Ase-hplc测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法
【专利摘要】本发明提供了一种ASE?HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，旨在提供一种检测灵敏度，检测结果可靠，可重复性强的ASE?HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法；称取孢氨苄甲氧苄啶胶囊内容物1g置于10mL萃取池中，用2％甲酸水溶液对样品在温度60℃，静态提取3min，重复提取2次，提取完成后将提取液中溶剂蒸干，提取物转移至20ml的容量瓶中，用2％甲酸水溶液定容至20mL，吸取1mL于离心管中，漩涡2min，13000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法
技术领域
[0001 ]本发明提供一种孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，具体地说，ASE-HPLC测定 孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 头孢氨苄属第一代头孢菌素，其主要成分为头孢氨苄和甲氧苄啶，抗菌谱与头孢 噻吩相仿，但其抗菌活性较后者为差。除肠球菌属、甲氧西林耐药葡萄球菌外，肺炎链球菌、 溶血性链球菌、产或不产青霉素酶葡萄球菌的大部分菌株对本品敏感。本品对奈瑟菌属有 较好抗菌作用，但流感嗜血杆菌对本品的敏感性较差，本品对部分大肠埃希菌、奇异变形杆 菌、沙门菌和志贺菌都有一定抗菌作用。其余肠杆菌科细菌、不动杆菌，铜绿假单胞菌、脆弱 拟杆菌均对本品呈现耐药。梭杆菌属和韦容球菌一般对本品敏感，厌氧革兰阳性球菌对本 品中度敏感。甲氧苄啶属抑菌剂，其作用机制是干扰细菌的叶酸代谢。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种检测灵敏度，检测结果可靠，可重复性强的ASE-HPLC测 定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，依次包括了下述步骤：
[0006] 1)称取孢氨苄甲氧苄啶胶囊内容物lg置于10mL萃取池中，用2%甲酸水溶液对样 品在温度60°C，静态提取3min，重复提取2次，提取完成后将提取液中溶剂蒸干，提取物转移 至20ml的容量瓶中，用2%甲酸水溶液定容至20mL，吸取lmL于离心管中，漩涡2min，13000r/ min离心3min，取上清液进行高效液相分析；
[0007] 2)高效液相色谱法进行分析时参数设置如下：
[0008] 流动相：甲醇-水-乙腈，用甲酸调解pH值为4.0;
[0009] 流速:lml/min;
[0010] 柱温：35。(：；
[0011 ]色谱柱：米用规格为5tim，4.6mmX250mm的Phenomenex C18柱；
[0012]检测波长：272nm;
[0013]进样量：5ul;
[0014] 所述的流动相中甲醇_水-乙腈的体积比为40:40: 20~35:35:30;所述的流动相在 0分钟至3分钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比为40:40:20升至35:35:30;然后在3分钟至9 分钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60，再在9-12分钟内甲醇-水-乙腈的体 积比恒定在20:20:60。
[0015]进一步的，上述的一种ASE-HPLC测定萜烯树脂中有机溶剂残留量的方法，所述的 高效液相色谱仪为附带Corona Ultra电喷雾检测器的Thermo U3000高效液相色谱仪。 [0016]进一步的，上述的一种ASE-HPLC测定孢氨节甲氧节啶胶囊有效成分的方法，所述 的有效成分是头孢氨节和甲氧节啶。
[0017]进一步的，上述的一种ASE-HPLC测定孢氨节甲氧节啶胶囊有效成分的方法，所述 的石墨碳SPE柱。
[0018] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案建立了ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶 囊中的头孢氨苄和甲氧苄啶，快速完成对头孢氨苄和甲氧苄啶的分析测定，检测效率高，在 保证分离度的情况下，实现了有效的分析，定量准确，有利于控制产品的质量。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0020] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固体的均为质量浓度。
[0021] 实施例1
[0022] 一种ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，具体的说，是包括所述 的有效成分是头孢氨苄和甲氧苄啶，该方法依次包括了下述步骤：
[0023] 1)称取孢氨苄甲氧苄啶胶囊内容物lg置于10mL萃取池中，用2%甲酸水溶液对样 品在温度60°C，静态提取3min，重复提取2次，提取完成后将提取液中溶剂蒸干，提取物转移 至20ml的容量瓶中，用2%甲酸水溶液定容至20mL，吸取lmL于石墨碳SPE柱的离心管中，漩 祸2min，13000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析；
