一种木贼组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种木贼组织培养的快速繁殖方法，包括木贼无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导等步骤，本发明通过生产组培试管苗，繁殖速度快，繁殖系数高，大量快速的获取木贼的无性繁殖体系，成为研究和应用开发中的现实问题。
【专利说明】一种木贼组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及木贼组织培养的快繁方法，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]Equisetum,木贼科,别称:千峰草、挫草、笔头草等,多年生常绿草本，高30?100厘米。根状茎粗短，黑褐色，横生地下，节上生黑褐色的根。地睛茎直立，单一或仅于基部分枝，直径6-8毫米，中空，有节，表面灰绿色或黄绿色，有纵棱沟壑0-30条，粗糙。喜生于山坡林下阴湿处，易生河岸湿地、溪边，或杂草地。主产于中国东北、华北、内蒙古和长江流域各省。药用为木贼科植物木贼的全草，木贼味甘、苦，性平。归肺、肝经，具有疏散风热、明目退翳、止血的功效。木贼夏季采收，除去杂质，晒干或阴干贮藏，药用炮制:除去枯茎及残根，喷淋清水，稍润，切段，干燥，切段。功能主治:疏风散热，解肌，退翳。治目生云翳，迎风流泪，肠风下血，血痢，脱肝，疟疾，喉痛，痈肿。采用孢子繁殖:采下孢子后立即播于土壤表面，稍覆土保持湿度。分茎繁殖:将根茎切成3-6cm长的节段，栽于土壤中，覆土
4-5cm，常浇水，很易生根成活。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种木贼组织培养的快繁方法，本发明通过生产组培试管苗，繁殖速度快，繁殖系数高，大量快速的获取木贼的无性繁殖体系，成为研究和应用开发中的现实问题。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+ 杆菌肽 50mg/L+0.7% 琼脂 +35g/L 蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7% 琼脂 +35g/L 蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率。
[0005]采用本发明制备的木贼生根率高，能耗少，品质高。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.3mg/L+IAA0.001mg/L+2iP0.02mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.0lmg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率，生根率90%。
[0008]实施例2
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.5mg/L+IAA0.005mg/L+2iP0.lmg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率，生根率90%。
[0009]实施例3
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.4mg/L+IAA0.003mg/L+2iP0.05mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率，生根率92%。
[0010]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+ 杆菌肽 50mg/L+0.7% 琼脂 +35g/L 蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7% 琼脂 +35g/L 蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率。
[0011]采用本发明制备的木贼生根率高，能耗少，品质高。
[0012]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0013]实施例1
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.3mg/L+IAA0.001mg/L+2iP0.02mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率，生根率90%。
[0014]实施例2
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.5mg/L+IAA0.005mg/L+2iP0.lmg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x，I个周期后统计生根率，生根率90%。
[0015]实施例3
取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.001mg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，PH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C，诱导出来的腋芽放入H+ZT0.4mg/L+IAA0.003mg/L+2iP0.05mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，光期14h/d，温度28°C，将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001X，I个周期后统计生根率，生根率92%。
【权利要求】
1.一种木贼组织培养的快速繁殖方法，包括木贼无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导，其主要步骤如下: (1)取木贼的带芽茎段，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的木贼带芽茎段，接入H+ZT0.2mg/L+IAA0.0Olmg/L+TDZ0.02mg/L+杆菌肽50mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.8，光照强度12001x，光期12h/d，温度28°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的腋芽放入Η+ΖΤ0.3-0.5mg/L+IAA0.001-0.005mg/L+2iP0.02-0.lmg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖35g/L，琼脂 7g/L，ρΗ5.8，光照 30001χ，光期 14h/d，温度 28 °C ； (4)取步骤(3)继代后的丛生芽进行生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种木贼组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述木贼的获得为，取木贼幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在漂白液中浸泡5min，流水冲洗30min，超净工作台上1%溴水处理12min，无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种木贼组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中木贼生根诱导的方法为将继代后长势良好的丛生芽接种到HE+NAA0.01mg/L的培养基中进行生根诱导，25天一个周期，食用糖50g/L，琼脂7g/L，温度28°C，湿度75%，光照强度200001x, I个周期后统计生根率。
【文档编号】A01H4/00GK104221879SQ201410540627
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司