酸中超声8min，再放入无水乙醇中超声8min，最后用纯水超声清洗干净。
二、甲基多巴分子印迹电化学传感器的制备
<1>向10.0ml溶剂乙醇中，依次加入1.5mmol模板分子甲基多巴、3.5mmol功能单体幼枝含断氧化马钱子苷、3.0mmol交联剂异去氢钩藤碱、0.12mmol引发剂偶氮二异丁腈及0.0500g的纳米粘土，每加入一种化学试剂超声波溶解8分钟；
<2>取步骤<1>的混合物8μl涂于干净光滑的直径为2mm的玻碳电极表面上，放置6小时后，将修饰后的电极置于80℃的真空干燥箱内热聚合1.5小时，然后采用洗脱剂摩尔比为3:1的乙酸和正己醇混合溶剂将模板分子洗脱，通过磁力搅拌洗脱模板分子，直至洗脱液中检测不到模板分子，再用超纯水洗去印迹电极表面的溶剂，然后将印迹电极保存于超纯水中待用。
三、工作曲线的绘制及检出限的测定
用差分脉冲伏安法进行纳米粘土掺杂的甲基多巴分子印迹电极响应特性的实验，测定线性范围及检出限。将纳米粘土掺杂的甲基多巴分子印迹电极分别在不同浓度的甲基多巴溶液中培育6分钟（底液为5.0mmol/lk3[fe(cn)6]-0.5mol/lph=7.5的磷酸盐缓冲溶液溶液），然后进行差分脉冲伏安法测量。甲基多巴溶液浓度在4.0×10-8~4.0×10-4mol/l范围内呈现良好的线性关系；线性方程为ip(μa)=8.238с(μmol/l)+1.235，线性相关系数为r=0.9998，检出限(s/n=3)为4.6×10-9mol/l。
因此，该纳米粘土掺杂甲基多巴的分子印迹电极具有极高的灵敏度。