[0024] 2)高效液相色谱法进行分析时参数设置如下：
[0025]流动相：甲醇-水-乙腈，用甲酸调解pH值为4.0;
[0026] 流速：lml/min;
[0027] 柱温：35。(：；
[0028] 色谱柱：米用规格为5tim，4.6mmX250mm的Phenomenex C18柱；
[0029] 检测波长：272nm;
[0030]进样量:5ul;
[0031] 所述的流动相中甲醇_水-乙腈的体积比为40:40: 20~35:35:30;所述的流动相在 0分钟至3分钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比为40:40:20升至35:35:30;然后在3分钟至9 分钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60，再在9-12分钟内甲醇-水-乙腈的体 积比恒定在20:20:60。
[0032] 所述的高效液相色谱仪为附带Corona Ultra电喷雾检测器的Thermo U3000高效 液相色谱仪。
[0033]将上述检测结果与标准色谱进行对比，其检测结果基本一致。
[0034] 取同一批号的产品连续进样六次，其平均回收率为99.6 %，RSD为0.89 %。
[0035] 精密称定头孢氨苄对照品约100mg和甲氧苄啶约20mg置200ml容量瓶中，加2%甲 酸水溶液20ml溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取1、2、3、4、5、7、10、12、15ml上述溶液 置50ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。溶液浓度依次为头孢氨苄：10、20、30、40、50、70、100、 120呢/1111 ;甲氧苄啶:2、4、6、8、10、14、20、24、30耶/1111，同法操作检测，用外标法分别计算头 孢氨苄和甲氧苄啶的含量。
[0036]取三批不同生产厂家的孢氨苄甲氧苄啶胶囊，按照上述方法检测，其每粒头孢氨 苄和甲氧苄啶检测结果如下：
[0039] 从上述表中可以看出，其检测结果与药典一致。
[0040] Corona Ultra电喷雾检测器(CAD)技术的工作原理是将分析物转化成溶质颗粒。 颗粒的大小随着被分析物的含量而增加;溶质颗粒与带正电荷的氮气颗粒相撞，电荷随之 转移到颗粒上(溶质颗粒越大，带电越多）；溶质颗粒把它们的电荷转移给收集器，通过高灵 敏度的静电检测计测出溶质颗粒的带电量，由此产生的信号电流与溶质的含量成正比。检 测结果与分析物颗粒有关，信号电流与样品中分析物的质量成正比。
[0041] 上述测试方法采用梯度洗脱的方式进行洗脱，能够在较宽的范围内实现待测成分 的有效分离，同时，采用Corona Ultra电喷雾检测器能够实现极低浓度时的准确测量，克服 了传统测试方法的人工操作带来的不稳定性。
【主权项】
1. 一种ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，其特征在于，依次包括了 下述步骤： 1) 称取孢氨苄甲氧苄啶胶囊内容物Ig置于IOmL萃取池中，用2%甲酸水溶液对样品在 温度60°C，静态提取3min，重复提取2次，提取完成后将提取液中溶剂蒸干，提取物转移至 20ml的容量瓶中，用2%甲酸水溶液定容至20mL，吸取ImL于离心管中，漩涡2min，13000r/ min离心3min，取上清液进行高效液相分析； 2) 高效液相色谱法进行分析时参数设置如下： 流动相：甲醇-水-乙腈，用甲酸调解PH值为4.0; 流速：lml/min; 柱温：35°C; 色谱柱：米用规格为5μηι，4 · 6mm X 250mm 的PhenomenexCl 8柱； 检测波长:272nm; 进样量:5ul; 所述的流动相中甲醇-水-乙腈的体积比为40 :40: 20~35 :35 : 30;所述的流动相在0分 钟至3分钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比为40:40: 20升至35 :35:30;然后在3分钟至9分 钟时间段内甲醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60，再在9-12分钟内甲醇-水-乙腈的体积 比恒定在20:20:60。2. 根据权利要求1所述的一种ASE-HPLC测定萜烯树脂中有机溶剂残留量的方法，其特 征在于，所述的高效液相色谱仪为附带Corona Ultra电喷雾检测器的Thermo U3000高效液 相色谱仪。3. 根据权利要求1所述的一种ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，其 特征在于，所述的有效成分是头孢氨苄和甲氧苄啶。4. 根据权利要求1所述的一种ASE-HPLC测定孢氨苄甲氧苄啶胶囊有效成分的方法，其 特征在于，所述的石墨碳SPE柱。
【文档编号】G01N30/06GK105891366SQ201610259791
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 张云平, 罗达龙, 陈启钊
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所