1.一种利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于包括下列步骤:
(1)待测样品粉碎后加入提取试剂,混匀;然后超声提取,离心,得到上清液;采用水饱和正己烷对上清液进行萃取,得到待净化液;
(2)MCX固相萃取柱活化后,取待净化液上样,用甲醇淋洗除杂,然后用体积分数为1~6%的氨化甲醇洗脱,收集洗脱液;浓缩,定容液溶解定容,过滤,得到净化液;
(3)采用超高效液相色谱-串联质谱仪对步骤(2)制得的净化液进行检测。
2.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的待测样品的用量为1~2g。
3.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的待测样品和提取试剂的质量体积比为(1~2):(10~30)。
4.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的提取试剂为体积比为(8~24):(2~6)的0.1%V/V甲酸水溶液和乙腈的混合物。
5.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的超声提取的条件为超声频率60~120Hz,提取10~30min。
6.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的上清液与水饱和正己烷的体积比为(8~20):20。
7.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的活化的具体操作为依次用5mL甲醇、5mL 0.05~0.3mol/mL盐酸溶液活化MCX固相萃取柱。
8.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的待净化液的上样量为步骤(1)中提取试剂体积的一半。
9.根据权利要求1所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(3)中所述的检测的条件为:
色谱条件:色谱柱Poroshell 120 EC-C18 2.1mm×100mm,2.7μm;柱温35℃;进样量10.0μL;流动相梯度洗脱程序如下所示:
质谱条件:电喷雾离子源;正离子模式;多反应监测;干燥气温度300℃,干燥气流速6L/min;毛细管电压4000V。
10.根据权利要求所述的利用液质联用快速检测万古霉素的方法,其特征在于:
步骤(3)中所述的检测的条件为:
其他质谱参数为:
万古霉素定量离子对725.4/144.2m/z,碰撞能10V,碎裂电压120V,驻留时间120ms,碰撞池加速电压3V;
万古霉素定性离子对1:725.4/1307m/z,碰撞能10V,碎裂电压120V,驻留时间120ms,碰撞池加速电压1V;
万古霉素定性离子对2:725.4/100m/z,碰撞能15V,碎裂电压120V,驻留时间120ms,碰撞池加速电压3V。